TRANSFERENCIA DE

OXIGENO EN BIOREACTORES

Ing. Mabel Luna

Modos de transferencia de masa
1. Convectiva: La masa puede transferirse debido al movimiento global del fluido.
Puede ocurrir que el movimiento se efectúe en régimen laminar o turbulento.

2. Molecular o difusión ordinaria: La difusión molecular (o transporte molecular)

puede definirse como la transferencia (o desplazamiento) de moléculas
individuales a través de un fluido por medio de los desplazamientos individuales y
desordenados de las moléculas, debido a una diferencia de concentraciones. La
difusión puede ocurrir en sistemas de fluidos estancados o en fluidos que se están
moviendo.
Analogía: convección de calor-masa
Difusión El flujo de un producto es
proporcional a la gradiente de
concentración (dC/dt) y el área
normal a la dirección del flujo.

Kdif: constante de proporcionalidad y

es el coeficiente de difusión de
medio.
Difusión en 2 fases:
 Transferencia de Oxígeno
Burbuja de aire

L Célula
G O2

Interfase Flujo molar O2 que se transfiere

Gas Liquido de la fase G. a la fase L.
PG (G) (L)
W ´g  k g ( PG  Pi )
CLi>CL Flujo en el liquido:
CLi
pi W ´L  kL (CL  CL )
i

CL
En estado estacionario:
W ´ W ´g  W ´L  k g ( PG  Pi )  kL (CL  CL )
E i

Perfil de presiones parciales y concentraciones de Oxigeno alrededor de la Interfase Gas-

Liquido
 1. Difusión del seno de la burbuja de gas hasta
Transferencia de Oxigeno la interfase gas-liquido
2. Paso a través de la interfase
gas-liquido

3. Difusión del soluto a través de

la capa de liquido aparente
inmóvil
adyacente a la burbuja de gas
4. Transporte del soluto a través
de la masa de liquido hasta la
capa de liquido aparentemente
(1) inmóvil adyacente al agregado
(3) (5) (7)
celular
(9)
(2) (6)
(4) (8)
5. Transporte del soluto a través
de la capa adyacente al agregado
celular
6. Difusión dentro del floculo celular, micelo o partícula del suelo

7. Transporte hasta la envoltura celular

8. Paso a través de la envoltura celular
9. Transporte del soluto hasta el lugar de la reacción bioquímica
intracelular
Ley de Henry: presiones parciales con concentraciones de
líquidos

PG P  HC

pi 1
C P  H ´P
H
P*

CL CLi CL * CL
C: Concentración del gas en equilibrio
con el liquido
H: Constante de Henry
Dividiendo, se obtiene un coeficiente global de transferencia de
masa KL en función de variables medibles
W ´ k g ( PG  HCL )  K L (CL  CL )
i i

KL: coeficiente global

 W´ PG
   C Li
 H .k g H
 W´
  C Li  C L

 kL

 1 1  PG
W ´    CL
k  H
 L H .k g 

1 1 1
  , H muy grande K L  kL
K L k L H .k g
 P
P 
De gráfica: W ´ K L  G  C L   W ´ K L C L*  C L  PG
H 
pi
Por área interfacial A: W´´ K L ACL*  CL  P*

En función del volumen del liquido del reactor si se define CL CLi CL * C

la relación: L
Area Interfacia l
a
Volumen de liquido del reactor

Se obtiene la ecuación de velocidad de transferencia de oxigeno (VTO):

VTO  W  Wa ´´ K L a(C *  CL )

La ecuación general de balance de oxigeno para un fermentador,
esta dado por el cambio total de la concentración de oxigeno en
El liquido:
dCL X
 K L a(C  CL ) 
*
C* : conc de saturación… tablas
dt YO 2
CL : Conc. En el seno del líquido….. instrumentos
El parámetro KLa , (h-1), representa una medida de la capacidad de
aireación de un fermentador en las condiciones de cultivo, geometría
del fermentador, diseño del agitador, etc.

Antes de airear hay que determinar el Kla para el

fermentador

Por eso: Kla es un parámetro de escalamiento.

De ahí que los valores del KLa para un fermentador con un medio de cultivo
específico, deban determinarse experimentalmente o estimarse y
correlacionarse, usando ecuaciones empíricas o adimensionales, con el objetivo
de obtener las herramientas apropiadas de diseño y control de bioprocesos
aerobios.
Métodos para Evaluar el KLa

Método de oxidación del sulfito: Na2SO3 (en lugar del medio)

Por estequiometria:
Sulfito Inicial - Sulfito Final
VTO 
2 t

Reacción: 2 Na2 SO3  O2  Co 2

 2 NaSO4

VTO
CL = 0
KLa  *
C

Limitación del método : dan valores sobredimensionados

Método Dinámico de Humphrey (el mas usado)
Mide KLa en presencia de microorganismos
Requiere de un electrodo de Oxigeno Disuelto
Pb
(Ánodo) A
 Semireacciones:
Microamperimetro O2  2e  
 2OH  (Catodo)
Pb 
 Pb2   2e  (Anodo)
Membrana de teflón
Ag semipermeable
(Cátodo)
Calibración del OD: en dos Puntos

Punto en saturación con aire 100%

Punto en cero concentración O2 (electrodo en solución
de Na2SO3
A

x
0 100 CL

Paso 1) de Desgasificación dCL X


dt YO
2
paso 2) de gasificación
dCL X
 K L a(C *  CL ) 
dt YO
2

(gas Out)
Sin aire
Despejando CL
CL 1  X dCL 
CL  C *  
K L a  YO
2
dt 


X dCL Graficando
YO
2 dt CL CL*
0.1CL*

t 1

Con aire K La
(gas in)
 X dCL 
 
 Y  dt 
 O 2 
Método Directo basado en la Operación en Estado Estacionario
 Medir NA y KLa
 Medida O2 in y O2 out
Por balance de O2 se obtiene
NA
 Medir bien: Flujo de aire,
presión, temperatura: e.e.
 Medir oxígeno gaseoso
KLa 
NA
C *  CL
 Para Fermentadores grandes

NA
KLa 
(C *  C L ) media log
Coeficiente volumétrico de
transferencia de oxígeno
Formas de transferir oxigeno
Transferencia de oxígeno en biorreactores
La transferencia o suministro de oxígeno VTO juega un papel
importante en el escalamiento y economía en la mayoría de los
procesos de fermentación aerobia, desde que éste frecuentemente es
el factor limitante en la determinación del YX/S, YP/S y QP del
biorreactor.

Parámetros de fermentación para procesos

aireados
OBJETIVOS
La aireación y agitación en los procesos fermentativos aerobios
cumple los objetivos:
Suministrar oxígeno necesario a los m.o. para alcanzar sus actividades
metabólicas apropiadas.

Mantener a los m.o. en suspensión.

Transferencia de oxígeno en biorreactores
• En laboratorio: matraces Erlenmeyer-Shaker.
• A escala piloto e industrial: fermentadores-aire comprimido y
dispositivos mecánicos.

• En la producción industrial de levadura de panificación la agitación sólo se da

por el aire comprimido que se esparce.
Transferencia de oxígeno en biorreactores
• El oxígeno disuelto en el caldo se considera como un nutriente
análogo a otros nutrientes disueltos, tales como: azúcar,
aminoácidos, sales inorgánicas etc. Sólo que se diferencian
grandemente en su solubilidad.
• Solubilidad de nutrientes>10 000 mg/L
• Solubilidad de oxígeno<10 mg/L

Razón para el suministro continuo de oxígeno al caldo del cultivo

Ejemplos de fermentaciones industriales aireadas

• Enzimas (pectinasas, celulasas, lactasa…)

• Biomasa (levadura de panificación,….)
• Aminoácidos (ácido glutámico,……)
• Tratamiento aerobio de efluentes,..
• Etc.
Cepillo aireador Difusor de burbuja
Caso: Transferencia de O2 en Fermentaciones sumergidas:

Area Superficia l Del reactor

Relacion para Tranferencia (r) 
Volumen de líquido
O2

”Volumen del medio 20-30%

O2
del volumen del matraz”
Mecanismo para aumentar Área Superficial:

Difusor

Figura 1. Biorreactor de Tanque Agitado típico. 1) Agitador; 2) Rodete;

3) Eje del agitador; 4) Difusor de aire;
5) Serpentín de calentamiento/enfriamiento; 6) Bafles; 7) Motor.
 Demanda de Oxigeno: (NA)
Velocidad de consumo de oxígeno
NA = f(μ, biomasa)
 .x  Mol g .O2 
NA   m 3t ; L.h 
YO2

Donde:
gramos de celula acumulada
YO : Rendimiento :
2
gramos de O2 consumido

YO : 0.5  2.0 g .cel . g .O 

2 2
O2 Como nutriente, es de baja solubilidad en el agua

N : Etapa de no limitación por O2

L: Etapa limitada por O2
 El oxigeno es un aceptor de electrones (mitocondrias de los
procariotas) pero se comporta como nutriente

CL μ
  m
K S  CL

d O 1 dx
NA  
dt YO dt 2

0
CL
Donde: CL ≥ 10 KS
CL = Crítico
CL = Concentración de Oxigeno disuelto
(mg/L, mmol/L)

50  200 m. moles de O 2

 L.h
Valores Usuales de N A  
1,6  3.2 g. O
 2
 L.h
Consumo especifico (QO) y concentración critica (CL
critica) de Oxigeno para algunos m.o.

QO CL critica
Microorganismo
(mmoles/g.h) (mg/L)

Penicillum crisogenun 3.2 0.4

S. cerevisiae 8.0 0.6

E. coli. 10.8 0.3
C. utilis - 1.1
Factores que afectan al KLa
Operativos o por las características del medio.
Viscosidad
Temperatura
Presencia de antiespumantes
Deflectores,
Geometría del agitador, etc.
Eficiencia de absorción (  )
O2 in  O2 ant
ε   100
O2 in

Valores de 
para sistemas industriales 5 - 25%
(13 – 15%)
En condiciones de e. e.
dCL
0
dt
VTO  N A  Q2 in Q2 ant

K L a (C*  CL )
ε  Al inicio VTO, grande CL , ↓
Q2 in Al final VTO, disminuye CL ,↑
Velocidad de Aireación Específica (vvm)
Volumen de aire Flujo de aire Q
vvm   
Volumen de líquido  min . Volumen del líq. del Fermentador VL

deducida NA: g O2 / L. h.
N AT T: K
vvm  2.035  10-4
ε Q: Litros / min.
VL: Litros

Valores típicos de vvm:

Laboratorio: 0.5 – 2.0 vvm.

Industrial: 0.2 – 0.7 vvm.
Velocidad superficial del aire (vS)
Flujo de aire
vS 
Área transversal del Fermentador

Q
vS 
A

Da una idea del tiempo de residencia de las burbujas de aire en el

fermentador

Valores de vS = 30 – 300 cm/min.

Correlación general del KLa

Pg α
K L a  K( ) (vS )β N γ
V

 α, β, γ constantes que dependen del sistema.

KLa: ƒ(geometría del fermentador, reología,
parámetros ambientales, variables de operación)
Correlaciones de KLa

CORRELACION SISTEMA VOLUMEN REFERENCIA

(L)
KLa = Ki (Pg/v)0.95 (Vs) 0.67 Agua con iones 5-65 Cooper et al. (1994)
KLa = Ki (Pg/v)0.72 (Vs) 0.11 Caldo levadura 20000 Cooper et al. (1994)
KLa = 42,167 (Pg/v)0.4 (Vs) 0.50 N 0.5 Agua con iones 100-42000 Richards (1961)
KLa = Ki (N)1.33 (D)0.24 (Vs) 0.50 Agua con iones 100-1000 Fukuda et al. (1968)
KLa = Ki (Pg/v)0.56 (Vs)0.7 N0.7 Agua con iones 500-1000 Fukuda et al. (1968)
KLa = Ki (T)0.20 (H)-1.3 N1.5 D2.3 Vs0.60 Agua con iones 100-100000 Asai of Komo (1982)
KLa = 6,76x10-3 (Pg/v)0.94 (Vs) 0.65 Agua con iones 8 Vilaca et al. (2000)
KLa = 3,2x10-3 (Pg/v)0.35 (Vs) 0.41 Caldo levadura 2-15 Montes et al. (1999)
KLa = Ki (Pg/v)0.33 (Vs) 0.56 Caldo micelial 20-30000 Taguchi et al. (1968)
 Correlaciones de KLa
Para agua – sulfito (Newtoniano)
KLa = 6,76 x 10-3 (Pg / v)0,94 (Vs)0,65

Para solución acuosa sulfito – goma xantano (No Newtoniano)

KLa = 7,76 x 10-3 (Pg / v)0,80 (Vs)0,62

KLa = ( a + b Ni) ( Pg )0,77 (Vs)0,67 , Cooper et.al

v

KLa = ( a + b Ni) (Pg/v) 0,56 (Vs)0,7 (N)0,4 , Richards

Correlaciones de KLa
Se analiza: Pg = c ( Po2 ND3 ) 0,45

Q0,56

Mejor Correlación:

KLa = Ki (Vs) (N)