Procesos de

Bioseparación

Ing. Mario Vela Hipólito

 Unidad 2:
Síntesis del
bioproceso

2.6 Acabado
2.6.1 Introducción

 Las operaciones finales de un proceso de bioseparación son las

de acabado del producto. Estas operaciones permiten incrementar
la pureza del producto, facilitar su manejo y mejorar su apariencia.
2.6.2 Cristalización

 La operación de cristalización consiste en separar un soluto de

una solución mediante la formación de cristales. Una vez formados,
los cristales se separan de la solución obteniéndose el soluto con
un alto grado de pureza.
 Durante el proceso de cristalización los cristales deben
formarse primero y luego crecer. Al fenómeno de
formación de pequeños cristales se le llama nucleación y a
la formación capa por capa de cristal se le llama
crecimiento.
 La sobresaturación es la fuerza impulsora tanto de la
nucleación como del crecimiento de los cristales. Si la
solución está saturada, los cristales no se transforman ni
crecen, mientras que si está subsaturada, éstos tenderán a
disolverse.
 La cristalización es muy utilizada a nivel industrial para
recuperar sales como 𝑁𝑎𝐶𝑙 y 𝑁𝐻4 2 𝑆𝑂4 a partir de
soluciones acuosas. Algunas sustancias orgánicas como la
sacarosa y la glucosa también son obtenidas mediante
procesos que involucran una operación de cristalización.
 La cristalización es una operación ampliamente utilizada
en los procesos biotecnológicos debido a que ofrece entre
otras, las siguientes ventajas: a) se puede obtener en una
sola etapa un producto de una pureza de hasta un 99 %,
b) se puede controlar la operación de tal manera que se
produzca cristales uniformes que faciliten su manejo,
empaque y almacenamiento.
 c) mejora la presentación o apariencia del producto para
su comercialización y d) es una operación que puede
llevarse a cabo a temperaturas moderadas.
 Frecuentemente la
operación de
cristalización va
acompañada de un
lavado de los cristales
en un equipo de
separación sólido-
líquido y de un
secado final
2.6.2.1 Cristales

 Un cristal es un sólido compuesto por átomos, iones o moléculas

dispuestos en un arreglo tridimensional ordenada y periódico
(retícula espacial). La distancia entre los átomos del cristal de
cualquier material es constante y características de dicho material.
 La mayoría de las soluciones cuando forman cristales a
velocidades de crecimiento moderadas y a condiciones
constantes, los cristales formados sólo contienen un
componente alcanzando purezas hasta del 99.8 %

 Las impurezas en este caso son oclusiones atrapadas

dentro de los cristales o que la disolución quede adherida
a la superficie del cristal.
 Las relaciones de equilibrio
para sistemas de
cristalización se presentan en
forma de curvas.
 Las curvas de solubilidad
representan la solubilidad de
soluciones saturadas a
diferentes temperaturas.
 Los datos experimentales de equilibrio sirven de base para
la evaluación de las diversas opciones que existen para
llevar a cabo un proceso de cristalización ya que permiten,
entre otras cosas:
 Determinar si el sólido que se cristaliza sólo contienen el soluto de
interés

 Seleccionar el disolvente
  Establecer el rango de temperatura y presión de operación

 Conocer la concentración de líquido a la salida del cristalizador

 Determinar la recuperación máxima posible de la operación

La curva de solubilidad para estos cálculos separa dos

regiones:
 La región de subsaturación, donde la disolución puede disolver
más soluto

 La región de sobresaturación
 En la zona de sobresaturación existe tres zonas cuya
delimitación pese a no ser precisa, permite la descripción
de comportamientos de las mismas:
 Zona metaestable, donde el soluto se deposita en cristales ya
existentes, pero no forma nuevos
 Zona intermedia, donde el soluto se deposita en cristales ya
existentes y forma nuevos
 Zona lábil, donde los cristales surgen de forma espontanea sin la
necesidad cristales o semillas
 De este modo, mediante ajustes en la operación es
posible mantener un sistema que promueva el crecimiento
de cristales (región metaestable) para procesos en lotes, o
en procesos continuos, la remoción de cristales en la salida
implique la necesidad de crear nuevos centros de
crecimiento (región intermedia)
2.6.2.2 Modo de operación

 El modo de operación en una cristalización es la técnica

empleada para generar la sobresaturación de la solución. Los
principales modos para generar sobresaturación son: a)
enfriamiento, b) enfriamiento evaporativo, c) evaporación térmica y
d) evaporación térmica al vacío.
 La sobresaturación por
enfriamiento depende de la
solubilidad del soluto con la
temperatura, al reducir la
temperatura baja la
solubilidad y se propicia la
sobresaturación
 La sobresaturación por
enfriamiento evaporativo se
produce con auxilio de un
sistema de vacío.
 En la sobresaturación por
evaporación térmica se
transfiere calor al sistema
para evaporar disolvente y
generar la formación de
cristales por una variación
en las interacciones
hidrofóbicas del soluto.
 En la sobresaturación por
evaporación térmica al
vacío, se lleva a cabo la
evaporación con auxilio de
vacío.
 La velocidad de nucleación afecta el tamaño de los
cristales, a mayores velocidades de nucleación, menor es
el tamaño de los cristales debido al reducido tiempo de
residencia. Existen dos mecanismos de formación de
cristales:
 Nucleación primaria

 Nucleación secundaria
 En la nucleación primaria, el cristal nuevo se origina
espontáneamente a partir de la solución sobresaturada
(homogénea) o a partir de material insoluble
(heterogénea)

 La nucleación secundaria por su parte es la formación de

cristales nuevos como resultado de la presencia de cristales
ya crecidos de soluto.
2.6.2.3 Equipos de cristalización

 En general los equipos de cristalización pueden operar en dos

formas:
 Por lotes

 Continua
Cristalizadores por lotes

 Los cristalizadores por lotes son tanques agitados con sistemas

de vacío y enfriamiento. El ciclo de cristalización dura entre 2 y 8
horas.

 Al finalizar el ciclo, el material cristalizado se retira del

cristalizador para lavarse y secarse.
 La mayoría de los productos
biotecnológicos que involucran
una cristalización se obtienen
en operaciones por lotes.
Cristalizadores continuos

 Existen tres tipos básicos de cristalizadores continuos:

 Cristalizador-evaporador con circulación de líquido

 Cristalizador al vacío y con circulación forzada de magma

 Cristalizador de tiro y mampara

Cristalizador con circulación de líquido

 La sobresaturación se produce por evaporación. La alimentación

concentrada y caliente se mezcla con la corriente de recirculación
y se bombea a la cámara de evaporación donde el disolvente se
evapora adiabáticamente con ayuda de un sistema al vacío.
 El líquido sobresaturado fluye hacia la parte inferior del
cristalizador a través de un tubo de bajada y después
hacia arriba a través de un lecho fluidizado de cristales que
permite una liberación efectiva de la sobresaturación.
 Los cristales más grandes sedimentan y son retirados por el
fondo del cristalizador. Los cristales más finos pueden ser
retirados por la parte superior para incrementar el tamaño
de los cristales.
Cristalizador al vacío y circulación
forzada de magma

 También conocido como cristalizador con remoción de producto

mezclado y suspensión mezclada, consta de un cuerpo principal
dimensionado para la liberación de vapor con un nivel de líquido
apropiado para retener los cristales en crecimiento.
La alimentación se mezcla con
la corriente de salida del
cuerpo principal y se hace
pasar por un intercambiador
donde se eleva su temperatura
entre 2 y 6 °𝐶.
 La suspensión en la superficie
del cristalizador libera parte del
disolvente produciéndose la
sobresaturación.
Cristalizador con tubo de tiro y
mampara

 Este equipo, los cristales de mayor tamaño que sedimentan en el

fondo del cristalizador son impulsados hacia la región superior
donde se efectúa la evaporación y se origina la sobresaturación,
mediante un impulsor grande que se mueve a bajas velocidades.
 Una mampara externa al tubo de tiro permite formar una
zona de sedimentación externa a partir de la cual los
cristales finos pueden ser retirados para incrementar el
tamaño del cristal.

 La alimentación mezclada con la corriente de finos se

hace pasar por un intercambiador de calor y se introduce
por la parte inferior del cristalizador.
 Unidad 2:
Síntesis del
bioproceso

2.7 Secado
2.7.1 Introducción

 El secado es el último paso en la recuperación de ciertos

productos biotecnológicos. Consiste básicamente en la reducción
del contenido de disolvente en el producto mediante una
evaporación o sublimación.
 Tiene como propósito estabilizar el producto, preservar su
actividad, reducir su volumen o recuperar el disolvente.

 Si un sólido húmedo se expone a una corriente continua

de aire puede ganar o perder humedad dependiendo de
la presión de vapor que ejerza el agua del sólido y de la
presión de vapor de la corriente del aire.
 Si la presión de vapor del agua del sólido es mayor que la
presión que la presión de vapor del aire, entonces el sólido
pierde humedad, en caso contrario su humedad aumenta.

Cuando ambas presiones son iguales, el sistema está en

equilibrio
 La presión de vapor que ejerce la humedad contenida en
un sólido depende de la forma de la humedad, el tipo de
sólido y la temperatura.

 En la mayoría de los materiales biológicos se pueden

distinguir dos formas de agua:
 Agua libre

 Agua ligada
 El agua libre se caracteriza por ejercer una presión de
vapor igual a la del agua pura. Este tipo de agua se
localiza en los espacios entre las células de los materiales o
en los capilares de precipitados porosos.

 El agua ligada se caracteriza por ejercer una presión de

vapor menor a la del agua pura. Este comportamiento se
presenta en el interior de las células.
2.7.2.2 Métodos de secado

 El método de secado que debe ser utilizado en un bioproceso

depende del tipo de producto, sus propiedades físicas, su tolerancia
a la temperatura y los requerimientos de proceso en cuanto a la
forma de operación ya sea por lotes o continua.
Métodos adiabáticos

 Estos métodos consisten en el secado por medio de la adición de

calor con aire caliente. Los secadores por aspersión y los
secadores de tipo instantáneo operan de acuerdo a este método.

Son utilizados para partículas que no toleran altas temperaturas.

Métodos no adiabáticos o por
conducción

 En el secado no adiabático, el calor se proporciona en forma

indirecta por conducción a través de una pared metálica.

 Generalmente los secadores no adiabáticos operan a presión

reducida y se emplean para el secado de cristales y precipitados.
 El secado por congelamiento, un caso de secado no
adiabático, se efectúa por sublimación de agua
congelada empleando bajas presiones y temperaturas. Se
emplea para secar proteínas terapéuticas que no toleran
temperaturas arriba de las ambientales.
2.7.2.3 Equipos de secado

 Los equipos de secado son muy variados. Los empleados en los

procesos biotecnológicos se pueden clasificar de acuerdo al
método de secado empleado en:
 Secadores adiabáticos

 Secadores no adiabáticos
Secadores adiabáticos

 Los secadores adiabáticos producen el secado empleando el flujo

de entrada de un gas caliente y seco. El gas evapora líquido del
sólido y sale frío y húmedo. Los principales tipos de secadores
adiabáticos son: a) por aspersión, b) instantáneos y c) de lecho
fluidizado
Secador por aspersión

 En los equipos por aspersión es posible secar soluciones o

suspensiones de sólidos, rociando éstas en un recipiente a través
del cual se hace pasar una corriente de aire caliente.
 Los sólidos secos se
colectan en el fondo
del secador y del
fondo de ciclones que
se utilizan para
procesar los polvos de
salida del secador.
 Unos de los componentes claves del secador por
aspersión es el atomizador que permite formar pequeñas
gotitas de la mezcla incrementando notablemente el área
de secado, de tal manera que el tiempo de secado sea
menor que el tiempo que dura la gota en alcanzar la
pared del recipiente.
Secador instantáneo

 Los secadores instantáneos o flash son utilizados para secar

sólidos de baja humedad o sólidos difíciles de manejar por formar
partículas muy pequeñas o ser muy pegajosos en forma seca
(almidón o algunas proteínas)
 En un secador instantáneo, el
material sólido que se va a
secar se alimenta
conjuntamente con aire
caliente a un ducto, a través
del cual el sólido viaja y se
seca por acción del aire.
 Al final del ducto la corriente de aire sólido se separa por
acción de un ciclón. Parte de la corriente es recirculada
para secar las partículas grandes que son más difíciles de
secar.

 Si debido a su tamaño las partículas de la alimentación no

pueden ser transportadas por el secador, el secador puede
incorporar un molino a la entrada del ducto de secado.
Secador de lecho fluidizado

 Este secador puede ser utilizado para secar rápidamente

materiales sólidos que permitan su fluidización por medio de una
corriente de aire caliente.
 El material se alimenta a
un lecho soportado por
una malla inferior y se le
hace pasar una corriente
de aire caliente, de tal
manera que las partículas
de sólido se separa y
forman una suspensión
fluida.
 Esto permite su transporte hasta el punto de descarga. Los
secadores de lecho fluidizado continuos pueden ser
circulares, cuadrados o rectangulares en su sección de
flujo.
Secadores no adiabáticos

 Los secadores no adiabáticos requieren de un sistema de

calentamiento y generalmente trabajan con sistemas de vacío. Los
principales, son el tipo charola, doble cono, tambor rotatorio y
liofilizador.
Secador de charolas

 Los secadores de charolas son utilizados a escala piloto para

producciones bajas de productos de alto valor económico,
susceptibles a temperaturas elevadas o a daño por manejo
mecánico excesivo.
 En el secador de
charolas la muestra se
coloca en las charolas
que se introducen a una
cámara. Las charolas son
calentadas por medio de
chaquetas de vapor y la
cámara cuenta con un
sistema de vacío.
Secador de doble cono

 El secador de doble cono es un secador giratorio al vacío, que

tiene dos conos unidos por sus bases por medio un cilindro corto.

 Este recipiente gira sobre un eje para inducir el movimiento del

lateral y evitar zonas de sobrecalentamiento.
 El secador cuenta
con un sistema de
vacío para facilitar el
secado.
Este tipo de secador
es ampliamente
utilizado en la
obtención de
productos a escala
industrial.
Secador de tambor rotatorio

 Un secador tipo tambor rotatorio consiste en un recipiente

cilíndrico horizontal que no gira y el movimiento del lateral se
realiza por acción de agitadores internos que remueven el material
de las paredes calientes del tambor.
 Estos equipos
generalmente
operan por lotes y
el calor se provee
por medio de
agua caliente que
fluye por una
chaqueta o un
tubo concéntrico
a la flecha.
Liofilizadores

 Los liofilizadores son utilizados para obtener sólidos secos de

alto valor comercial. Se emplean cuando los sólidos son muy
frágiles para ser tratados por un método convencional de secado
o una filtración o demasiado solubles para una cristalización.
 En un proceso de liofilización la solución a secar, con una
concentración de entre 5 − 25 % en peso/volumen, se
alimenta a un sistema de filtrado para ser esterilizada y
entrar al secador que opera en forma esteril.
 En el proceso de secado, la solución primero se congela y
posteriormente se deshidrata mediante un sistema de
calentamiento y un sistema de vacío, acoplados de tal
manera que el agua de la muestra siempre esté en forma
sólida y su pérdida sea sólo por sublimación.