MICROBIOLOGIA GENERAL

La Microbiología es la ciencia encargada del estudio de los microorganismos, seres vivos

pequeños (mikros pequeño, bios vida y logos estudio), también conocidos como microbios. Es la
rama de la biología dedicada a estudiar los organizamos que son solo visibles a través del
microscopio (virus, procariontes y eucariontes simples).
Algunas áreas de estudio de la Microbiología.
• Bacteriología: Se encarga de estudiar a las bacterias.
• Micología: Se encarga de estudiar a los hongos.
• Virología: Se encarga de estudiar a los virus.
• Protozoología: Se encarga de estudiar a los protozoarios.
• Inmunología: Se encarga de estudiar la forma en la cual el cuerpo se defiende de las
enfermedades que lo atacan.
 MICROBIOLOGIA FORENSE

Es una disciplina que proporciona nuevas metodologías con el fin de resolver o explicar
muchos sucesos de muerte natural como violenta. Sin embargo, la Microbiología Forense es
algo más que eso, pues permite determinar la presencia y clasificación de microorganismos
en restos cadavéricos muy antiguos y poder así determinar si la causa del fallecimiento fue
por causas infecciosas o no. Permite conocer qué microorganismos intervienen en los
procesos relacionados con la descomposición cadavérica, facilitando la determinación del
ámbito temporal de la muerte.
 APLICACIONES DE LA MEDICINA FORENSE EN CRIMINALISTICA

Sexología forense: agresiones sexuales y maltratos.

Medicina Legal: en accidentes de trabajo o enfermedades profesionales de etiología
infecciosa, además en problemas infecciosas en el aborto provocado.
Derecho Médico: problemas al determinar la responsabilidad profesional de los médicos
derivada de contagios por enfermedades como: VIH, hepatitis y otros cuadros infecciosos.
Tanatología: estudia los fenómenos cadavéricos y de putrefacción en los que hay
microorganismos involucrados
Estudio del agente causal de brotes y epidermias: Ejemplo, brotes de Salmonella.
Bancos de datos microbiológicos e identificación de su origen.
Investigación de ataques bioterroristas.
LA CRIMINALISTICA Y LA INVESTIGACION DE DELITOS Y/O RIESGOS
DE ORIGEN BIOLOGICO

1. LA OPERATORIA POLICIAL DEMANDA DE PERSONAL

ESPECIALIZADO EN LA INVESTIGACION DE POSIBLES
EVENTOS DELICTIVOS QUE DIRECTA O
INDIRECTAMENTE COMPROMETEN DE MANERA
PELIGROSA LA SALUD HUMANA Y EL EQUILIBRIO
AMBIENTAL.

DELITOS CONTRA LA SALUD PUBLICA Y DE PELIGRO COMUN

DELITOS CONTRA LOS RRNN Y EL MEDIO AMBIENTE
2. SE REQUIERE DE PERICIAS, MONITOREOS, ANALISIS DE
LABORATORIO, INFORMES DE MATERIA SANITARIA Y OTROS
QUE DEBEN SER PUESTOS A DISPOSICION DEL ORGANO DE
LINEA Y DEL SECTOR COMPETENTE
DELITOS CONTRA FORMAS EVIDENCIAS MAS COMUNES ANALISIS ESPECIALES Y COMPLEMENTARIOS

VIDA, CUERPO Y LA SALUD HOMICIDIO MANCHAS SANGRE, PELOS, SEMEN,FAUNA CADAVERICA HOMOLOGACION DE PELOS ITB, ADN, IPM
SANGRE, LANUGO, MECONIO, CLOSTRO ITB
ABORTO SANGRE, PELOS, SARRO UNGUEAL ITB
LESIONES
SEMEN, SARRO UNGUEL ITB, ADN
LIBERTAD V. SEXUAL SEMEN ITB
PROXENETISMO
ALIMENTOS COMPARATIVO MICROSCOPICO
ORDEN ECONOMICO ADULTERACIONES ALIMENTOS DE DISTRIBUCION GRATUITA
VENTAS ILICITAS ADITIVOS, PRODUCTOS NATURALES
OTROS
INSP. HIGIENICO - SANITARIA
SEGURIDAD PUBLICA SALUD PUBLICA ALIMENTOS, AGUA, MEDICINAS, P. NATURAL PELIGRO MICROBIOLOGICO
- CONTAMINACION BOTANICAS (COCA, AMAPOLA, MARIHUANA) INSPECCION OCULAR
- TID AGENTES BIOLOGICOS PELIGRO MICROBIOLOGICO
PELIGRO COMUN
RESIDUOS SÓLIDOS Y LÍQUIDOS A. CRIMINALISTICA SOBRE IA
ECOLOGIA C. RR NN y el MA DESECHOS INDUDTRIALES O DOMESTICOS I. OCULAR (AMB. NATURALES, URBANOS, AGRÍCOLAS,
PECUARIOS)

ESPECIES FLORA – FAUNA PROTEGIDAS ( Comercialización ilegal)

RECURSOS HIDROBIOLÓGICOS (Métodos prohibidos de pesca)
 ¿POR QUE UTILIZAR LA MICROBIOLOGIA FORENSE?

1º) AUMENTA LA INCIDENCIA DE PELIGROS DE

ORIGEN MICROBIOLOGICO.

2º) PERMITE ESTIMAR, LAS CARACTERISTICAS DEL

PELIGRO MICROBIOLOGICOS, PARA ALERTAR A LAS
AUTORIDADES COMPETENTES.

3º) ES UNA DISCIPLINA EN EVOLUCION

 MICROBIOLOGIA
Estudio de la microorganismos que se relacionan
con la actividad y bienestar del hombre

LOS MICROORGANISMOS EN EL
BIOLOG.FORENSE MICROBIOL.APLICADA
CAMPO DE LA CRIMININALISTICA
AGENTES BIOLÓG.
SUST. DERIV.

MICROORGANISMOS DE MICROORGANISMOS MICROORGANISMOS ESPECIALES

AMBIENTES ESPECIALES INDESEABLES DE USO NOCIVO EN POBLACION

BACTERIAS-MOHOS TOXINAS MICROORGANI

*** **** RICKETSIAS-VIRUS SUSTANCIA SMOS
BILOGICAMENT. GENETICAMEN
MICROORGANISMOS DERIVADA TE
BACT.-MOHOS-LEVAD. MODIFICADOS
PATOGENOS (OGM)
ALGAS -PROTOZOOS

MICROORGANISMOS
MICROORGANISMOS DELITOS
SEGURIDAD
Y POLUCION ARMAS
DETERIORADOS DE NACIONAL
BIOLOGICAS
* LOS PRODUCTOS
ORDEN INTER. BIOLOGI
COS
TIPIFICACION
ESCENA DESEQUILIBRIO *
SUSTRATOS SUELO-AIRE
RESIDUOS Y
SUBSTANCIAS DEL AGUA * NORMAS NORMAS DE
MICROFAUNA
MICROFLORA DE CALIDAD
DELITO AMENAZA DELITO
CONDICIONES CONTRA LA
PARA LA PREVENC. DE LOS DE ACTITUD FE Y LA
DELITO SALUD
HISTORIA SALUD PÚB.
CONTRA LA SANITARIA PDTOS.
AMBIENTAL SALUD PÚB.
INSPECCION
HIGIENICO-SANITARIA VIDA UTIL (Multip. De
OBSERVACION BIOMASA PERFIL MICRO INFECCIONES InNTOXICACIONES - Fábricas y locales de microorganismos)
comercio de alimentos.
MICROSCOPICA BIKLOGICO (Vias de (los microorganismos se - Mercados-centros de
Infección) multiplican y producen Acopio-Restaurántes.
toxinas) - Chancherías ALTERACION
- Playas-Piscinas. DE LOS PDTOS.
 PELIGROS ASOCIADOS A LOS ALIMENTOS
• FISICOS
Astillas, guantes, fragmentos de metal, vidrio
Insectos, cabellos, hongos, excremento de roedor, etc.
• QUIMICOS
Pesticidas, residuos de antibióticos, aflotoxinas, aditivos, etc.
• BIOLOGICOS
Bacterias patógenas, parásitos, hongos,virus.
 PELIGROS BIOLOGICOS

• BACTERIAS
• PARASITOS
• HONGOS
• VIRUS
BACTERIAS
Anatomía de una bacteria
FLAGELOS ESPORAS
 CURVA DE CRECIMIENTO BACTERIANO

Log.
Nº
Bact.

Tiempo de incubación
POSIBLES DESTINO DE UN MICROORGANISMO DESPUES DE INGRESAR A UN
ALIMENTO

Nº
de
m.o.

Crecimiento

Sobrevivencia

Muerte

Tiempo de almacenamiento
FACTORES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO Y SOBREVIVENCIA DE MICROORGANISMOS EN
ALIMENTOS

INTRINSECOS EXTRINSECOS
• pH • TEMPERATURA
• CONGELACIÒN (sobrevivencia)
• ACTIVIDAD DE AGUA (Aw) • REFRIGERACIÓN (sobrevivencia/ crecimiento)
• POTENCIAL REDOX (Eh) • CALENTAMIENTO (muerte)

• COMPOSICIÓN NUTRICIONAL • TIEMPO DE ALMACENAMIENTO

• SUBSTANCIAS ANTIMICROBIANAS • ATMOSFERA
• HUMEDAD RELATIVA
• CONDICIÓN FISIOLÓGICA DEL
MICROORGANISMO ( stress)
 En general el número y tipo de microorganismos presentes en un alimento elaborado esta influenciado
por 4 factores

1. EL AMBIENTE EN EL CUAL FUE OBTENIDO

2. LA CALIDAD MICROBIOLOGICA DEL ALIMENTO ANTES DE SER TRATADO

3. LAS CONDICIONES HIGIENICAS EN LAS CUALES ES MANIPULADO Y PROCESADO

4. LAS CONDICIONES DE ENVASADO, ALMACENAMIENTO Y POSTERIOR MANIPULACIÓN

Factores que influyen en el grado de peligrosidad

Aw MINIMA PARA EL CRECIMIENTO DE DIFERENTES TIPOS DE MICROORGANISMOS

TIPO DE MICROORGANISMOS MINIMA Aw REQUERIDA

BACTERIAS (la mayoría) 0.90

LEVADURAS 0.80

HONGOS 0.70
 Ejemplos de valores de Aw para alimentos

ALIMENTO Aw

CARNE 0.95 – 0.99

LECHE
FRUTAS
HORTALIZAS

PAN 0.93 – 0.95

LECHE EVAPORADA
PASTA DE TOMATE

QUESO 0.85 – 0.93

LECHE CONDENSADA

MARMELADAS 0.60 – 0.85

JARABES

GALLETAS < 0.60

PASTA
LOS TRES PATOGENOS MAS COMUNES
• Salmonella
- Causante de Infección
• Staphylococcus aureus
- Causante de intoxicación
• Clostridium perfringens
- Causante de toxiinfección
 ALGUNOS PATOGENOS CAUSANTES DE ENFERMEDAD
SEVERA

Clasificados como riesgo severos directos

• Escherichia coli (hamburgesa, sidra y jugo de manzanas)
- colitis hemorrágico
• Clostridium botulinum (conservas caseras)
- Botulismo
• Listeria monocytogenes (queso blanco, alfalfa, ensalada de col)
- Listeriasis
• Vibrio vulnificus(ostras)
- Septicemia fulminante
ALGUNOS PATOGENOS CAUSANTESDE ENFERMEDAD
MODERADA

AMPLIA DISTRIBUCION DISTRIBUCION LIMITADA

• Salmonella spp. • S. aureus
• Shigella spp. • C. perfringens
• Otras E. coli patógenas • Campylobacter jejuni
• Streptococcus pyogenes • Trichinella spiralis
PARASITOS
 PARASITOS

ASOCIADOS CON FRUTAS Y VERDURAS

(con contaminación fecal)

PROTOZOOARIOS
• Entamoeba
PLATELMINTOS (gusanos planos)
• Taenia solium
• Taenia saginata
NEMATELMINTOS (gusanos redondos)
• Ascaris lumbricoides
HONGOS
 HONGOS

• CRECEN EN MATERIA ORGANICA

• CADA COLONIA FORMA UN MICELIO

Micelio compuesto de hifas

• CIERTAS ESPECIES PRODUCEN MICOTOXINAS:

- Aflotoxinas
- Ochratoxina
- Zearalenona

• LAS MICOTOXINAS PUEDEN ESTAR PRESENTES EN ALIMENTOS

Aflotoxinas en cereales.
 ENFERMEDADES CAUSADAS POR LAS AFLOTOXINAS

• DOSIS BAJAS
- Cáncer al hígado

• DOSIS ALTAS
- Necrosis del hígado

• SE ABSORBEN Y PASA DEL INTESTINO A LA LECHE

• PRODUCTOS DEL MANI HAN CAUSADO BROTES EN AVES

VIRUS
 VIRUS

• LA HEPATITIS A ES UNA DE LAS PRINCIPALES ENFERMEDDADES VIRALRES QUE SE

TRASMITE POR ALIMENTOS

• LOS VIRUS EN ALIMENTOS:

• No se multiplican
• Sobreviven por un periodo determinado
• Provienen de contaminación directa
 FACTORES QUE FAVORECEN BROTES DE ETA

• ALMACENAMIENTO INADECUADO
- Temperatura

• COCIMIENTO INSUFICIENTE
- Carnes, bisteck, hamburgesas

• CONTAMINACION CRUZADA
- Bacterias pasan de materiales crudos a cocidos
.No competencia
. Abuso de temperatura
 PREVENCION DE ETAs

• EVITAR CONTAMINACION
- Buenas Prácticas de Manufactura (BPM)

• DESTRUIR PATOGENOS
- Tratamientos térmicos

• EVITAR MULTIPLICACION
- Refrigeración
 CALIDAD DE UN PRODUCTO ALIMENTICIO
VALOR ALIMENTICIO

NUTRICIONALES SALUD
ELEMENTOS DIETETICOS

SANITARIOS INOCUIDAD

ESTABILIDAD

TECNICOS VIDA UTIL

IMPACTO MEDIO AMBIENTE

HEDONICOS CRITERIOS ORGANOLEPTICOS

 LA MUESTRA PARA EL ANALISIS
MICROBIOLOGICO
Es importante que la muestra de alimento refleje con
exactitud las condiciones microbiológicas existentes en el
momento del muestreo.

Se debe tratar de mantener en lo posible constante la carga

o microflora original.

En los planes de muestreo el cálculo del tamaño de la

muestra depende de las probabilidades de presencia de
patógenos.
 Consideraciones sobre el muestreo

• La Muestra puede estar referida a una o mas unidades de

producto estraidas de un lote, remesa o una cantidad
definida del producto.

• Tamaño de la muestra es el número de unidades de

producto contenidas en la muestra.

• Es representativa cuando su estado es lo mas parecido

posible al conjunto o lote del cual se ha extraído.
 Tipos de muestras

OFICIALES
Formal, representa al lote de procedencia
Se toman según prescripciones reglamentarias.

NO OFICIALES
Informativa.
Inspecciones, encuestas, operativos

INCIDENTAL
Circunstancial, para el esclarecimiento de una posible
relación de peligro o cuestionamiento de su inocuidad
Se sospecha de la presencia de patógenos.
• El muestreo en el caso de muestra incidental es
casual, por lo que generalmente es no representativa.

• El análisis tiene carácter explorativo y selectivo.

Aparentan normales al examen directo.

• Caracterización de la peligrosidad de productos o

mercadería con eventuales defectos visibles

• Investigación de infracciones de la ley.

 MUESTRAS

La muestra ingresa al Laboratorio DIRCRI a la Sección Muestra con

su respectivo Oficio,en el cual se indica el tipo de examen
requerido. Se le asigna un Código y N° de Muestra para el registro.

Cuando el producto es perecible se lleva inmediatamente al

Laboratorio de Biología (S. Microbiología) para su análisis.

Se le asigna un Código de Análisis

Se realizan los exámenes

• ALIMENTOSDE VENTA AMBULATORIA

• ALIMENTOS CRUDOS

• ALIMENTOS COCIDOS

• MANIPULADORES

• SUPERFICIES
A. PROCEDENCIA
B. ANTECEDENTE
C. REFERENCIAS
D. DESCRIPCION
Condiciones de envío, tipo de envase, especificaciones del etiquetado (F.
de Vencimiento), volumen o peso del producto, aspecto, consistencia.
E. EXAMEN DE LABORATORIO
1. Observación macro - microscópica
Envase: resistencia e inocuidad, garantía de estabilidad del
contenido, evite su contaminación, no altere calidad ni sus
especificaciones sensoriales.
Contenido: Restos de insectos R. vegetales
Formas de parásitos Sust. terrosas
Mohos C. extraños
Levaduras Otros:
2. Análisis microbiológico
Recuento de microorganismos aerobios mesófilos
Numeración de coliformes totales
Escherichia coli
Staphylococus aureus
Salmonella spp.
Bacillus cereus
F. CONCLUSIONES
(condiciones de aptitud)
G. APRECIACION CRIMINALISTICA
Condiciones de riesgo, características del peligro,
condiciones higiénico - sanitaria, calidad...
METODO DE RECUENTO DE AEROBIOS MESOFILOS
ICMSF 2nd Edition. 1978 reprinted 1988 (with revision) University of Toronto Press. Enumeration of mesosophilic
: the agar plate methods. Method 1 (The Standard Plate Count, pour plate, or Aerobic Plate Count)

10 g de muestra( mínimo) + 90 ml de agua de peptona(ó 9 veces el tamaño de la muestra)

Dependiendo del tipo de muestra utilizar:

Blender (15,000-20,000 rpm) 2.5 minutos máximo ó
Stomacher (230 rpm) 1 minuto

Cuando se trabaja con 1 ml de la dilución

+ 9 ml diluyente, se homogeniza aspirando
10 veces con una pipeta estéril.
Dilución 10 -1 Dilución 10 -2 Idem Serie de diluciones decimales
Cuando se trabaja con 10 ml de la dilución
procedimiento 10 -3, 10 -4………
anterior
+ 90 ml diluyente, se homogeniza agitando
vigorosamente 25 veces en un arco de 30 cm

1 ml 1 ml 1 ml 1 ml

•Agregar 10-15 ml de agar Plate Count temperado a

44-46°C. Este proceso no debe demorar más de 20
minutos desde la primera dilución. .
•Hacer controles de esterilidad del agar solo y del
Adición de agar agar más el diluyente.
a las placas •Mezclar inmediatamente el inóculo con el agar con
movimientos de rotación de la placa horario y
antihorario alternados con movimientos hacia delante
y atrás sobre una superficie nivelada. (5 de cada uno)
•Dejar solidificar el agar e invertir las placas.

Incubar 48 +- 3 h
a 29-31 °C
 GUÍA PARA EL REPORTE
Cómputo del SPC Cómputo del ESPC Cómputo y registro Reporte e Repetibilidad
Spreaders
del SPC interpretación y Error personal

A) Si el conteo individual
A) Seleccionar 2 placas Considerar sólo los A) Si en la placa se A) Reportar los conteos Un segundo conteo
de las placas no está
de una dilución que 2 dígitos significativos presentan colonias como SPC ó ESPC por en una placa deberá
entre 30-300, reportar
presenten 30-300 en el reporte de SPC y spreaders, contar las gramo ó ml de alimento estar :
como ESPC (Recuento
colonias por placa. ESPC. colonias fuera del según sea el caso.
en Placa Estimado):
Promediar los conteos y Si el tercer dígito es área spreader, a) Dentro del 5% de
multiplicar por la inversa = ó >5 aumentar el que no debe ser más la primera si lo
b) Si son > 300, dividir
de la dilución. segundo dígito en una de la mitad del área realiza la misma
las placas en secciones
unidad. de la placa. persona.
radiales(2,4,8..), contar
B) Promediar ambas
las colonias y multiplicar
placas aún así una de B) Reportar la presencia b) Dentro del 10%
por el factor que
ellas tenga conteos fuera de colonias spreaders de la primera si lo
corresponde para obtener
del rango. cada vez que el área realiza otra persona.
el recuento estimado
afectada exceda 1/4
por placa; promediar y
del área de la placa.
multiplicar por la inversa
de la dilución

c) Si hay > 200 colonias

en 1/8 de la placa,
multiplicar 1600 por
aquella dilución y reportar
el ESPC como > el
resultado.

d) Cuando no hay
colonias en las placas de
menor dilución, reportar el
ESPC como < 0.5 veces
la dilución
 NUMERACION DE COLIFORMES
Método: ICMSF Micoorganisms in foods 1. Their Significacce and Methods of Enumeration. Vol.. 1; pp 12 – 128 ;2nd Ed. 1978.
Reprinted 1988 (with revisions) University of Toronto Press. ENUMERATION OF COLIFORMS: DETERMINATION OF MOST
PROBABLE NUMBER (NMP). Method 1 (North American)

10g de muestra + 90cm3

de agua peptonada Homogeneizar en blender entre 15000 - 20000
rpm x 2.5 min.

1cm3 1cm3

9 cm3 AP 9 cm3 AP
9 cm3 AP
10 -1 10 -3
10 -2

ETAPA PRESUNTIVA :
Incubar a 36°C+-1°C x 48-+2horas; la lectura
positiva se evidencia por la formación de gas
(atrapado en la campana de Durhan) y turbiedad en el
Tubos con 9ml de caldo medio que evidencia el desarrollo de microrganismos.
lauril sulfato con Los tubos contabilizados como positivos se pasan a
campana de durhan La siguiente etapa.
ETAPA CONFIRMATIVA:
Pasar 2 asadas de inóculo, (asa de 3mm de diametro)
de cada tubo positivo a tubos que contengan caldo
Tubos con 9ml de verde brillante bilis al 2% provistos de campana de
caldo verde brillante durhan e incubar a 36°C +-1°C x 48+-2horas.
bilis al 2% La lectura de tubos positivos se evidencia por la
formación de turbiedad y gas atrapado en la campana
de durhan.. La cantidad de tubos positivos arrojan
valores que describen el NMP de COLIFORMES /g
de muestra analizada, segun la tabla de NMP del pte
método.
 NUMERACION DE COLIFORMES FECALES
Método: ICMSF Micoorganisms in foods 1. Their Significacce and Methods of Enumeration. Vol.. 1; pp 125-139, 106 – 111 ; 2nd Ed.
1978. Reprinted 1988 (with revisions) University of Toronto Press. ENUMERATION OF COLIFORMS : Method 1 . Determination of
Coliforms Organisms of Fecal Origin. Method 1

10g de muestra + 90cm3

de agua peptonada Homogeneizar en blender entre 15000 - 20000
rpm x 2.5 min.

1cm3 1cm3
9 cm3 AP
9 cm3 AP 10 -3
9 cm3 AP
10 -1
10 -2 ETAPA PRESUNTIVA :
Incubar a 36°C+-1°C x 48-+2horas; la lectura
positiva se evidencia por la formación de gas
(atrapado en la campana de Durhan) y turbiedad en
Tubos con 9ml de caldo el medio que evidencia el desarrollo de
lauril sulfato con microrganismos.
Los tubos contabilizados como positivos se pasan a
campana de durhan La siguiente etapa.
ETAPA CONFIRMATIVA:
Pasar 2 asadas de inóculo, (asa de 3mm de
diametro) de cada tubo positivo a tubos que
Tubos con 9ml de contengan caldo E.C. provistos de campana de
caldo E.C. con campana durhan e incubar a 44.5°C +-2°C x 48+-2horas.
La lectura de tubos positivos se evidencia por la
de durhan formación de turbiedad y gas atrapado en la
campana de durhan. La cantidad de tubos positivos
arrojan valores que describen el NMP de
COLIFORMES FECALES/g de muestra
analiazada, segun la tabla de NMP del pte método.
 NUMERACION DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS
Método: ICMSF Micoorganisms in Foods 1. Their Significance and Methods of Enumeration. Vol.. 1; pp 218 – 228 ;2nd Ed. 1978.
Reprinted 1988 (with revisions) University of Toronto Press. ENUMERATION OF COAGULASE-POSITIVE STAPHYLOCOCCI.
METHOD 5 . (MPN Telurite Manitol Glycine Broth).

10g de muestra + 90cm3

de agua peptonada Homogeneizar en blender entre 15000 - 20000
rpm x 2.5 min.

1cm3 1cm3

9 cm3 AP
9 cm3 AP 9 cm3 AP
10 -2
10 -3 10 -5
Incubar a 36°C+-1°C x 48-+2horas, con el
propósito de impedir el acceso de oxígeno ,
añadir a cada tubo agar-agar al 2%, fundido, de
tal manera que forme una capa de 2-3 cm por
Tubos con 9ml de caldo encima del caldo. La presencia de
Telurito manitol glicina Staphylococcus aureus , se pone de manifiesto
por la aparición de un precipitado de color negro
o por el ennegrecimiento del medio,
contabilizándose como positivo cada tubos de
las diluciones trabajadas que presenten dicha
característica, luego se da paso a la siguiente
etapa.
De cada tubo positivo se coge una asada de
inóculo (asa de 3mm de diámetro ) y se siembra
sobre la auperficie del agar Baird Parker por
Placas con agar Baird estrias y agotamiento. Incubar a 36°C +-1°C x
Parquer plaqueadas 48+-2 horas. Las colonias de Staphylococcus
previamente a la siembra aureus se evidencian como colonias de color
gris a negro, con halo característico
Test de coagulasa
 DETECCION DE SALMONELLA SP
Método: FDA BACTERIOLOGICAL ANALYTICAL MANUAL, c.5, pp. 5.01-5.20, 8th. Ed. 1995. Revision A 1999. SALMONELLA.

METODO PARA TINTES Y COLORANTES

Mezclar bien y dejar reposar por 60 min. a temperatura ambiente.

10g de muestra + 90cm3 de
CALDO TETRATION ATO Adicionar 0,9 ml de una solución de verde brillante al 1%, mezclar
completamente con movomientos circulares, aflojar la tapa aprox. ¼
de vuelta e incubar 24 +-2 horas a 35°C

Sembrar en estrias y agotamiento un asa de 3mm

de cultivo del caldo tetrationato, sobre la superficie
de agar sulfito de bismuto (BS), Agar xilosa lisina
desoxicolato (XLD) y Agar Haktoen entérico.
Preparar las placas de agar hektoen el dia anterior al
Sembrado y almacenarlas en lugar oscuro a
temperatura ambiente hasta su uso . In cubar a 35°C
x 24+-2horas.
En agar hektoen las colonias verde azuladas a azul
Agar Hecktoen Agar XLD Agar Bismuto con o sin centros negros. Muchos cultivos de
entérico Sulfito Salmonella pueden tener grandes centros negros y
Brillantes que parecen como colonias completamente
Negras. Atipicamente se pueden apreciar colonias
amarillas con o sin centros negros.
Colonias sospechosas En XLD, las colonias aparecen rosadas con o sin
centros negros. Muchos cultivos de Salmonella
Pueden tener grandes centros negros y brillantes que
BIOQUIMICA parecen como colonias completamente negras.
Atipicamente se pueden apreciar colonias amarillas
con o sin centros negros.
TSI LIA INDOL UREA DULCITOL MALONATO KCN En agar BS. Las colonias pueden aparecer de color
marron, gris o negro a veces con brillo metálico, se
puede observar el efecto llamado halo. Algunas cepas
SEROLOGIA pueden producir colonias verdes con cierto o ningun
oscurecimiento del medio circundante