Análisis Químico Instrumental

Dr. Noé Costilla Sánchez

 Introducción
Contenido
• Métodos instrumentales:
-Propiedades químicas
-Propiedades físicas
• Elección de un método instrumental
• Medida de la propiedad observable:
-Calibración de un estándar interno
-Calibración de adición estándar
• Validación de un método analítico
 Introducción
• El análisis químico se puede realizar ya sea por
un método clásico o un método instrumental,
los cuales se diferencian generalmente por la
cantidad de analito que contiene una muestra.
• Los métodos instrumentales tienen sus sustento
en las propiedades físicas del analito:
conductividad, potencial de electrodo,
absorción o emisión de la luz, relación
masa/carga, fluorescencia, etc.
• Algunos métodos se detallan en la Tabla 1
Métodos analíticos
 Métodos clásicos
• Separación de los componentes de interés de una
muestra(analitos) mediante:
-Precipitación
-Extracción
-Destilación
• Análisis Cualitativos
• -Los componentes separados se tratan con reactivos dando
origen a productos que se pueden identificar por su color
punto de ebullición o de fusión su solubilidad, su olor, su
actividad óptica o su índice de refracción
• Análisis Cuantitativos
-La cantidad de analito se determina mediante medidas
gravimétricas o volumétricas
 Métodos Instrumentales
• Métodos modernos que separan, identifican, y
cuantifican diferentes especies químicas (orgánicas
inorgánicas, bioquímicas, etc)
• Se basan en fenómenos físicos-químicos conocidos. Su
aplicación ha ido en paralelo al desarrollo de la
electrónica
• Para el análisis cualitativo o cuantitativo se miden las
propiedades de los analitos
Señales analíticas:
• Por ejemplo, absorción o emisión de luz conductividad
o potencial de electrodo Dispersión, Rotación,
refracción difracción
Tabla 1. Propiedades químicas y físicas de los métodos instrumentales
Propiedades características
Emisión de radiación
Absorción de radiación
Dispersión de radiación
Refracción de radiación
Difracción de radiación
Rotación de radiación
Potencial eléctrico
Carga eléctrica
Métodos Instrumentales
Espectroscopía de emisión atómica (rayos X, UV,
Vis, de electrones, de Auger
Espectrofotometría y fotometría (rayos X, UV, IR));
espectroscopía fotoacústica; resonancia magnética
nuclear, y espectroscopía de resonancia de espín
electrónico
Turbidimetría; nefelometría; espectroscopia ramán
Refractrometría; interferometría
Métodos de rayos X y difracción electrónica
Polarimetría; dispersión óptica rotatoria; dicroísmo
circular
Potenciometría; cronopotenciometría
Coulombimetría
 Instrumentos para el análisis
• Un instrumento para el análisis químico debe:
 Convertir las señales químicas o físicas
almacenadas del analito, en información que
pueda ser manipulada e interpretada por el ser
humano
 El instrumento es un dispositivo de
comunicación entre el sistema y el investigador.
 Para obtener información, el analito se estimula
con energía electromagnética, eléctrica, mecánica
o nuclear
 Instrumentos para el análisis

1-) Generador de señales: produce una señal que denota la

presencia y, con frecuencia también, la cantidad de la
especie a analizar. En muchos casos, el generador es
simplemente un compuesto o un ion generado a partir de la
propia especie a analizar, es decir, la creación de un
ambiente sobre la muestra que permite al material en
cuestión producir una señal.
 Instrumentos para el análisis
Ejemplos de los componentes de algunos instrumentos

2-) Detectores: Un transductor es un dispositivo que convierte un

tipo de energía (o señal) en otro. Los transductores que actúan
sobre una señal procedente de la respuesta de un material
frente a una perturbación se denominan detectores. La mayor
parte de los detectores convierten las señales analíticas en un
voltaje o corriente eléctrica que se amplifica o modifica
fácilmente para accionar un dispositivo de lectura.
 Instrumentos para el análisis
4-) Dispositivo de lectura: es un transductor que convierte
una señal procesada en una señal que puede ser entendida
por un observador.
Por lo general, la señal transducida toma la forma de la
posición de una aguja en un medidor de escala, de una
salida de un tubo de rayos catódicos, de un trazo en un
registrador de papel, de una serie de números en una
pantalla digital, o del ennegrecimiento de una placa
fotográfica.
Los instrumentos de caracterización modernos,
generalmente emplean uno o varios dispositivos
electrónicos sofisticados, tales como amplificadores
operacionales, circuitos integrados, convertidores
analógico-digitales y digital-analógicos, contadores,
microprocesadores y ordenadores.
 Evaluación de un método de análisis

Con objeto de que el científico o ingeniero esté preparado

para la elección adecuada de una técnica y un método de
caracterización es necesario que asegure el conocimiento
de los siguientes aspectos:
a) ¿En qué consiste la técnica y el método a emplear?
Es preciso conocer los fundamentos químico-físicos
involucrados en la técnica, así como las funciones de los
componentes instrumentales para poder entender los
distintos métodos de trabajo que se pueden emplear.
b) Ventajas y limitaciones del método
Es necesario conocer las capacidades y limitaciones del
método así como la presentación e interpretación de los
datos.
 Evaluación de un método de análisis
En este apartado se considera el tipo de muestras que se pueden
manejar (estado de agregación, dimensiones, etc), la exactitud y la
precisión en la medida así como los límites de detección (la
sensibilidad).
c) Instrumentación ilustrativa
Es necesario conocer varios sistemas representativos de los
instrumentos actuales y también aspectos básicos del método tales
como: el costo relativo, el entrenamiento requerido para operar con
el instrumento e interpretar los resultados, así como el tiempo
requerido para realizar los análisis o determinaciones.
d) Aplicaciones
Conocer ejemplos específicos de aplicación tanto de la técnica
en general como del método en particular que ilustren la utilidad de
los mismos.
 Selección de un método de análisis
Una vez adquirida la capacidad para evaluar tanto una técnica de
caracterización como un método de análisis ahora se presenta la
necesidad de seleccionar, de todas las técnicas y métodos posibles,
las/os más adecuadas/os para los propósitos del científico o ingeniero.
Esto se puede conseguir siguiendo una serie de pasos sencillos.
1-) Definición del problema
Para poder seleccionar de modo inteligente una técnica y/o método
de análisis, es esencial definir con claridad la naturaleza del problema
analítico. Dicha definición requiere la contestación de las siguientes
cuestiones:
(a) ¿Qué exactitud y precisión se necesitan?: resultados con buena
exactitud y precisión, demanda la utilización no solamente de un
método validado, sino la utilización de materiales de referencia
certificados y replicas entre 3 y 5, y un analista especializado y
capacitado.
 Selección de un método de análisis
(b) ¿De cuánta muestra se dispone?: por ejemplo de cantidades
pequeñas, limita el numero de mediciones o réplicas a realizar, y
demanda la utilización de instrumentos con medición del orden
de ppb o nano
(c) ¿Cuál es intervalo de detección que se precisa?: por ejemplo
si la detección es del orden de 0.01 ppm para cobre, no se debe
utilizar un equipo de absorción atómica sino un ICP donde su
detección esta en el orden de ppb
(d) ¿Qué componentes de la muestra interferirán?: los métodos
de análisis químico reconocidos internacionalmente o métodos
de análisis validados, indican en su procedimiento la eliminación
previa de ciertos elementos o sustancias químicas en una
determinada cantidad, los cuales con seguridad deben ser
disminuidos hasta una cantidad aceptable
 Características de funcionamiento de los
equipos: parámetros de calidad
En la Tabla A, se enumeran los criterios cuantitativos de
funcionamiento de los instrumentos, criterios que pueden
utilizarse para decidir si un determinado método instrumental
es o no adecuado para resolver un problema de
caracterización.
Estas características se expresan en términos numéricos
denominados parámetros de calidad. Para un problema de
caracterización concreto, los parámetros de calidad permiten
al científico o ingeniero reducir la elección de los instrumentos
a tan sólo unos pocos.
La selección entre éstos puede entonces basarse en los
criterios cualitativos de funcionamiento: i) velocidad; ii)
facilidad y comodidad; iii) habilidad del operador; iv) coste y
disponibilidad del equipo y v) coste por muestra.
 Características de funcionamiento de los
equipos: parámetros de calidad
Tabla A

(a) La precisión: de los datos analíticos se define como el grado de

concordancia mutua entre los resultados que se han obtenido de una
misma forma, por tanto, es indicativa del grado de cuidado con que se
ha realizado el análisis. La precisión mide el error aleatorio, o
indeterminado, de un análisis.
 Características de funcionamiento de los
equipos: parámetros de calidad
Los parámetros de calidad de precisión son:

(b) Exactitud: mide el error sistemático o determinado de un

método de análisis. La exactitud se define por la ecuación:
Exactitud = µ - xt (1)
Donde µ es la media de una población de medidas para la
propiedad concreta del material a determinar de una muestra
cuyo valor verdadero en la propiedad es xt.
 Características de funcionamiento de los
equipos: parámetros de calidad
• (c) Sensibilidad: la sensibilidad de un instrumento o de un método se
entiende como la capacidad de discriminar entre pequeñas diferencias, la
propiedad que se mide de un material. Dos factores limitan la sensibilidad:
la pendiente de la curva de calibración y la reproducibilidad o precisión del
sistema de medida. Para dos métodos que tengan igual precisión, el que
tenga mayor pendiente de la curva de calibración será el más sensible. Por
otro lado, si dos métodos tienen curvas de calibración con igual pendiente,
el más sensible será aquél que presente mejor precisión.
• La definición cuantitativa más sencilla de sensibilidad, que es la que acepta
la IUPAC (International Union of Pure Applied Chemists), es la de sensibilidad
de calibración,
S = m·C + Sbl
• En la que S es la señal medida, c es la concentración de la especie a analizar,
Sbl es la señal instrumental para un blanco y m es la pendiente de la recta.
 Características de funcionamiento de los
equipos: parámetros de calidad
• (d) Límite de detección: es el menor valor de ella que puede
detectarse para un nivel de confianza dado. Este límite depende de la
relación entre la magnitud de la señal analítica y el valor de las
fluctuaciones estadísticas de la señal del blanco. Esto es, a menos que
la señal analítica sea mayor que la del blanco en un múltiplo k de las
variaciones del blanco debidas a errores aleatorios, no será posible
detectar con certeza la señal analítica. Por tanto, la mínima señal
analítica distinguible, Sm, se toma como la suma de la señal media del
blanco, Sbl, más un múltiplo k de la desviación estándar del mismo, sbl
Sm = Sbl + k.sbl
Cm = (Sm - Sbl) / m
• donde m es la pendiente de la recta de calibración y Cm es el límite
de detección
 Características de funcionamiento de los
equipos: parámetros de calidad
• (e) Intervalo de linealidad: Este intervalo va desde el valor menor
detectable de la propiedad a medir (límite de cuantificación, LOQ)
hasta el valor para el que la curva de calibrado se desvía de la
linealidad (Límite de linealidad). Como límite inferior de las medidas
se toma, en general, aquél que es igual a diez veces la desviación
estándar del blanco cuando la propiedad a medir es cero (10 x sbl).
• Para que un método de análisis sea aplicable, debería de tener un
intervalo de al menos dos órdenes de magnitud.
• (f) Selectividad o especificidad: La selectividad de un método de análisis
denota el grado de ausencia de interferencias debidas a otras especies
contenidas en la matriz de la muestra. Desafortunadamente, ningún
método de análisis está totalmente inafectado por otras especies y, con
frecuencia, se deben realizar diversas etapas para minimizar los efectos
de estas interferencias.
Intervalo de linealidad
 Características de funcionamiento de los
equipos: parámetros de calidad
• g) Relación Señal/Ruido
• Conforme las fuentes de señales se tornan débiles, el problema de
distinguirlas respecto del ruido se hace cada vez más difícil, lo que ocasiona
una disminución en la exactitud y en la precisión de las mediciones. La
capacidad de un sistema instrumental para discriminar entre señales y ruido
se expresa normalmente como la relación S/N en donde:
Amplitud media de la señal
S/N 
Amplitud media del ruido
• Normalmente se mejoran las relaciones S/N aumentándolas a partir de la
utilización de dispositivos electrónicos (filtros, amplificadores, etc.) o
algoritmos (promediado de conjunto, promediado por grupos,
transformadas de Fourier, etc.), diseñados para reducir la contribución del
ruido o para extraer la señal.
 Las curvas de calibrado
• Las curvas de calibración, son gráficas que se obtienen con
la medición de una serie de soluciones de estándar
diluidas, las cuales serán referenciales para obtener la
concentración de la muestra.
• La curva de calibración con estándar externo: se obtiene
con tres o más soluciones de estándar diluidas de
concentraciones proporcionales que cumplen el rango
lineal.
• La curva de adición de estándar: se obtiene con tres o
mas soluciones que contienen una cantidad definida de
solución muestra, más la solución estándar en cantidad
proporcional menos una solución del conjunto.
 Medida de la cantidad observable:
Las curvas de calibrado
• Las curvas de calibración con patrón interno, se obtiene
también con tres o más soluciones en la que se mezcla
proporcionalmente el patrón estándar con un patrón estándar
interno
• Esta curva de calibración es muy utilizada en los métodos
cromatográficos.
• Los valores de las mediciones para el trazado de la gráfica serán
por ejemplo, las siguientes razones, (Área de pico de
estándar/Área de pico de patrón interno) versus (Concentración
de estándar/Concentración de patrón interno).
• La muestra, con la razón (concentración de muestra /
concentración de patrón interno)
Curva de calibración de estándar externo
Curva de calibración de adición de estándar
Adición de patrón interno
 Validación analítica
• La validación de un método analítico es el proceso
por el cual se establece, mediante estudios de
laboratorio, que las características de desempeño
del método cumplen con los requisitos para las
aplicaciones analíticas previstas.”
• “El objetivo de la validación de un procedimiento
analítico es demostrar que es apto para el propósito
indicado.”
• Características típicas de la validación: linealidad,
especificidad, límite de detección, precisión y
exactitud
 Validación analítica
La validación de procedimientos o métodos analíticos requiere:
• Instrumentos calificados y calibrados: registros que
contienen certificados por institución especializada
• Métodos documentados: presente en el Manual de Calidad
de la Institución y actualizado
• Patrones de referencia confiables: reactivos muy bien
manipulados que tienen una vida útil, escrito en un registro
• Analistas calificados : que han aprobado la ISO 17025, y que
se capacitan anualmente
• Integridad de la muestra: registrada, y almacenada de
acuerdo a su condición física y química
 Parámetro de linealidad
• Un laboratorio de ensayo acreditado, tiene métodos
validados que pueden ser propios o que lo han asimilado
de un método estándar como por ejemplo de la Guía de
“Methods Standard Waters” de los EE.UU.
• En lo que respecta a la linealidad, por ejemplo para
determinar iones nitrito en agua por espectrofotometría
molecular, de Methods Standard ya se conoce, pero el
Laboratorio con ensayos propios, con su técnico,
materiales, reactivos y equipos lo tiene que verificar y
tendrá su propio parámetro de linealidad. En el caso de un
método propio o de adecuación de otro método, la
validación del parámetro de linealidad será similar
 Parámetro de linealidad
• El criterio de aceptación cualitativa que se usa para
determinar la linealidad es el coeficiente de correlación (r).
• El coeficiente de correlación indica el grado de relación
entre la concentración (X) y la respuesta (Y) de la curva de
calibración. Los valores máximos que puede alcanzar son
-1 y +1. El valor máximo de 1 indica una correlación
positiva perfecta. Un valor de r=0, indica que no hay
correlación. En la práctica, si “r” tiene un valor cercano a
uno, significa que tiene una correlación con una
probabilidad elevada. Se recomienda que su valor sea
mayor a 0.999
 Parámetro de linealidad
• La evaluación de la linealidad se realiza con la prueba estadística
t-Student. Se calcula el valor de tcal con (n-2) grados de libertad
para un nivel de confianza (α = 0.05), en dos colas.
• Para probar si no existe correlación significativa,
• Ho : µ = 0 , no hay correlación lineal
• Ha : µ ≠ 0 , si hay correlación lineal
• tcalc < tcrit, se rechaza la hipótesis nula
• tcalc > tcrit, se acepta la hipótesis alterna
• tcalc = r [(n – 2)/(1 – r2)]1/2
• Las expresiones matemáticas a utilizar para evaluar la linealidad
son:
• Sxx = Ʃxi2 - (Ʃxi)2/N ; Syy = Ʃyi2 - (Ʃyi)2/N
• Sxy = Ʃxi.yi - Ʃxi.Ʃyi/N ; m = Sxy / Sxx
 Parámetro de linealidad
• SSresid = Ʃ [yi - (b + mxi)]2
• r2 = 1 - SSresid / SStot
• SSregr = SStot - SSresid
• r2 = SSregr / SStot
• Para la evaluación del parámetro de calidad de Linealidad
del contenido de cafeína en las bebidas gaseosas por
cromatografía de alta resolución, HPLC y curva de
calibración de estándar externo (conociendo que el rango
de concentración entre 0 y 100 ppm es aceptable o lineal)
: se midieron tres grupos de soluciones y se midieron sus
cromatogramas cuyos valores se resumen en la Tabla 2.
 Parámetro de linealidad
Nivel ppm Area-1 Area-2 Area-3 Area-Prom
1 15 46.2 46 45.8 46
2 30 88.9 88.6 88.6 88.7
3 45 135.2 134.7 133.6 134.5
4 60 181.6 182.7 182.6 182.3
5 Area de pico 75 224.6 224.2 224.7 224.5

Curva de calibración para la cafeína

250
f(x) = 3x + 0.02
200
150
100
50
0
10 20 30 40 50 60 70 80

mg Cafeína / L
 Paraá metro de linealidad
ppm Area-Prom x^2 y^2 xy SSresid
15 46 225 2116 690 0.84640
30 88.7 900 7867.69 2661 2.07360
45 134.5 2025 18090.25 6052.5 0.49000
60 182.3 3600 33233.29 10938 4.16160
75 224.5 5625 50400.25 16837.5 0.67240
Sumas 225 676 12375
 111707.48 37179 8.24400
Promedio 45 135.2
Sxx 2250 Syy 20312.28 Sxy 6759 r^2 = 0.9996
m 3.004 b 0.02 r = 0.9998
Area = 0.02 + 3.004 C

Si r es mayor o igual a 0.995, luego, si hay linealidad en la

curva de calibración para determinar cafeína por HPLC
 Sensibilidad
• La sensibilidad de calibración, m, es definida
como, la pendiente de la curva respuesta
-concentración, o el cambio de respuesta por
unidad de concentración. Si la pendiente es
empinada el método tiene alta sensibilidad y si la
pendiente es poco empinada, el método posee
una baja sensibilidad. En el parámetro de calidad
de linealidad, la curva de calibración es, Area =
0.02 + 3.004C. Luego la sensibilidad para el
proceso mencionado de la cafeína es de, 3.004. 
 Exactitud y Precisioá n
• Grado de concordancia entre el resultado de
una medición y el valor de referencia aceptado
o verdadero.
• Nota: El término “exactitud” cuando se aplica
a un conjunto de resultados de mediciones
implica la combinación de los componentes
aleatorios y de un error sistemático común o
de un componente de sesgo (Norma ISO 5725-
1 e ISO 3534-1)
 Exactitud y Precisioá n
• Grado de concordancia entre el resultado de una medición
y el valor de referencia aceptado o verdadero.
• Nota: El término “exactitud” cuando se aplica a un conjunto
de resultados de mediciones implica la combinación de los
componentes aleatorios y de un error sistemático común o
de un componente de sesgo (Norma ISO 5725-1 e ISO
3534-1)
- Precisión: grado de concordancia entre resultados de
mediciones obtenidas independientes bajo condiciones
establecidas (repetibilidad y reproducibilidad). - Veracidad:
grado de concordancia entre el valor medio obtenido a partir
de una serie de resultados y un valor de referencia aceptado.
Exactitud = Precisión + Veracidad
 Exactitud y Precisioá n
• PRECISIÓN: Grado de concordancia entre
resultados de mediciones obtenidas de una
serie repetida de análisis, sobre una muestra
homogénea, bajo condiciones establecidas
(Norma ISO 3534).
• REPETIBILIDAD: Es la medida de la precisión
de un método efectuado en las mismas
condiciones, sobre el mismo analito, con el
mismo método, con el mismo operador,
utilizando el mismo instrumento de medida y
durante un corto intervalo de tiempo.
Análisis estadístico de la precisión
• Media Desviación estándar
• Coeficiente de variación
• Análisis de varianza F (comparación
de la desviación estándar)
Estudio homogeneidad muestra:
(a) Análisis de varianza (F)
(b) Prueba de “t”de Student.
 Análisis estadístico de la
precisión
Determinación de plomo en mineral por absorción atómica:
% de plomo
Muestras Muestra Contramuestra
1 18,54 18,35
2 18,33 18,43
3 18,57 18,48
4 18,32 18,52
5 18,45 18,37
6 18,44 18,42
Promedio 18,445 18,395
s 0,1034 0,0643
CV, % 0,5607 0,3496
s, combinado 0,0861
t, experimental 1,0056
t, crítico (5, α = 0.025) = 2,571, indica que no hay diferencia
significativa, y las muestras son iguales y homogéneas
 Reproducibilidad
• Es la medida de la precisión de los resultados de un método analítico
efectuado sobre el mismo analito, pero en condiciones diferentes
(diferentes equipos utilizados, el operador, el período de tiempo, etc.)
• Ejemplo: la determinación de Pb por un analistas en tres días. Los
resultados:

% de plomo
Muestras Dìa 1 Día 2 Día 3
1 18,54 18,55 18,44
2 18,33 18,43 18,33
3 18,57 18,42 18,53
4 18,32 18,5 18,38
5 18,45 18,38 18,45
6 18,44 18,44 18,4
 Reproducibilidad
RESUMEN
Grupos Cuenta Suma Promedio Varianza
Día 1 6 110,65 18,4417 0,0107
Día 2 6 110,72 18,4533 0,0037
Día 3 6 110,53 18,4217 0,0047
ANÁLISIS DE VARIANZA
Variaciones S. de Q G.L. Prom. Q F Prob. F. crítico
Entre grupos 0,0031 2 0,0015 0,2412 0,7887 3,6823
Dentro de los
grupos 0,0957 15 0,0064
Total 0,0988 17

La hipótesis nula : los promedios de las mediciones son iguales

La hipótesis alterna: al menos dos de los promedios son diferentes
Si F es menor que p: No hay diferencias
Si F = 0,2412 es menor p = 0,7887 estadísticamente no hay diferencia
en las mediciones de los grupos
 Veracidad
• VERACIDAD: Grado de Muestra % Pb
concordancia entre el valor 1 18,54
medio obtenido de una serie 2 18,76
de resultados y el valor de 3 18,7
referencia aceptado 4 18,58
(certificado)(MRC). Norma 5 18,36
ISO 3534 6 18,44
• Análisis estadístico (a)Media 7 18,66
experimental (b)Desviación 8 18,57
estándar experimental 9 18,45
Prueba de “t” de Student 10 18,39
• Análisis de mineral de plomo Promedio 18,545
por absorción atómica: n = s 0,1348
10 Media de MRC 18,5
 Veracidad

x  
t n 1,  / 2  n
s
t 9; 0.025 crítico = 2,262
t 9; 0.025 = (18,545 - 18,50)(10)0,5/0,1348 = 1,0553

Luego t,calculado es menor que t,crítico, por lo tanto se

acepta la hipótesis nula: “Existe trazabilidad” ò hay
veracidad en la determinación.
 Líámite de deteccioá n (LD)

• Menor concentración o cantidad de analito

detectable con razonable certeza por un
procedimiento analítico dado. Concentración que
proporciona una señal en el instrumento
significativamente diferente de una muestra blanco.
LD = (ybl + 3*sbl)/b
ybl = señal promedio de soluciones blanco.
Sbl = desviación estándar de los blancos
b = pendiente obtenida en la curva de calibración
normal del analito.
 Líámite de deteccioá n (LD)
• En la determinación de plomo en un mineral la
curva de calibración obtenida es de,
Absorbancia = 0,320 + 1.12 CPb
Donde la concentración esta en ppm.
• Análisis de soluciones blanco de muestras (24)
dan una absorbancia promedio de 0.0285 y
una desviación estándar de 0.0075, ¿cuál es el
límite de detección de la medición de plomo?
LD = (0.0285 + 3*0.0075)/1.12 = 0.0455 ppm
 Líámite de Cuantificacioá n (LC)
• Es la menor concentración de analito que
puede determinarse con precisión y exactitud
razonables en las condiciones establecidas y se
expresa en unidades de concentración.
LC = (ybl + 10*sbl)/b
La expresión matemática es similar al de LD,
con la diferencia de que el factor es de 10, luego
el LC para la medición del plomo mencionado en
la determinación de LD es,
LC = (0.0285 + 10*0.0075)/1.12 = 0.0924 ppm
 Robustez
• La robustez es la medida de la capacidad de un procedimiento analítico
para no ser afectado por variaciones pequeñas pero deliberadas en los
parámetros del método y que provee una indicación de su fiabilidad
durante su uso habitual.
• La robustez de un método analítico permite identificar aquellas
variables intrínsecas del método de preparación de la muestra, que
puedan provocar cambios significativos y que debieran ser controladas
más estrictamente.
• Algunos ejemplos de factores que pueden ser evaluados en la robustez
son: pH, longitud de onda, diferentes analistas, tiempos y volúmenes de
proceso, diferentes marcas de reactivos, diferentes tipos de materiales
volumétricos, de filtración, número de lavados, entre otros.
• La evaluación de robustez se realiza mediante el método de Youden-
Steiner, el cual se basa en un diseño de experimentos para 7 factores
con 8 combinaciones para su medición, el cual se muestra en la Tabla X.
 Robustez
COMBINACIONES
Factores 1 2 3 4 5 6 7 8
A/a A A A A a a a a
B/b B B b b B B b b
C/c C c C c C c C c
D/d D D d d d d D D
E/e E e E e e E e E
F/f F f f F F f f F
G/g G g g G g G G g
Resultados s t u v w x y z

A = ¼ (s + t + u + v) a = ¼ (w + x + y + z)
B = ¼ (s + t + w + x) b = ¼ (u + v + y + z)
C = ¼ (s + u + w + y) c = ¼ (t + v + x + z)
D = ¼ (s + t + y + z) d = ¼ (u + v + w + x)
E = ¼ (s + u + x + z) e = ¼ (t + v + w + y)
F = ¼ (s + v + w + z) f = ¼ (t + u + x + y)
G = ¼ (s + v + x + y) g = ¼ (t + u + w + z)
 Robustez
• En el ejemplo de validación de robustez corresponde
a la medición de Hg en el agua del río Moche, por
absorción atómica y generación de hidruros. Los
factores de variación considerados son:
-Longitud de onda de la medida, nm: A = 273,6
a = 273,9
-Caudal de N2 al vaso reactor, mL/min: B = 4,2;
b = 4,0
-Analistas: C = 1 y c = 2
-Tiempo de reacción, s : D = 5 ; d = 6
 Robustez
 
Prueba de Youden – Steiner

Parámetros Condiciones de ensayo

1 2 3 4 5 6 7 8
λ, nm   273,6 273,6 273,6 273,6 273,9,5 273,9,5 273,9,5 273,95
Caudal de N2,
4,2 4,2 4 4 4,2 4,2 4 4
mL/min
Analista   1 2 1 2 1 2 1 2
Tiempo de 5
reacción
5 5 6 6 6 6 5

resultados 106,3
 
110 111,8 98,9 109,7 108,8 107,6 99,6
  s t u v w X y Z
 Robustez
Parámetros Valores Diferencia

λ, longitud de onda, nm A = 107,6 a = 105,575 2,025

Caudal de N2, mL/min B = 109,55 b = 103,625 5,925

Analista C = 104,325
2 c = 108,85 -4,525

Tiempo de reacción D = 106,925 d = 106,25 0,675

Desviación estándar de las diferencias 4,1394
Desviación estándar de los resultados 4,187

Si sde diferencias ≤ que 2s de los resultados la medición es robusta

Luego 4,1394 es menor 2 x4.187 = 5,9213