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Unidad 3
Horas 9,10 y 11
Cadena Respiratoria
(Cadena de Transporte de Electrones)
y
Fosforilación Oxidativa
OBJETIVO
CONTENIDO
ESPECÍFICO 6
CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES
LA MITOCONDRIA
Partes que la constituyen
Membrana externa (MME):
La MME es muy permeable, a la mayor parte de las moléculas pequeñas
e iones, debido a que contiene muchas copias de una proteína
transportadora llamada Porina, que forma poros que permiten la libre
difusión de moléculas hasta de 10kDa . Estas moléculas entran al EIM,
pero la mayoría no atraviesa la impermeable MMI. Otras proteínas
ubicadas en esta MME incluyen enzimas implicadas en el metabolismo de
los lípidos.
EIM: Es el espacio entre la MME y la MMI. El EIM es químicamente
equivalente al del citosol.
Matriz: este gran espacio interno contiene una mezcla altamente
concentrada de cientos de enzimas, incluyendo aquellas requeridas
para la oxidación del piruvato y los ácidos grasos y las del ciclo del
acido cítrico. La matriz también contiene ADN mitocondrial, ribosomas
mitocondriales ARNt, y varios enzimas requeridas para la expresión de
los genes mitocondriales.
Membrana Mitocondrial interna (MMI)
La 3 etapas de la
Respiración celular
2
3
Descarboxilación
Oxidativa del
Piruvato
Ciclo
del
Acido Cítrico
Entrada de electrones desde la glicolisis, oxidación del
piruvato, y CAC, a la Cadena respiratoria.
Cadena Respiratoria mitocondrial
IV III I
CTE
fuera
entra
fuera
CAC
Acetil-CoA
Por tanto los electrones pasan a través de los 4 complejos desde los
potenciales de reducción estándar mas bajos hacia los mas altos.
de la
Cadena Respiratoria
MME
Espacio
intermembrana Cit c
e¯
e¯
e¯ I III IV
MMI Q
e¯ II
NADH NAD+
FADH2 FAD
H2O
½ O2+ 2H+
Matriz
mitocondrial
MAOS
(I) Flavoproteínas (fp)
En la CR hay 2 flavoproteínas, estas contienen FMN o
FAD fuertemente unidos, las cuales no se disocian de la
enzima durante su oxidación y reducción, por lo que se
comportan como grupos prostéticos. Estas son:
Proteína
Proteína
Fe2S2 Fe4S4
Los Centros hierro-azufre, son grupos prostéticos no
hemo, consistiendo de átomos de Fe unidos a S inorgánico y
a 4 átomos de S de los residuos cisteína de la proteína.
Éstos centros Fe-S aceptan y liberan electrones, uno a la
vez.
(III) Coenzima Q
también nombrada como, Ubiquinona, y abreviada: Q , CoQ10
(Unidad de Isopreno
de 5 Carbonos)
e (1)
Semiquinona (CoQ-)
(radical libre O .
CH3
-CH2-CH=C-CH2 -
2H+ + e (2)
(Unidad de Isopreno)
OH
1
Dihidroquinona (CoQH2) 4
(forma totalmente reducida)
OH
(IV) Los Citocromos
Un citocromo es una proteína transportadora de
electrones que contienen un grupo prostético hemo,
con un átomo de hierro.
El átomo de hierro del hemo sufre una oxidorreducción
reversible: Reducción
+ 1e
Fe+3 Fe+2
Hierro oxidado - 1e Hierro reducido
(férrico) Oxidación (ferroso)
Fe
Hierro (Fe)
Hemo tipo a
Fe
Se encuentra en citocromos
a y a3 de la
Citocromo c oxidasa
Fe
Hemo tipo c
Se encuentra en citocromos c y c1
La Fijación de un grupo hemo al citocromo (proteína) es covalente
A excepción de la CoQ y el Citocromo c
el resto de los
transportadores electrónicos
se asocian en forma de grandes
Complejos enzimáticos
Complejos enzimáticos de la CR
No total
Complejo Enzimático Grupos prostéticos de
Subunidades
1. FMN
( Complejo I)
2. Centros Fe-S 43
NADH deshidrogenasa
o NADH-CoQ oxidorreductasa
( Complejo II ) 1. FAD 4
Succinato deshidrogenasa 2. Centros Fe-S
( Complejo III) 1. Hemo b
Ubiquinona- Citocromo c 3. Hemo c1 11
oxidorreductasa. 4. Centros Fe-S
NADH
DESHIDROGENASA
I
SUCCINATO
DESHIDROGENASA II
Q
O2
Organización básica y secuencia que siguen los
electrones en la Cadena Respiratoria
FADH2 (fp)
e-
e- e- e- e- e- e-
FMN (fp) Q cit b cit c1 cit c cit aa3 O2
CI CIV
CIII
e-
e- significa electrones
NADH fp = flavoproteína
I
MMI FMN
FeS QH2 MMI
2e¯
Q
2e¯
2H+ Matriz
NADH
FMN
FeS I QH2
MMI
2e¯
2e¯ Q
FeS
2e¯
II Matriz
FAD
2H+
NADH
Succinato
H+ + NAD+
Reacción redox neta catalizada por
el Complejo II, Succinato deshidrogenasa:
Matriz
La Succinato Deshidrogenasa, la Glicerol-3P Deshidrogenasa, y la
EFT-Q Oxidorreductasa, todas estas transfieren , electrones a la
Coenzima Q, pero no abarcan la membrana y no tienen un
mecanismo de bombeo de protones.
Reacción catalizada por
el Complejo III, Ubiquinona-Cit c-oxidorreductasa:
1. QH2 dona 2 e- al Complejo III. Dentro de este complejo los
electrones se transfieren a una proteína FeS , de aquí a 2
Citocromos tipo b, y luego son transferidos al Citocromo
c1.
2e¯
FMN FeS I QH2
2e¯
FeS Cit b
2e¯
MMI
2e¯ Q Cit c1
2e¯
FeS
III
2e¯
2H+ FAD
NADH II
Matriz
H+ + NAD+ Succinato
Reacción redox neta catalizada por el
Complejo III, Ubiquinona-Cit c-oxidorreductasa:
4. También utiliza la energía de esta reacción redox para bombear 1H+ por
cada electrón que pasa.
5. La transferencia de cada electrón debe ocurrir sin la liberación de
especies reactivas dañinas para la célula.
MME
Espacio 2H+
intermembrana Cit c 2e¯
2H+
2e¯
½ O2+ 2H+
Reacción redox neta catalizada por
H2O
el Complejo IV, Citocromo oxidasa:
“ 2 protones son tomados de la matriz y 2 electrones que son cedidos por el Cit a3,
se unen a un átomo de oxigeno para reducirlo hasta agua”.
+ 0,6 Complejo IV
E’o = 0,580 V
G´o = - 112 kJ/mol
2e-
+ 0,8 ½ O2 + 2H+ H2O
MAOS-
Fuente de los datos
Texto bioquímica de Voet
(+ 0,816 V)
El flujo de electrones desde el NADH al O2 es un proceso
exergónico que libera la cantidad de 220 kJ/mol (52 Kcal/mol)
G’o = - n F E’o
G’o = - 2 (96,5 kJ / V. mol) (1,14 V)
G’o = - 220 kJ/mol (de NADH)
G’o = - n F E’o
G’o = - 2 (96,5 kJ/V. mol) ( 0,847 V)
G’o = - 150 kJ/mol
Complejo I ADP+Pi
- 0,2 E’o = 0,360 V
G´o = - 69,5 kJ/mol ATP
(+0,031V)
Succinato FADH2 Complejo Q (+0,045 V)
0
II
Cianuro (CN-)
N-3 : Azida
H2S
INHIBIDORES DEL FLUJO DE ELECTRONES HASTA EL OXÍGENO
Inhibidores: Inhibidores:
Rotenona Inhibidor: Cianuro
Amital Antimicina A Azida
Amobarbital Monóxido de carbono
CI Q CIII c CIV
CII ½ O2 + 2H+
MME H2O
ADP + Pi
ATP
Espacio intermembrana
MMI citosol
Formación de especies reactivas de
oxígeno (radicales libres) durante la
reacción del complejo enzimático
Citocromo oxidasa
MME
Espacio intermembrana
4 H+ 4 H+ 2 H+
e¯ Cit c
e¯
e¯ I III IV
MMI Q
2e¯
NAD+ Matriz
NADH
Aunque la citocromo c oxidasa y otras proteínas que reducen el O2 son un éxito notable en
no liberar intermedios, se forman inevitablemente pequeñas cantidades de anión
superóxido y peróxido de hidrógeno.
Superóxido, peróxido de hidrógeno, y las especies que se pueden generar a partir de ellos,
tales como OH · se denominan colectivamente como especies de oxígeno reactivas o ROS.
¿Cuáles son las estrategias de defensa celular contra el daño oxidativo por ROS?
El principal de ellos es la enzima superóxido dismutasa. Esta enzima elimina los radicales
superóxido por catalizar la conversión de dos de estos radicales en peróxido de hidrógeno
y oxígeno molecular.
El principal productor de radicales de oxígeno en los organismos aerobios es la mitocondria
utiliza aproximadamente el 98% del O2 que ingresa en la célula reduciéndolo a agua a nivel
del citocromo a3 de la cadena de transporte de electrones
una pequeña parte del O2 incorporado por la mitocondria, sufre una reducción monovalente y
genera especies reactivas de oxígeno, tales como el radical superóxido (O2 ), el peróxido de
hidrógeno (H2O2), y radical hidroxilo (•OH)
Por tanto, al ser las mitocondrias la fuente más importante de especies reactivas de
oxígeno, es obvio que el DNA mitocondrial se encuentra más expuesto que el DNA
nuclear a sufrir lesiones oxidativas severas que pueden conducir a mutaciones y
supresiones en su propia cadena
El oxígeno molecular (O2) es un birradical que tras la adición secuencial
de 4 electrones y 4 protones en la cadena de transporte electrónico
mitocondrial, genera agua (H2O).
En este proceso, en el que se produce gran cantidad de energía (ATP),
pueden también generarse, como subproductos, moléculas parcialmente
reducidas con 1, 2 y 3 electrones. Estas son, el radical superóxido, el
peróxido de hidrógeno y el radical hidroxilo, respectivamente.
Estos tres , se denominan especies reactivas de oxígeno y causan
lesiones oxidativas a las macromoléculas celulares (lípidos, proteínas y
DNA).
DNA mitocondrial codifica para:
Complejo Enzimático No. total No. de Subunidades
de Subunidades Codificadas por el ADN
mitocondrial
( Complejo I) 43 7
NADH deshidrogenasa
o NADH-CoQ oxidorreductasa
( Complejo II ) 4 0
Succinato deshidrogenasa
o Succinato-CoQ
oxidorreductasa
( Complejo III) 11 1
Ubiquinona-citocromo c
oxidorreductasa.
Citocromo c 13 3
( Complejo IV)
Citocromo oxidasa 8 2
Nota: las laminas desde el 54 al 59 no serán evaluados en el examen parcial de
esta unidad 3
Fosforilación
Oxidativa
Es el proceso por el cual el NADH y FADH2
producidos por la oxidación de nutrientes SE OXIDAN
y simultáneamente ocurre la SÍNTESIS de ATP .
Ecuación básica de la Fosforilación oxidativa
ATP sintasa
ADP + Pi ATP + H2O
G’o = + 30,5 kJ/mol
Espacio intermembrana
4H+ 4H+ 2H+
Cit c
+ + + + + + + + + + + + + + + + + + + +
e¯
MMI
e¯ I Q III IV
2e¯
NAD+
NADH
MATRIZ ½ O2 + 2H+ H2O
+++++++++++++++++++++++++++
MMI
OH- OH- OH- - -
OH- OH OH OH- Matriz
OH-
H+ H+
H+ H+ H+
potencial de membrana=
La Matriz Mas alcalina
diferencia de carga eléctrica a
( el pH es 0,75 unidades mayor que el EIM)
través de una membrana
Para que se pueda mantener este gradiente
electroquímico a través de la membrana interna , se
deben dar las siguientes condiciones.
MEMBRANA INTERNA
ESPACIO INTERMEMBRANA
DIAGRAMA QUE REPRESENTA LA CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES
Y LA FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
MME
ESPACIO
INTERMEMBRANA
MMI
MATRIZ
ATP
SINTASA
2. Transportador de Fosfato
Translocasas de la membrana mitocondrial interna(MMI)
que transportan ADP , ATP , y Fosfato inorgánico
Espacio
intermembrana
Matriz
ATP ATP
ANT
ADP ADP
Gradiente de ATP
concentración
de protones
H+ sintasa H+
H2PO-4 H2PO-4
H+ FT H+
Texto de Bioquímica
Autor. Voet-Voet 3ra. Edición. cap 22.pag.835
Si solo se utiliza aproximadamente el 42 % de la energía
de la oxidación del NADH o FADH2 para La síntesis de
ATP, ¿Qué sucede con el resto de la energía?
Parte de esta energía se pierde en forma de calor.
Por consiguiente la cadena respiratoria es nuestra principal
fuente de calor
Nota:
Si la eficiencia en el proceso de síntesis de ATP
acoplada con la oxidación de NADH , fuera de 100%
, seria en teoría posible sintetizar 7,51 moles de ATP
por cada mol de NADH oxidado a NAD+ , bajo
condiciones estándares.
LA ENERGÍA SE GASTA EN :
2) La Síntesis de ATP.
Mecanismo de acción:
Los desacopladores tienen como efecto desconectar la
fosforilación oxidativa de la transferencia de electrones.
Por tanto puede funcionar la cadena respiratoria sin tener lugar la
síntesis de ATP , en esta situación la energía que normalmente se hubiera
conservado en la formación del ATP, se pierde ahora en forma de calor.
FOFORILACIÓN DE ADP
Efectos fisiológicos de los desacopladores :
Termogénesis adaptativa
Condiciones en las que ocurre:
En respuesta al frio
En periodos de Hibernación
Ingestión de alimentos
Lugar : exclusivamente en tejido adiposo marrón
Generación de calor (termogénesis) en el Tejido adiposo
marrón. Las Mitocondrias desacopladas del tejido adiposo marrón
producen calor, bajo control hormonal,
Para mantener la temperatura corporal
calor
en los : calor
M M
M B)
A)
UCP1
A) El citosol del adipocito marrón es caracterizado por numerosas mitocondrias y
gotitas de grasa. B) Ampliación de una mitocondria de un adipocito marrón, se
muestran Crestas en paralelo y la UCP1 (puntos negros).
http://journal.frontiersin.org/Journal
Mecanismo de termogénesis
Mitocondria desacoplada en el tejido adiposo marrón
1
Noradrenalina FRIO Adipocito
TAG
marrón
2
+ Ácidos Grasos Libres
(AGL) 3
CALOR
H+ UCP1
H+
H+
Desacoplamiento
+ (canal de protones)
Acoplamiento ADP+Pi 5
(Fosforilación Oxidativa)
Disminuye ATP FADH2 AGL
NADH -Oxidación
Esta vía H+ 4
matriz
CTE
H+
H+
H+ MMI
H+
FIN DE LA UNIDAD 3
CO2 (g)
O2 (g)
H2 O
Respiración celular
aeróbica
Combustibles Energía
(azúcares, grasas, proteínas) celular