Indicadores de contaminación

microbiológica: Determinación
de bacterias coliformes totales y
fecales
Estefany García 1065602
Karla Hidalgo 1065309
Anthony Núñez 1065103
 Objetivos
• Conocer sobre los microorganismos indicadores de contaminación.

• Ejecutar y conocer los métodos para determinar los microorganismos

indicadores de contaminación (coliformes fecales y coliformes torales)

Anthony Núñez 1065103

 Razón de estudio
• Crecimiento de la población mundial.
• Vertido de agua de origen doméstico e industrial a cuerpos de agua.
• Altos porcentajes de materia orgánica y microorganismos fecales.
• Control de calidad microbiológica.
• Presencia de microorganismos patógenos.

Fuente: http://es.nextews.com/47e21919/ Fuente: http://es.nextews.com/47e21919/

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 Indicador de contaminación microbiológica
Un indicador microbiológico es un microorganismo cuya presencia permite
determinar la existencia de un patógeno. Entre sus cualidades están:
• Ser aplicable a todo tipo de agua.
• Estar ausentes en agua no contaminada y presentes en aguas
contaminadas.
• Tener mayor duración bajo condiciones ambientales desfavorables.
• Hallarse de forma constante en las heces y estar asociados a aguas de
alcantarillado y residuales.
• Ser resistentes a la inhibición de su crecimiento por otras especies.
Bacterias entéricas
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Coliformes totales
Son indicadores comunes del tracto gastrointestinal. Pertenecen a la
familia Enterobacteriacea, son bacilos Gram negativos, anaerobios
facultativos, no esporulados, fermentadores de lactosa a 35 °C con
producción de gas y ácido láctico de 24 a 48 h de incubación. Entre los
organismos que conforman este tipo esta:
• Enterobacter
• Klebsiella
• Serratia
• Edwarsiella
• Citrobacter

Fuente: http://es.nextews.com/47e21919/

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 Coliformes Fecales
Son indicadores pertenecientes al grupo de los coliformes totales y se
denominan también coliformes termo-tolerantes. Su origen es
esencialmente fecal, tienen la capacidad de fermentar la lactosa, con
producción de ácido y gas a (44,0 ± 0,2) ºC en 24 h de incubación.
Comprenden un grupo muy reducido de microorganismos ya que son
de origen fecal. Entre estos se encuentran el Escherichia coli y
Citrobacter.

Fuente: http://es.nextews.com/47e21919/
Estefany García 1065602
 Importancia de determinar indicadores
microbiológicos del agua
• Evaluación de la calidad del agua para
definir su uso.
• Evaluación de la eficiencia de plantas de
tratamiento.
• Determinación del efecto de agentes
tóxicos y orgánicos en la flora bacteriana.
• Identificación de fuentes de contaminación.
• Diagnósticos relativamente rápidos de
Fuentes:
http://www.compassassuran
calidad bacteriológica del agua. ce.com.au/home/shutterstoc
k_250375231/
• Para determinar la calidad de los alimentos. http://biay.us/como-quitar-
hongos-de-la-pared.html

Estefany García 1065602

Métodos de análisis de indicadores

Fuente: http://es.nextews.com/47e21919/

Tubos múltiples Filtración membrana

Estefany García 1065602

 Tubos múltiples
Consiste en la utilización de 5 tubos de fermentación (tubos de Durham) con
volúmenes de 10ml ubicados en una gradilla que permite colocarlos como muestra
y como herramienta de secado, usados para determinar la presencia de coliformes
fecales.
En esta técnica se una el Número Más Probable

Tubo/positivos NMP/100 ml
0 <1.1
1 1.1
2 2.6
3 4.6
4 8
5 >8
Fuente: Standard Methods for the examination of water and waste water, 2005
Estefany García 1065602
 Procedimiento
1. Retirar la envoltura de papel del frasco con la
muestra.
2. Homogeneizar la muestra.
3. Con una pipeta estéril, sembrar 10 mililitros de
muestra en cada uno de los tubos.
4. Agregar el medio de cultivo A1 Medium a cada
muestra y agitar la gradilla con los tubos
inoculados.
5. Colocar la gradilla en la incubadora a 44 ± 0,5 °C
durante 24 ± 3 horas.
6. Retirar los tubos de la incubadora para efectuar la Fuente:
https://www.condalab.com/pdf/1252.pdf
primera lectura de los resultados e identificar los
tubos con resultado positivo.

Karla Hidalgo 1065309

 Filtración membrana
El número de coliformes totales presentes en el agua
se determina mediante la filtración de volúmenes
específicos de la muestra a través de los filtros de
membrana. Este método presenta una gran ventaja
respecto a los demás por la prontitud en que arroja los
resultados.

Karla Hidalgo 1065309

Volumen de agua a analizar en filtración membrana

Fuente: http://coli.usal.es/Web/demo_fundacua/demo2/FiltraMembColiT_auto.html
Karla Hidalgo 1065309
Uso del equipo
1. Ensamblar el equipo.
2. Encima del tapón colocar el soporte del
filtro.
3. Colocar la membrana de filtración sobre
el soporte de acero.
4. Situar el embudo de filtración sobre el
soporte.
5. Verter 30-100 ml de muestra en el
embudo. Fuente: Ingeniería Sanitaria I.
Prácticas del laboratorio

Karla Hidalgo 1065309

Uso del equipo
8. Extraer del embudo con la pinza esterilizada la membrana de
filtración.
9. Colocar la membrana sobre la placa con la almohadilla absorbente.
10. Colocar la tapa de la placa de Petri, invertir la placa e incubar a
37ºC durante 24 horas.

Los resultados se expresan en UFC/100ml.

Fuente:
https://bagginis.blogspot.com/2014/07/guia-
practica-del-laboratorio_8.html

Karla Hidalgo 1065309

Referencias
• Alcántara, A. (2013). Indicadores de contaminación microbiológica: determinación de bacterias coliformes totales y fecales.
En Ingeniería Sanitaria I (21-29). Santo Domingo, República Dominicana: Editora Buho, S. R. L.
• Anónimo. (2015). Recuento de Coliformes Totales: Filtración a través de membrana. Mayo 29, 2018, de Departamento de
Microbiología y Genética. Universidad de Salamanca. Sitio web:
http://coli.usal.es/Web/demo_fundacua/demo2/FiltraMembColiT_auto.html
• Arcos, M., Ávila, S., Estupiñán, S. & Gómez, A. (Diciembre, 2005). Indicadores microbiológicos de contaminación de las
fuentes de agua. NOVA, Vol. 3, 69-79.
• Carlos, G. & Sandoval, A. (1991). Adiestramiento para la prevención y control de las enfermedades gastrointestinales en el
sector agua. Mayo 29, 2018, de Instituto mexicano de tecnología del agua Sitio web:
https://www.ircwash.org/sites/default/files/245.11-91AD-9090.pdf
• Carrillo, E. & Lozano, A. (2008). Validación del método de detección de coliformes totales y fecales en agua potable. Mayo
29, 2018, de Pontifica Universidad Javeriana Sitio web: http://javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis203.pdf
• Controlab. (2016). Análisis Microbiológico Coliformes Totales. Mayo 29, 2018, de Calidad Microbiológica. Sitio web:
http://www.calidadmicrobiologica.com.co/microbiologia/coliformes-totales
• Ministerio de medio ambiente y recursos naturales. (2018). Norma ambiental de calidad de aguas superficiales y costeras.
Mayo, 29, 2018, de Ministerio de medio ambiente y recursos naturales Sitio web: http://ambiente.gob.do/files/Norma-
Ambiental-de-Calidad-de-Aguas-Superficiales-y-Zonas-Costeras.pdf
• Ríos, S., Agudel, R. & Gutiérrez, L. (2017). Patógenos e indicadores microbiológicos de calidad del agua para consumo
humano. Facultad Nacional de Salud Pública, 35, 236-247.
• Robert, M. (2015). Microorganismos indicadores de la calidad del agua potable en Cuba. Revista CENIC Ciencias Biológicas,
Vol. 45, 25-36.