Nutrición

microbiana
 Nutrientes
1- Fuente de energía luz
química
2- Macronutrientes
H K
O Mg
C Na
N 95% Ca
S Fe
P
3- Micronutrientes (elementos traza)
Co, Zn, Mo, Cu, Mn, Ni, Se, W
4- Factores de crecimiento
•Vitaminas
•Purinas y pirimidinas
•Aminoácidos
 Macronutrientes

Fuente de - CO2
carbono - Compuestos Carbohidratos, azúcares,
orgánicos proteínas, aminoácidos,
lípidos, ácidos grasos,
glicerol
Fuente de - Inorgánica NH4, NO3-, N2
nitrógeno - Orgánica Proteínas, peptonas, aa,
bases púricas y
pirimídicas, urea
Fuente de - Inorgánica Fosfatos
fósforo - Orgánica Esteres del ácido
fosfórico
Fuente de - Inorgánica Sulfuros y sulfatos
azufre - Orgánica Aminoácidos sulfurados,
vitaminas
 Los ingredientes clave de la vida
• Fuentes de energía
– fotótrofos - utilizan luz
– quimiótrofos
utilizan compuestos orgánicos: organótrofos
inorgánicos: litótrofos
• Fuentes de carbono
– autótrofos - CO2
– heterótrofos - compuestos orgánicos
• Algunas combinaciones son muy comunes
Tipos nutricionales Fuente de Fuente de Ejemplos
energía C
Cianobacterias,
Fotoautótrofos Luz CO2 bacterias
púrpuras y
verdes
Compuestos Algunas
Fotoheterótrofos Luz orgánicos bacterias
púrpuras y
verdes
Compuestos Algunas
Quimioautótrofos o inorgánicos CO2 Eubacterias y
litótrofos ej.: H2, NH3, muchas Archaea
NO2-, H2S
La mayoría
Quimioheterótrofos Compuestos Compuestos Eubacterias,
o heterótrofos orgánicos orgánicos algunas Archaea
Medios y condiciones de
cultivo
 Condiciones para el crecimiento microbiano

agua
Medios de cultivo
fuente de energía
Nutrientes fuentes de C, N, otros
Crecimiento elementos
micronutrientes,
factores de crecimiento
temperatura
pH
Condiciones
luz
de cultivo
aireación
actividad de agua
potencial redox
 Nutriente
Sustancia que permite el crecimiento microbiano

Características
i) atravesar las barreras celulares
ii) ser utilizada por enzimas celulares
iii) proveer energía y/o sub-unidades de las macromoléculas
 Factores de crecimiento

Microorganismos auto o heterotrófos pueden requerir

pequeñas cantidades de ciertos compuestos orgánicos que
no pueden sintetizar y deben incorporarse en los medios

* bases púricas y pirimídicas ADN, ARN

* aminoácidos esenciales síntesis proteica
* vitaminas coenzimas
 Capacidades metabólicas
• Algunas bacterias son excepcionalmente autosuficientes:
protótrofo
– sintetizan vitaminas, amino ácidos, nucleótidos, lípidos
– crecen en un medio mínimo compuesto de sales inorgánicas
(MgSO4, NH4Cl, K2HPO4 , FeCl3, CaCl2) con fuente de
carbono orgánica
• Algunos microorganismos requieren factores de
crecimiento: auxótrofo
• Algunos son muy exigentes
Clasificación de los medios de cultivo

Según su naturaleza física

* líquidos
* sólidos - solidificante: agar-agar, silico-gel
* semi-sólidos

Según su composición
* definidos o sintéticos: composición química conocida
* no definidos o complejos: composición química no
definida, enriquecidos con peptonas, extracto de
carne, de levadura, de suelo, sangre
 Según su uso en el laboratorio

* selectivos o inhibitorios: medios que contienen, además de los

nutrientes, ciertas sustancias que inhiben el desarrollo de algunos
microorganismos permitiendo el crecimiento de otros o cuya
composición permite el desarrollo de un grupo determinado
Ej.agar-antibióticos; agua, sales, luz, para algas, medios con NaCl
superior a la concentración fisiológica

* diferenciales: medios que contienen indicadores para diferenciar

los distintos tipos de microorganismos que puedan crecer en él.
Ej. azúcar fermentecible: lactosa, indicador:rojo neutro
Siembra y aislamiento
 Siembra

•Sembrar o inocular es introducir artificialmente una

porción de muestra (inóculo) en un medio adecuado, con
el fin de iniciar un cultivo microbiano.
•Luego de sembrado, el medio de cultivo se incuba a una
temperatura adecuada para el crecimiento.
•La siembra puede realizarse en medio líquido, sólido o
semisólido, utilizando punta, ansa, hisopo o pipeta
estéril.
•Tiene por objeto: propagar un microorganismo,
estudiar su metabolismo o aislarlo
Cultivo en medio líquido
• Habitualmente se realiza en tubos o en matraces. El crecimiento
se puede manifestar por enturbiamiento, por formación de velo o
película, o por sedimento.
Cultivo en medio sólido
• Puede ser en tubos o placas
a) Tubos con agar inclinado. Para sembrarlos, se mueve el ansa o
la punta suavemente sobre la superficie del agar con un
movimiento en zigzag desde el fondo hasta la parte superior,
cuidando de no dañar el agar.
b) Tubos sin inclinar. Se siembran introduciendo una punta en el
centro del agar. También se llama siembra por picadura.
c) Siembra en placas. Puede ser en superficie (por estrías o
bañado) o incorporada (mezclando el inóculo con el agar
semifundido)
 Aislamiento

Aislar: Es separar un tipo de microorganismo a partir de una población

mixta. En habitats naturales, raramente encontramos a los
microorganismos en cultivo puro

Aislamiento directo:se logra directamente a partir de una muestra

cuando el o los microorganismos están en una proporción adecuada., se
realiza por estrías (agotamiento) con o sin dilución previa de la muestra
(suelo, alimentos), en medio sólido

Aislamiento por enriquecimiento:Cuando el microorganismo que se

desea aislar e identificar se encuentra en baja proporción en la muestra,
se incluye una primera etapa que consiste en sembrar la muestra en
medio líquido. Luego de varios pasajes se aisla por el método de
estrías.
 Cultivo puro

• Las colonias se describen por examen macroscópico en

función del tamaño, la forma, el borde, la elevación, la
transparencia y el color. Esto resulta a veces muy útil en la
identificación

• A partir de colonias aisladas en medio de cultivo se realiza un

examen microscópico que debe mostrar células
razonablemente semejantes respecto al Gram y a la morfología.

• Las colonias aisladas deben aislarse nuevamente en medio no

selectivo por el método de estrías. Esto se conoce como
reaislamiento.