Ekstraksi, isolasi dan identifikasi

flavonoid dari daun Euphorbia neriifolia

Kimia Organik Bahan Alam
Euphorbia Neriifolia
Flavonoid (ENF)

Flavonoid Merupakan senyawa

fenolik yang terbesar yang
ditemukan di alam dan berasal
dari tumbuhan tinggi
 Metode

Kromatografi lapis tipis HPTLC

Ekstraksi Skrining fitokimia
(TLC) fingerprinting profile
Daun kering E. neriifolia (250g) hasil ekstraksi kemudian di hasil kualitatif yang telah diuji sekitar 10 mg ekstrak diambil
diekstraksi masing-masing pisahakan antara Quercetin dikonfirmasi dengan dan dilarutkan dalam masing-
dengan ether, benzena, dengan komponen lain membandingkan hasil uji masing pelarut dan volumenya
kloroform, etil asetat, dan menggunakan TLC standar Quercetin dibuat hingga 10 ml dalam
etanol, kemudian hasil labu takar.
ekstraksi tadi diekstrak lagi
dengan air suling. (ekstraksi
non-polar ke polar)
0 Karakterisasi
Senyawa

• FTIR (Fourier transform Infrared

spectroscopy; Model - Varian 3600)
• Spektrum 1H NMR direkam pada DRX-
Bruker 300 MHz (Mega Hz)
• Massa diperoleh oleh TOF MS ES + 5.18e4,
TOF MS ES + 477 dan TOF MS ES +
174.80ES + 3 (ABHAY_BIOTECH 28).
Hasil dan Diskusi
 Pemisahan kromatografi
Di antara semua, hasil dari etanol (48,9 g) dan berair (89,5 g) ekstrak
Yield of IC ditemukan secara berlebihan dibandingkan dengan semua. Tersedia semua
IC Rf Value % yield of IC
(g)
tujuh ekstrak, ekstrak etanol mengandung sebagian besar flavonoid dan
ekstrak etanol padat semi coklat gelap (48,9 g) digunakan untuk pemisahan
IF1 0.60 2.121 0.424 kromatografi menggunakan quercetin sebagai standar. n-butanol: asam
asetat: air (BAW, 2: 2: 6) ditemukan menjadi pelarut yang paling tepat untuk
pemisahan flavonoid dari ekstrak etanol dari EN. Setelah TLC tiga titik yang
IF2 0.79 6.532 1.306 dinominasikan sebagai F1, F2 dan F3 memiliki nilai Rf dari 0,60, 0,79 dan
0,90 masing-masing. Nilai Rf standar kaempferol lebih besar daripada
Quercetin dan Rutin, sehingga diduga senyawa F3 (0,90) adalah Kaempferol
IF3 0.90 5.263 1.052 dan F1 bertepatan dengan Rutin. Ketika lempeng yang diuji disemprotkan
dengan amonia dan uap yodium, menunjukkan warna quercetin yang sangat
rendah. Nilai Rf (0,79) F2 diisolasi dari ekstrak etanol yang bertepatan
*IC=Isolated compounds dengan nilai Rf dari quercetin standar. F2 hampir mekristal dengan etanol,
*IF=Isolated Flavanoid
dengan kristal berwarna kuning pucat padat, larut dalam air dan dalam
pelarut organik dan F2 dirancang sebagai E. neriifolia flavonoid terisolasi
(ENF). Senyawa ENF dipilih untuk studi lebih lanjut yang meliputi TLC
berulang, mengidentifikasi sifat senyawa dengan melakukan beberapa tes
kualitatif, konfirmasi dengan HPTLC dan IR senyawa ini.
 Phytochemi Standard
sidik jari HPTLC
ENF
Hasil berbagai tes cals (quercetin)
kualitatif dilakukan di
laboratorium dijelaskan Phenols ++ ++
dalam Tabel sebelah.
Kehadiran flavonoid Kromatogram HPTLC
(ENF) dikonfirmasi oleh Steroids - - menunjukkan bahwa
tes skrining, yang jumlah maksimum
menggambarkan tes komponen diamati di
positif untuk flavonoid bawah UV dan
dan negatif untuk Alkaloids - - florescence absorbance
steroid, terpe-noida dan mode. Gambar sebelah
alkaloid menegaskan hasil yang
diperoleh oleh TLC,
Flavonoids +++ +++
dimana spektral
kromatogram jelas
menunjukkan bahwa
nilai Rf dari semua
Terpenoids - -
ekstrak yang disebutkan
dan senyawa terisolasi
(ENF) bertepatan dengan
quercetin standar.

Skrining fitokimia dari

senyawa terisolasi (ENF)
Identifikasi dan Analisis spektral
Spektrum IR
menunjukkan puncak pada 3624, 3473, 3286
cm 1 (OH), 1707 cm 1 (> C‚O), 1649 cm
1,1408 cm 1 (CAC‚C), 1275, 1245, 1045 cm
1(OCH3), dan 769,8 cm 1 (CAH). Puncak
menunjukkan jumlah kelompok fungsional yang
memiliki signifikan besar terhadap prospek
obat E. neriifolia.

Spektrum 1H NMR
yang ditampilkan ENF sesuai dengan
pembawa inti flavonoid pada dppm: 8,04 (9H, s,
–OCH3), 7,27 (3H, s, Ar – H), 6.73 (4H, s, –
OH), dan 2.89–2.97 (2H, d, Non-Ar – H).
Spektrum 1H NMR dari senyawa yang
diekstraksi mengungkapkan sinyal proton
aromatik, yang dekat dengan yang dilaporkan
untuk bagian Quercetin

Spektrum massa
Berat molekul pada senyawa yang diekstraksi
diamati oleh TOFMS ES + m / z 378,33
dihitung untuk C18H18O9 (m / z 378)
.Komponen utama dari ekstrak ini ditandai
sebagai 2- (3,4-dihidroksi-5-metoksi-fenil) -3,5-
dihidroksi-6,7-dimetoksikromen-4-one
 Aktivitas Kasiogenik

Kami telah melihat aktivitas antikarsinogenik flavonoid baru ini pada tikus dan diketahui bahwa
flavonoid yang terisolasi mampu melindungi arsitektur jaringan dan mampu meminimalkan kelainan
dan karsinogenisitas yang disebabkan oleh N-nitrosodiethylamine. Ini mungkin disebabkan oleh
penghambatan radikal ROS & menetralisir radikal bebas yang memberikan bukti ilmiah penggunaan
terapi etno-medis pada ENF untuk mengobati kanker.

Spektrum IR flavonoid yang diisolasi mengkonfirmasi keberadaan gugus OH dalam keadaan bebas
dan mengikat yang bertindak sebagai situs pengikatan enzim karena flavonoid yang terisolasi
menunjukkan aktivitas anti-karsinogenik sampai tingkat terbaik dengan memperlambat dan
memodulasi enzim fase I (sitokrom P450 dan b5) tingkat peroksidasi, enzim biokimia (katalase,
dismutase superoksida, transaminase aspartat, alanin transaminase, fosfat alkali, total protein dan
kolesterol total) diubah oleh N-nitrosodiethylamine
 Kesimpulan studi tersebut bahwa analisis tanaman yang diteliti mengandung flavonoid. Isolasi flavonoid 2- (3,4-
dihidroksi-5-metoksi-fenil) -3,5-dihidroksi-6,7-dimet-oksibrat-4-one (C18H18O9) diekstrak dari Euphorbia neriifolia
memiliki potensi untuk menangakis radikal bebas, ROS dan juga menghambat peroksidasi lipid yang memiliki potensi
anti kanker. Kehadiran konsentrasi tinggi flavonoid di Euphorbia neriifolia yang digambarkan dari hasil kami,
bertanggung jawab untuk menanamkan mekanisme anti-oksidan yang merupakan faktor penyebab berbagai penyakit
degeneratif.
Thank you
Any Question?