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Antibiograma

Conceptos
• Antibiograma: son métodos in Vitro que determinan la
susceptibilidad de los microorganismos a una variedad de agentes
antimicrobianos, bajo condiciones de laboratorio específica y
estandarizada.

• Concentración Mínima Inhibitoria (CIM): Es la menor


concentración de una gama de diluciones de antibiótico que provoca
una inhibición de cualquier crecimiento bacteriano visible.

• Antibióticos: Son sustancias químicas producidas por organismos


vivientes, o sintetizados en el laboratorio capaces de inhibir en
pequeñas cantidades los procesos vitales de microorganismos,
destruyendo e impidiendo su desarrollo y reproducción.
Clasificación de los Antibióticos
• ß-lactámicos: Penicilinas, Monobactam.
• Glicopéptidos: Vancomicina.
• Aminoglicòsidos: Gentamicina, Amikacina.
• Macrólidos: Eritromicina, Azitromicina, Claritromicina.
• Quinolonas: Ciprofloxacino, Levofloxacino.
• Tetraciclinas
• Sulfonamidas y trimetoprim: bactrin , exazol.
Método de Difusiòn en Disco (Baeur-Kirby)

• Es el mas difundido.
• Prueba la inhibición o resistencia de los microorganismos,
enfrentándolos con los medicamentos que se encuentran
impregnados en pequeños discos.
Medio de cultivo utilizado
Mueller Hinton
• Su reproducibilidad aceptable.
• Baja concentración de
inhibidores, condición crítica para
evaluar sulfonamidas,
trimetoprim y tetraciclina.
• El crecimiento satisfactorio de
patógenos no exigentes.
• Existir ya gran experiencia en
estudios de susceptibilidad.
Factores que influyen en el Agar
pH: El rango de pH va de 7,2 a 7,4.
variación de cationes divalentes:
Ca y Mg: Afectan los halos de inhibición para aminoglucósidos
y tetraciclinas en Pseudomonas aeruginosa.
Profundidad del Agar: La profundidad recomendada de
la capa de agar es de 3 a 5 mm.
Preparación del Inóculo
 Se prepara el inóculo con ajuste a la turbidez
McFarland 0,5 que corresponde aun diámetro
de1.5 x10 UFC/ML, directo en caldo de
colonias frescas en agar no selectivo.


Inoculación de la placa
• Con un hisopo
estéril en tres
direcciones
inocule toda la
placa (giros de
60°).
Aplicación de sensidiscos

separación: los
discos deben de
estar separados24
mm (del centro de un
sensidisco al otro
más cercano).

Cantidad: 12
unidades en placas
de 150mm y 5
unidades en placas
se 100mm.
Lectura e interpretación de los resultados

Categorías de interpretaron:
Sensible: El microorganismo
presenta un gran área de inhibición
causada por el fármaco. 95% éxito

Intermedio: Se presenta un halo de


inhibición mas reducido.

Resistente: Presenta muy poco o


casi nada de halo.
Medición de los halos

Después de incuba las placas


del antibiograma se procederá
a la lectura de este.
Se usa una regla y se mide el
radio del halo de inhibición
partiendo de desde donde está
el disco de antibiótico hasta
donde se inhibió el crecimiento.
La longitud obtenida después
se compararán con estándares
que nos dirán si el
medicamento será efectivo o
no en el tratamiento.
Antibiótico Resistente Intermedia Susceptible

Ampicilina ≤ 13 14 - 16 ≥ 17

Amikacina ≤ 14 15 – 16 ≥ 17

Sulfisoxasol ≤ 12 13 - 16 ≥ 17

Gentamicina ≤ 12 13 – 14 ≥ 15

Cloranfenicol ≤ 12 13 - 17 ≥ 18

Ceftriaxona ≤ 12 14 – 20 ≥ 21

Ciprofloxacin
≤ 15 16 - 20 ≥ 21
a

Tetraciclina ≤ 14 15 - 18 ≥ 19

Acido
≤ 13 14 – 18 ≥ 19
Nalidixico

Estrptomicina ≤ 11 12 – 14 ≥ 15

anamicina ≤ 13 14 - 17 ≥ 18

Trimetroprim/
Sulfametoxas ≤ 10 11 – 15 ≥ 16
ol
Otros métodos
• Dilución en Caldo: En el método de dilución en caldo, base de
casi todos los métodos utilizados en la actualidad, se colocan
concentraciones decrecientes del agente antimicrobiano, generalmente
diluciones 1:2, en tubos con un caldo de cultivo que sostendrá el
desarrollo del microorganismo
• Método de E-test:
Consiste en aplicar sobre un medio de
cultivo, donde se encuentra el
microorganismo a ensayar, tiras plásticas que
llevan incluidas un gradiente de
concentración de un determinado ATB. Luego
se incuba adecuadamente y se observa la
formación de una elipse de inhibición de
crecimiento.
Método Automatizado:

Este método se basa en


micro diluciones sobre micro
tubos. El crecimiento
bacteriano se va a observar
por la turbidez o fluorescencia
de los micro tubos.
Es útil para examinar una
gran cantidad de muestras