ESTERILIZACIÓN

CONCEPTO
Esterilización: (del Latín sterilis, incapaz de reproducirse).
Proceso mediante el cual se alcanza la muerte de todas las formas de vida
microbiana.

Es un proceso por el cual todas las células vivas, esporas viables (bacterias y
hongos),virus y viroides, son destruidos o eliminados de un objeto o hábitat.

Un objeto libre de cualquier forma de vida se dice que está estéril.

Por lo tanto el concepto de esterilidad es absoluto.

• Desinfección.- Proceso mediante el cual se
eliminan agentes patógenos pero no
necesariamente todas las formas de vida
microbiana.

• Antisepsia.- (del Griego, anti, contra; sepsis,

putrefacción). Proceso que se utiliza para la
destrucción de microorganismos presentes en la
superficie cutáneo-mucosa.
Sufijos:
• cida.- (del Latín cida, destruir)
• stático.- (del Griego statikos, detener)

• Germicida (Germistático)
• Bactericida (Bacteriostático)
• Fungicida (Fungistático)
• Viricida (Virostático)
• Alguicidas (Algistático)
MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

Tabla de Métodos de Esterilización

Vapor a presión
Húmedo
(Autoclave)
Aire caliente (Horno)
Calor
Seco Flameado
Incineración
Métodos Físicos Filtración Discos de membrana
Rayos UV
No ionizantes
Rayos infrarrojos
Radiaciones
Rayos X
Ionizantes
Rayos g
gases Óxido de etileno
Métodos Químicos
líquidos Formaldehído
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

CALOR

Todos los microorganismos son susceptibles en distinto grado a la

acción del calor. Este provoca la desnaturalización de las proteínas,
fusión y desorganización de las membranas y/o procesos oxidativos
irreversibles en los microorganismos.

La efectividad del calor

como método de
esterilización depende de:

•Temperatura

•Tiempo de exposición
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

a) Tamaño de la población: Una población mayor requiere de mayor

tiempo para morir, que una población pequeña.

b) Composición de la población: Varía según la naturaleza del

microorganismo, ya que las endosporas bacterianas resisten más
que las células vegetativas.
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

Tabla de Métodos de Esterilización

Vapor a presión
Húmedo
(Autoclave)
Aire caliente (Horno)
Calor
Seco Flameado
Incineración
Métodos Físicos Filtración Discos de membrana

Rayos UV
No ionizantes
Rayos infrarrojos
Radiaciones
Rayos X
Ionizantes
Rayos g
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

CALOR HÚMEDO
PRINCIPIO

El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor más elevado

que el del aire. Por lo que, los materiales húmedos conducen el calor mucho
más rápidamente que los materiales secos debido a la energía liberada
durante la condensación.
Para llegar a la temperatura de
esterilización por calor húmedo se debe
tener una combinación de presión y
temperatura, el equipo utilizado para
esterilizar por calor húmedo es el
AUTOCLAVE.
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

CALOR HÚMEDO

Agente esterilizante: vapor de agua saturado

Mecanismo de acción: Produce la desnaturalización y coagulación de las

proteínas.

PROTEÍNA DESNATURALIZADA
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

CALOR HÚMEDO

121°C-123°C durante 20 min

Condiciones del proceso:
121°C ,15lb/in2 , 15 min
Preparación de materiales para su
esterilización:
a) Identificación: Nombre del material
b) Condiciones de esterilización
c) Fecha de esterilización
d) Nombre del operador
e) Tipo de material a preparar: vidrio, hule, acero
inoxidable, líquidos, sólidos

Protección del material:

a) Tapones de gasa algodón
b) Papel Kraft
c) Tapones de hule
d) Filtros de algodón
e) Tapones metálicos o de polipropileno
f) Tapones de baquelita
 Características del envoltorio
• 1. Porosidad (permeabilidad)
• 2. Fortaleza
• 3. Pelusas o partículas
• 4. Repelencia
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

CALOR HÚMEDO
Materiales que se pueden esterilizar por calor húmedo:

•Material de vidrio limpio

•Material de vidrio sucio
•Medios de cultivo
•Material metálico (pinzas, tijeras, material quirúrgico)
•Otros
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

CALOR HÚMEDO

PATRÓN DE CARGA

Agrupación de los materiales a ser

esterilizados, que poseen
características similares de volumen,
tamaño, tipo de material, etc.

Cada patrón de carga tendrá un

tiempo definido de esterilización.*
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

CALOR HÚMEDO
Validación del proceso.

Determinación de la distribución y penetración del calor, con la ayuda de

termopares e indicadores químicos y biológicos.

Indicador químico:
a) Cinta testigo de esterilización

Indicador biológico
a) Tiras de papel indicador
b) Tubos con indicador
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

CALOR HÚMEDO
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN
CALOR SECO

Principio:

El aire caliente generado por el calentamiento a base de resistencias

eléctricas produce desecación de la célula con ls consecuente coagulación
de proteínas, efectos tóxicos por niveles elevados de electrolitos, procesos
oxidativos y fusión de membranas.

La acción destructiva del calor sobre las proteínas y lípidos requiere mayor
temperatura cuando el material está seco o la actividad de agua del medio es
baja.

Equipo utilizado para esterilización

por calor seco: HORNO
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

CALOR SECO

Agente esterilizante: aire caliente

Materiales resistentes al calor seco:

•Material de vidrio
•Líquidos no acuosos (aceites)
•Polvos (talco)
•Material metálico (pinzas, tijeras, material quirúrgico)
•Otros
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

CALOR SECO

Preparación de materiales:

A) Identificación
• Nombre del material
• Condiciones de esterilización
• Fecha de la esterilización
• Nombre del operador

B) Protección del material

• Cubiertas de papel aluminio
• Tapones metálicos
• Cilindros de acero inoxidable
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

CALOR SECO

Condiciones del proceso: 160°C por 2 horas (esterilizar)

Validación del proceso:

Determinación de la distribución y penetración del calor

(temperatura) dentro de la cámara con ayuda de termopares e
indicadores biológicos.
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

INDICADORES DE ESTERILIZACIÓN

1) QUÍMICOS
a) Internos (sustancias dentro de una ampolleta que se funde al
llegar a la temperatura de esterilización)

b) Externos (cintas adhesivas o sellos impresos en bolsas con

sustancia que vira de color al llegar a la temperatura de
esterilización .
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

INDICADORES DE ESTERILIZACIÓN
2) BIOLÓGICOS

Indicadores hechos a base de endosporas de los

siguientes microorganismos:

calor húmedo: Geobacillus stearothermophilus

calor seco: Bacillus subtilis (var. Níger)
óxido de etileno: Bacillus subtilis (var. Níger)

Se pueden encontrar en presentaciones de:

Tira de papel impregnada
Ampolleta de vidrio con endosporas inmersas
en un medio de cultivo con indicador de pH
Cartuchos conteniendo un disco de papel filtro
impregnado de endosporas

La cantidad de endosporas que contienen estos

indicadores varía entre 1 X 105 y 1 X107
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

Tabla de Métodos de Esterilización

Húmedo Vapor a presión (Autoclave)

Aire caliente (Horno)

Calor
Seco Flameado

Incineración

Métodos Físicos Filtración

Discos de membrana
(mecánico)
Rayos UV
No ionizantes
Rayos infrarrojos
Radiaciones
Rayos X
Ionizantes
Rayos g
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

FILTRACIÓN
Principio:

Eliminar por remoción completa los microorganismos y partículas de un

tamaño específico que se encuentran en un líquido o gas utilizando para ello
un filtro (de profundidad o de membrana) con una porosidad tal que permita
su retención.

Agente esterilizante: Filtros de profundidad o filtros de membrana

Tipos de materiales:
Todos aquellos materiales que pueden ser alterados por la acción de la
temperatura:
•Vitaminas en solución (principio activo)
•Sueros
•Medios de cultivo
•Gases (Aire, oxígeno, etc.)
•otros
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

FILTRACIÓN
Tipos de filtros:

a) Filtros de profundidad
Consisten en materiales fibrosos o
granulados que se unen para formar una
capa gruesa rellena de canales retorcidos de
un diámetro pequeño. Se fabrican con tierra
de diatomeas (filtros de Berkefeld), porcelana
no vidriada (filtros de Chamberlain), asbesto
o materiales similares.

b) Filtros de membrana
Estos filtros son membranas porosas, con un
grosor ligeramente superior a 0.1 mm,
fabricadas de acetato de celulosa, nitrato de
celulosa, policarbonato, fluoruro de polivinilo
u otros materiales sintéticos. Membranas con
poro de 0.2μm se emplean para eliminar
células vegetativas de soluciones de 1mL a
1L.
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

FILTRACIÓN

Mecanismo de acción de la
filtración:
La membrana o cartucho filtrante por el
pequeño diámetro del poro retiene a las
partículas y microorganismos que se
encuentran en el líquido a filtrar .

Condiciones del proceso:

poro de 0.22 micras
poro de 0.45 micras

Bioindicador: Brevundimonas diminuta

(0.3 μm)
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

FILTRACIÓN
En condiciones asépticas,
se utiliza un filtro de
membrana de 0,45 µm de
tamaño de poro que se
coloca en el portafiltros de
la rampa de filtración de
vacío.
Una vez finalizado, se
recoge el filtro con unas
pinzas estériles y se
coloca dentro de un
matraz con caldo de
cultivo

Se coloca el embudo del

filtro previamente
esterilizado
Se incuba el matraz a
37ºC durante 1-5 días

Se inicia la filtración
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

Tabla de Métodos de Esterilización

Húmedo Vapor a presión (Autoclave)

Aire caliente (Horno)

Calor
Seco Flameado

Incineración
Métodos Físicos Filtración
Discos de membrana

Rayos UV
No ionizantes
Rayos infrarrojos
Radiaciones
Rayos X
Ionizantes
Rayos g
MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

C) RADIACIONES

Radiación: es la propagación de energía por el espacio. Tienen gran

penetrabilidad.

Bioindicador: Bacillus pumilus

Tipos de radiación:

a) Ionizante (Rayos X y rayos gama) : son aquellas que producen iones y

radicales libres que alteran las bases de los ácidos nucleicos, estructuras
proteícas y lipídicas, y componentes esenciales para la viabilidad de los
microorganismos. Los inactivan metabólicamente (ya no producen enzimas
esenciales).
Destrucción DNA

Tienen alto poder de penetración.

MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN

Tipos de materiales:

Se les utiliza para esterilizar materiales termolábiles (termosensibles)

material farmacéutico; material médico-quirúrgico (guantes de
cirujano, suturas de nylon, jeringas desechables, agujas, bisturís,
catéteres, prótesis, etc).

Se utilizan a escala industrial por sus costos.

• b) No ionizante (UV): son radiaciones que afectan a las moléculas
de ADN de los microorganismos debido a que forman dímeros de
pirimidinas adyacentes que inducen errores en la duplicación y por
lo tanto mutación o pérdida de la viabilidad de las células.

• Las lámparas se colocan en habitaciones, cabinas de seguridad

biológica para esterilizar el aire y cualquier superficie expuesta,
tratamiento de agua, etc.
• No muy penetrable, aire y superficies.
MÉTODOS QUÍMICOS DE ESTERILIZACIÓN

gases Óxido de etileno

Glutaraldehído
Métodos Químicos Peróxido de Hidrógeno
líquidos
Formaldehído
Acido peracético

Existen ciertas sustancias químicas que influyen negativamente

sobre las bacterias, pudiendo ejercer dos tipos de efectos diferentes:

A. Bacteriostáticos: cuando impiden el crecimiento bacteriano.

B. Bactericidas: cuando destruyen (matan) a las bacterias.

• Glutaraldehído:
• Concentración 2%
• Tiempo de exposición 10 horas
• Inactivación rápida de m.o. excepto esporas
• Relativamente no corrosivo
• Peróxido de Hidrógeno
• Concentración al 6%
• Esporicida
• Muy corrosivo

• Formaldehído
• Dirigido a materiales para hemodiálisis
• 8% durante 24h
• Muy tóxico
• Acido peracético
• Combinación al 35% con peróxido de hidrógeno y otros
agentes neutralizantes.
• Para materiales sensibles al calor
• Temperatura entre 50 y 56 °C
• pH 6.4
• Concentración final 0.2%
• Tiempo del ciclo entre 25 y 30 min
• Solo para equipos sumergibles
 Óxido de etileno
• Materiales termolábiles: industria farmacéutica, cosmética
• Implantes, DIU, lentes intraoculares, inyectables, cápsulas de
gelatina.

• Concentración OE (300-600 mg/L) o

• (450-1500 g/L)
• Temperatura (T°amb-54°C)
• Tiempo de exposición (2.0-5.5h)
• Humedad relativa (20-40%)

• Bioindicador:
• Bacillus subtilis
• (Bacillus atrophaeus)
• Plasma de peróxido de hidrógeno
• Para materiales termolábiles
• No exceder 50°C
• Tiempo entre 45 y 55 min
• Seguro y no tóxico.
 HALÓGENOS FENOLES ALCOHOLES
★YODO (cresoles, xilenoles y ortofenilfenoles) (Etanol e isopropanol)
Oxida los constituyentes celulares
y forma compuestos de yodo con
Desnaturalizan proteínas y alteran las Desnaturalizan proteínas y
las proteínas.
membranas celulares. disuelven los lípidos de la
 Puede destruir algunas esporas membrana.
 Puede lesionar la piel, deja
 Son tuberculocidas
manchas y se pueden ocasionar
(Mycobacterium)  Son batericidas y fungicidas
alergias por yodo.
 Eficaces en presencia de materia  Destruyen algunos virus que
Permanecen activos después de
orgánica contiene lípidos
mucho tiempo de su aplicación.
 Permanecen activos después de  Se utilizan a una concentración
Tienen olor desagradable y
mucho tiempo de su aplicación de 70 a 80%
pueden causar irritación.
 Tienen olor desagradable y pueden GASES ESTERILIZANTES
causar irritación
★CLORO (Oxido de etileno)
ALDEHÍDOS
Oxida los materiales celulares.
(Formaldehído y glutaraldehído)
Destruye a los microorganismos al
combinarse con las proteínas
 Ocasiona la destrucción de las celulares.
células vegetativas y hongos Moléculas muy reactivas que se
combinan con las proteínas
 La destrucción de casi todos los inactivándolas.
microorganismos se produce a los  Es tanto microbicida como
30 minutos esporicida
 No destruye esporas  Son esporicidas Es particularmente eficaz como
agente esterilizante porque
 La materia orgánica interfiere en penetra rápidamente en los
la acción del cloro. materiales
 Características de un desinfectante
ideal
• Alto coeficiente de desinfección
• Estable
• Soluble
• No tóxico para el hombre ni animales
• No corrosivo y sin acción decolorante
• Alto poder de penetración
• Barato
• Acción desodorante
• Fácil aplicación
 TIPOS DE INDICADORES BIOLÓGICOS
• A) tiras con esporas Actualmente en deshuso
Tiempo de incubación
de 2 a 7 días
• B) autocontenidos
• C) de lectura rápida

Tiempo incubación 3h
α-D-glucosidasa

Tiempo de incubación 48 h
 Mantenimiento de los indicadores
biológicos
• Temperatura de almacenamiento 15 y 30°C.

• Humedad 35 a 60%.

• No almacenarse junto a agentes esterilizantes u

otro producto químico.

• Introducirse en el centro de los paquetes más

grandes y pesados.
 Si el bioindicador da resultado positivo
Revisar:
• Esterilizador
• Procedimientos empleados
• Retirar todo el material de esa carga e
informar al supervisor

Mantenimiento preventivo de equipos

 Si el bioindicador da resultado negativo

• Ausencia del m.o.

• Caducidad
• Almacenamiento inadecuado
• Tiempo o temperatura inadecuada en la
incubación
 Indicadores químicos
• Va

Calor húmedo Óxido de etileno

 Valor D y Z
• Cuando una población bacteriana está
sometida a un proceso de esterilización se
observa una disminución en el no. de m.o.
sobrevivientes en función del tiempo de
exposición.

• D = Tiempo de reducción decimal, tiempo

requerido para reducir la población en un 90%
• D varía para cada temperatura
• Z= Incremento en la temperatura para que el
valor de D se reduzca a la décima parte del
inicial.