ANALISIS

INSTRUMENTAL
 Métodos Analíticos

Métodos químicos por Métodos instrumentales

vía húmeda
Se obtiene una señal:
S  Canalito

Gravimetría Análisis Electroquímicos Separación Opticos

volumétrico

Cromatográfico
Precipitación Titulación Potenciométrico Emisión

Pesada Conductimétrico Absorción

 Métodos Clásicos
 Separación de los componentes de interés de una
muestra (analitos) mediante:
 Precipitación
 Extracción
 Destilación
 Análisis Cualitativos
 Los componentes separados se trataban con reactivos
dando origen a productos que se podían identificar por
su color, punto de ebullición o de fusión, su
solubilidad, su olor, su actividad óptica o su índice de
refracción.
 Análisis Cuantitativos
 La cantidad de analito se determinaba mediante
medidas gravimétricas o volumétricas.
 Métodos modernos que separan, identifican
y cuantifican diferentes especies químicas (orgánicas,
inorgánicas, bioquímicas, etc.)
 Se basan en fenómenos físicos-químicos conocidos.
Su aplicación ha ido en paralelo al desarrollo de
la electrónica.
 Para el análisis cuali o cuanti se miden las
propiedades de los analitos.
SEÑALES ANALITICAS
 Ej.
Absorción o emisión de luz
Conductividad o potencial de electrodo
Dispersión, rotación, refracción,difracción
 Un instrumento para análisis químico debe:
– convertir las señales químicas o físicas
almacenadas del analíto, en información que
puede ser manipulada e interpretada por el ser
humano.
 El instrumento es un dispositivo de comunicación
entre el sistema de estudio y el investigador.
 Para obtener información el analíto se estímula
con energía electromagnética, eléctrica, mecánica
o nuclear.
– Generador de señales
– Transductor de entrada o detector
– Procesador de señales
– Transductor de salida o dispositivo de lectura
 Definición del Problema
- De cuánta muestra se dispone
- Qué componentes de la muestra interferirán
- Cuáles son las propiedades físicas y químicas de
la matriz de la muestra
- Cuántas muestras deben analizarse

- Parámetros de Calidad
- Exactitud y Precisión
- Sensibilidad Y Selectividad
- Límite de detección e intervalo de
concentración
 Otras características a tener en cuenta en la
elección del método
1. Velocidad
2. Facilidad y comodidad
3. Habilidad del operador
4. Coste y disponibilidad de equipo
5. Coste por muestra
 Grado de concordancia
entre los datos que se
obtienen de una misma
forma.
 Mide el error aleatorio o
indeterminado de un
análisis. Ej.
% Hum.
Vibraciones
Cambio T o
Sus parámetros de calidad
son Desv. est. media,
absoluta, relativa, CV y
varianza
 Repetitividad
Precisión determinada cuando las mediciones
se realizan en condiciones repetibles, es decir:
el mismo método, mismo material, mismo
operador, mismo laboratorio; período de
tiempo limitado.

 Reproducibilidad
Precisión determinada cuando las mediciones
se realizan en condiciones reproducibles, es
decir: el mismo método; diferentes operadores;
diferentes laboratorios, diferentes equipos y un
largo período de tiempo.
 Mide el error sistemático, o determinado de un método
analítico.
 Se define por la ecuación:  = u – xt
 es la media de la población para la concentración del
analito en una muestra cuya concentración verdadera es xt
La exactitud se determina analizando estándares de
referencia.
Ej. Mala calibración, equipo dañado (causas defindias)

Precision and Accuracy

Precision– Precision+ Precision– Precision+

Accuracy – Accuracy – Accuracy + Accuracy +

Fundamentals of modern UV-visible spectroscopy

Figure : 71
 Capacidad de un método o instrumento de
diferenciar pequeñas diferencias en la
concentración de los analitos
 La IUPAC, define la sensibilidad como:
La pendiente de la curva de calibración a la [ ]
de interés
 Depende de:
La pendiente de la curva de calibración y
Reproducibilidad o precisión del sistema de
medición
 Para dos métodos con igual precisión,
el que presente la mayor pendiente en la curva
de calibración será el más sensible
  Sensibilidad de Calibración: Pendiente de
la curva de calibración a la concentración
de interés.
S  mc  Sbl
La sensibilidad de calibración tiene el inconveniente
de no tomar en cuenta la precisión. Por ello, Mandel
y Stiehler proponen la Sensibilidad analítica γ:

  m / ss
Es insensible a los factores de amplificación e
independiente a las unidades en que miden S.
 Concentración o peso mínimo de analito que
puede detectarse para un nivel de confianza
dado.
 Cuando nos aproximamos al límite de detección,
la señal analítica se aproxima a la señal del
blanco Sbl.
 La mínima señal analítica distinguible Sm se toma
como la suma de la señal medida del blanco Sbl
más un múltiplo k de la desviación estándar del
mismo.

Sm  Sbl  ksbl
Los valores obtenidos se utilizan para calcular
el límite de detección cm

Sm  Sbl
cm 
m

El limite inferior se estima como 10 x Ss

cuando la concentración del analito es cero

Según Kaiser, estadísticamente se considera

que para k=3, el nivel de confianza es 95%.
 Concentración o peso mínimo de analito que
puede cuantificarse para un nivel de confianza
dado.
 La mínima señal analítica cuantificable Sc se toma
como la suma de la señal medida del blanco Sbl
más un múltiplo k=10 de la desviación estándar

S q  Sbl  10sbl
S q  Sbl
LOQ 
m
 • Intervalo de [ ] en que es aplicable un método analítico

Rango Lineal
o Dinámico

LINEALIDAD: Capacidad del método de producir resultados

directamente proporcionales a la [ ] del analito en la muestra.

ROBUSTEZ: Capacidad del método para no ser afectado por

pequeños cambios deliberados en sus parámetros y provee
una indicación de su confiabilidad durante su uso normal.
LINEALIDAD
Capacidad del método de producir
resultados que son directamente
proporcionales a la [ ] del analito en
la muestra.

ROBUSTEZ
Capacidad del método para no ser
afectado por pequeños cambios
deliberados en sus parámetros y
provee una indicación de su
confiabilidad durante su uso normal.
 Grado de ausencia de interferencias debidas a
otras especies contenidas en la matriz de la
muestra.
 El coeficiente de selectividad de B con respecto
a A se define como:
kB,A = mA/mB
Da la respuesta relativa del método para la
especie B cuando se compara con A
Los coeficientes de selectividad pueden variar
desde 0 (no hay interferencia) hasta valores
superiores a uno.
 Calibración de los métodos
Instrumentales
 ISO (International Estándar Office)
Define la calibración como:
El conjunto de operaciones que permiten
establecer en determinadas condiciones
experimentales, la relación existente entre los
valores indicados por el instrumento con los
valores obtenidos con la medida de un valor
conocido.

􀂄 Curvas de calibración
􀂄 Método de las adiciones estándar
􀂄 Método del estándar interno.
 Se utilizan estándares de concentraciones conocidas
del analito de interés.
 Se requiere un blanco que contenga los componentes
de la muestra original excepto el analito
 Se obtiene una gráfica (recta) de respuesta del
instrumento vs concentración del analito.
 Método de mínimos
cuadrados.
 Se utiliza en muestras
complejas donde los efectos
de matriz son importantes.
 Implica añadir uno o mas
incrementos de una solución
estándar a una alícuota de
muestra
 El valor del volumen en la
intersección de la línea recta
con el eje-x es el volumen del
reactivo estándar equivalente
a la cantidad de analito en la
muestra.
 Se adiciona a todas las muestras el EI en una
cantidad constante.
 La calibración representa la razón entre la señal
del analito y la del estándar interno como una
función de la concentración del analito
 El EI compensa distintos tipos de errores
indeterminados y sistemáticos.
 Si el EI y analito responden proporcionalmente
a los errores instrumentales y fluctuaciones del
método, la razón entre las señales es
independiente de las fluctuaciones
 Cada medida analítica
lleva dos componentes:

La que lleva la
información del analito
de interes
La que tiene
información ajena, no
deseada: el ruido
Definición de la relación señal/ruido (S/N)
S media..de..la..medida x
 
N desviación..estándar..de..la..media s
 La detección de una
señal mediante un
sistema visual resulta
imposible cuando la
relación señal/ruido
es < 2 o 3
 Ruido químico
- Fluctuaciones en la humedad de la muestra
- Estratificaciones en un sólido o polvo
- Cambios en la intensidad de la luz que afectan
sustancias fotosensibles
- Cambios de presión o temperatura que afectan el
equilibrio (ej. humos)
 Ruido instrumental
Se asocia a cada componente del
instrumento: fuente, transductor de entrada
o transductor de salida

Puede ser de distinto tipo y provenir de

distintas fuentes
 tipos de ruido instrumental:
1)Ruido térmico (o Johnson)
2)Ruido de disparo
3)Ruido de parpadeo (o 1/f)
4)Ruido ambiental
 Ruido térmico, o ruido Johnson
Se debe a la agitación térmica de los electrones u
otros portadores de carga
Dicha agitación o movimiento origina
periódicamente heterogeneidades de carga que a
su vez crean variaciones de voltaje

 Ruido de disparo:
Se origina siempre que exista una corriente que
produzca un movimiento de electrones o de
otras partículas cargadas a través de una unión
8p y n o el vacío para un tubo de vacío.

Puede minimizarse reduciendo el ancho de

banda de las frecuencias.
 Ruido de parpadeo
- Sus causas no se comprenden bien.
- Su valor es inversamente proporcional a la
frecuencia de la señal que se observa.
Ruido 1/f
- Significativo para frecuencias < 100 Hz

 Ruido ambiental
Proviene del entorno; cada conductor de un
instrumento es una antena potencial que
capta radiación electromagnética y la
convierte en señal eléctrica.
 Puede mejorarse por hardware o software

Hardware: incorpora al diseño del instrumento

filtros, cortadores, escudos, moduladores,
detectores sincrónicos

Software: se basan en distintos algoritmos

digitales de ordenador que permiten extraer las
señales de entornos ruidosos
 Métodos de hardware
- Conexión a tierra o blindaje
- Amplificadores diferenciales
- Filtrado analógico
- Modulación
- Corte de la señal (amplificadores de corte)
- Amplificadores de cierre
Métodos de software
- Promediado conjunto
- Promediado por grupos (box car)
- Filtrado digital
- Métodos de correlación
- Transformadas de Fourier