BACTERIAS GRAM POSITIVAS

DR JORGE CHUMPITAZ CONDE

SECCION DE MICROBIOLOGIA
INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL DAC
GENERO STAPHYLOCOCCUS
STREPTOCOCCUS
 PATOGENICIDAD:
 Capacidad de las bacterias para causar
una enfermedad. Esta propiedad es
característica de una especie bacteriana.
Ejemplo de especies bacterianas
patógenas para el hombre son el
Streptococcus pneumoniae y el
Staphylococcus aureus.
 Hay un porcentaje de la población (sobre
todo en ambientes con alta contaminación)
que porta el Saphylococcus aureus sin
manifestar la enfermedad, caso de que se
habla de un estado de portación (nasal,
cutánea, etc), frente a desvalances pueden
enfermar. Estas personas son importantes
desde el punto de vista epidemiológico.
 VIRULENCIA
 Expresión cuantitativa de la patogenicidad.
Propiedad característica de cada cepa
bacteriana; dentro de una especie
patógena, cada cepa puede tener distintos
grados de patogenicidad, incluso ser
cepas avirulentas. Estas últimas no
producen enfermedad, pero son
importantes porque mantienen toda su
estructura antigénica, por lo que inducen
una respuesta inmune.
Etapas obligatorias para que un
patógeno cause una enfermedad

Adherencia y penetración a los

tejidos: si las bacterias no tienen la
capacidad de adherirse a los tejidos,
difícilmente podrán colonizar e infectar. Por
ejemplo, si la bacteria no puede adherirse
al epitelio respiratorio, las secresiones, los
cilios, el estornudo, la tos, la eliminarían
continuamente.
Diseminación local y general.
Multiplicación en los tejidos:
diariamente llegan bacterias hasta
esta etapa.

Causar daño en el hospedador.

Evadir los sistemas defensivos.
La bacteria utiliza productos
extracelulares o enzimas
 Hialuronidasa, degrada ácido hialurónico
 Colagenasa,degrada colágeno de
músculos (necrosis muscular: gangrena)
 Coagulasa Convierte la fibrina en
fibrinógeno; detecta y localiza el proceso;
ofrece dificultad al paso de antibióticos.
 Leucocidina Staphylococcus aureus
Altera la membrana de neutrófilos y
causa descarga de gránulos lisosomal.
 Hemolisinas Streptococcus,
staphylococcus Fosfolipasas o
lecitinas que destruyen glóbulos rojos
 INTOXICACIONES

 Intoxicación alimentaria Staphylococcus

aureus Náuseas, vómitos, diarreas. El
alimento se consume con toxinas;
síntomas aparecen muy rápidamente, eso
la diferencia de la infección..
INFECCIONES DE LA PIEL Y TEJIDOS
BLANDOS
 Foliculitis por S. aureus
 Abscesos “ “
 Impetigo por S.pyogenes
 Erisipelas “ “
 Celulitis “ “ asociado a otros
 Fasciitis “ “ y anaerobios
 GÉNERO STAPHYLOCOCCUS
 Cocos, Gram positivos (azul, retiene la
tinción), agrupados en racimos.
 Anaerobios facultativos.
 Fácil de cultivar
 Relativamente resistentes al calor y
pueden tolerar medios con elevada
concentración salina o medio hipertónico,
esto es importante en los alimentos
conservados con sal, algunas cepas
sintetizan una enterotoxina.
 Lascolonias son grandes,
hemolíticas, pigmentadas
(staphylococcus aureus
tiene pigmento dorado,
patógeno para el hombre).
 Principales especies:
- Staphylococcus aureus
- Staphylococcus epidermitis
(flora normal)
- Staphylococcus
saprophyticus:
- Producen cuadros en
pacientes inmuno
comprometidos; contamina
catéteres, implantes,
prótesis.
Staphylococcus: Coloración
Gram
Staphylococcus: Medios de
cultivo
Pruebas diferenciales
Gram: Staphylococcus y
Streptococcus
 GÉNERO STREPTOCOCCUS
 Forman cadenas de 2-3 células, otras
tienen células alargadas (streptococcus
neumoniae). Existen muchas especies,
también en la boca, algunas responsables
de patologías, como el streptococcus
mutans. Principalmente S. pyogenes.
 Inmóviles, anaerobios facultativos (en el
surco gingival hay menos oxígeno).
 No esporulados. Cocos Gram positivos en
cadenas de longitud variable, en el caso de
streptococcus pyogenes,
 Condiciones de cultivo: comparado con los
staphylococcus, son más exigentes, el
medio debe ser mejorado con agar sangre.
 Colonias puntiformes.
 Sin pigmento.
 Con o sin hemólisis.
 Resistencia a agentes
externos: más lábil que
staphylococcus. Esto
hace que el mecanismo
de transmisión de este
por contacto directo
Clasificación
 a hemolisis: hemolisis parcial,
produce halo verdoso; Streptococcus
neumoniae.
 b hemolisis: hemólisis total, halo
transparente, Streptococcus
pyogenes.
 g hemólisis: Enterococcus faecalis
(cambia el primer nombre, pero
conserva la misma estructura). No es
hemolítico.
 CUADROS CLÍNICOS
 Tracto respiratorio:

 Faringo amigdalitis: más del 90%

producidas por streptococcus pyogenes.
 Escarlatina: se debe a la presencia de un
gen que produce toxina eritrógeno, que no
está en todas las cepas, las que tienen que
estar al estado lisogénico.
 Cuadros no supurados
 Enfermedad reumática: válvulas
cardíacas.
 Glomerulonefritis: la cepa nefritogénica
puede producir este cuadro.
 Ambos cuadros son muy graves, de ahí la
importancia de un diagnóstico y
tratamiento propio de una
faringoamigdalitis. Frente a una
faringoamigdalitis streptocócica hay que
hacer un tratamiento para evitar secuelas.
Streptococcus
Streptococcus
Streptococcus: Agar Sangre
Streptococcus pneumoniae
 Agente causal de neumonía, meningitis,
sinusitis y otitis media
 Aislado casí simultáneamente por Pasteur
(Francia) y Sternberg (EEUU)
 Fue el primer microorganismo descubierto
como patógeno extracelular típico
 Resiste la fagocitosis y se replica fuera de
la célula
Características morfológicas y de
cultivo
 Cocos Gram+
 Posee cápsula, rara vez se ha observado
cepas no capsuladas (conjuntivitis)
 Reacción de Quellung: mayor visibilidad
microscópica de cápsula por interacción
de anticuerpos.
 Agar sangre produce una sustancia alfa
hemolisina, degrada la hemoglobina,
apreciándose de color verde.
 Mal llamada hemólisis (ACH)
Identificación
 Alfa hemólisis
 Catalasa negativo
 Susceptibilidad acetil cupreína
(Optoquina) o solubilidad a las sales
biliares
 Halo de inhibición vs. Solubilidad sales
biliares
Empleo de Medios Selectivos
 Agar Gentamicina(5ug/ml)
Serotipificación
 Se han identificado 80 serotipos
(actualmente > 120) 1 al 80.
 Los primeros son los más comunes
 Serotipo 3 altamente mucoide (S. mucosus
Streptococcus pneumoniae
Mecanismos patogénicos
 S. pneumoniae se fija a las células
faríngeas por interacción específica entre
adhesinas de la superficie bacteriana y
receptores Hidratos de Carbono de la
célula.
 Capacidad del S. pneumoniae de escapar
de la fagocitosis
Ausencia de receptores reconocen a
polisacáridos capsulares
 Fuerzas electroquímicas que repelen a los
fagocitos
Enmascaramiento del anticuerpo por
carbohidratos
 Factores bacterianos: incrementa la
inflamación y el daño tisular
Epidemiología
 Ecosistema: nasofarínge detectable 5 al
10% adultos sanos, 20 - 40% en niños sanos
 Estacional
 Primera infección 6 meses: X 4 meses
 Bacteriemia alta en neonatos < 2 mese y >
70, adultos jóvenes
 20 casos de neumonía 100,000 adultos
jóvenes
 280/100000 en edad avanzada
 Pre antibótica: 700/100,000 jóvenes
Streptococcus pneumoniae
Optochin
 STREPTOCOCCUS AGALACTIAE
 Descubierto por Fry 1935
 Lancefield y Hare: identificas en mujeres
puerperales asintomáticas.
 A partir de 1960 se advierte con más
frecuencia
 Presencia en neonatos y niños de corta edad
demostró su prevalencia
 En su inicio no reemplazo a E. coli
 Permanece la incidencia en los últimos
20años.
 En la actualidad en adultos no gestantes.
Clasificación y características
morfológicas I

 Pertenece a los Streptococcus del Grupo B

 Diferenciación serológica por grupos en
1933
 Clasificación: por reacción de
precipitación capilar.
 Diplococcus Gram +
 Cadenas cortas
Clasificación y características
morfológicas II

 Facultativo
 Crece en diversos
medios de cultivo
 Colonias de 3 a 4 mm
de dm., color grisáceo
en Agar Sangre de
carnero 5%
 COlonias planas
estrecha zona
hemólisis
Clasificación y características
morfológicas III

 1 a 2% no son hemolíticas, pero no se

asocian a alfa hemólisis
 Doble hemólisis en Agar Sangre de conejo
post refrigeración
 97% produce pigmento amarillo
 medio selectivo de Todd Hewitt con Sangre
de carnero 5% (Ac. Nalidíxico y
Gentamicina o Colistina)
 Identificación Serológica
 Detección de Ag de pared celular
específico (antisuero hiperinmune
específico de grupo) carbohidrato
específico (D-glucosamida, D-galactosa, “L-
ramnosa”)
 Inmunoelectroforesis
 ELISA
 Coaglutinación
 Aglutinación latex
Identificación no serológica
Presuntiva
 Resistencia a la Bacitracina y SXT
 Hidrólisis del hipurato de sodio positivo
 Generación de pigmento carotenoide en
anaerobiosis
 Hidrólisis de la esculina negativo
 Factor de CAMP
CAMP

FUNDAMENTO:

 Proteína extracelular
que conduce a la
hemólisis sinérgica
con la B lisina de S.
aureus.
CAMP
 Clasificación serológica
Dos Ag (Hidratos de carbono de pared celular)
permiten la clasificación de serotipos Ia, Ib, II y
III:
 Ag específico o Ag C
 Sustancia específica o Sustancia S
Quinto serotipo Ic posee un Ag polisacárido
capsular (Ag Ia, y Ag proteíco de superficie Ib)
Los polisacáridos capsulares: “Ag tipo específico”
Proteínas de superficie: “Marcadores antigénicos
adicionales”
Epidemiología y transmisión I
a Aislados en el tracto genital y gastrointestinal
inferior de mujeres embarazadas 5-40%
b Factores asociados detección:
- Método de aislamiento empleado
- Tipo de muestra: parte inferior de vagina, areas
periuretrales, o anorectal (mayor indice de
colonización 20%). Pueden residir en tracto
urinario generando bacteriuria asintomática
durante el embarazo
- Detección de portadores: tiempo del embarazo,
día del ciclo menstrual, edad, actividad sexual,
mujeres virgenes prevalencia menor, embarazos
previos, origen etnico,
Epidemiología y transmisión II
- Un solo cultivo de la parte inferior vagina y
anorectal previo al parto 94% detección
- Area anorectal permite predecir cronicidad
- Orofaringe en mujeres embarazadas 5%
c Transmisión neonatal:
- Transmisión vertical de la madre intrautero o
durante el parto
- Cultivos pareados madre-niño positivos
- Instalación temprana en niño: madre altamente
coloniz.
- Transmisión horizontal: nosocomial, tardía
Incidencia
 Neonatos instalación temprana: 0.7 - 3.7 por
mil
 Instalación tardía: 0.5 - 1 por mil
 15 a 25% de morbilidad febril post parto
 Instalación tardía meningitis en neonatos:
cepa Tipo III
Diagnóstico I
 Muestra: Sangre, LCR, supuración focal,
material de aspirado.
 Metódos serológicos
 Detección en gestantes:
- Cultivos bacteriológicos
- Coloración Gram de hisopados vaginales
 Diagnóstico II
Secreción vaginal, cervical, anorectal

A. Sangre Hitchens Pai Todd Hewitt Agar Granada

Hemolisis A.sangre A.sangre Colonias

Catalasa naranjas o
Gram rojas
CAMP
Serología
 Agar Granada
Proteosa peptona
Almidón
Acido propaensulfónico
Fosfato disódico
Glucosa
Piruato de sodio
Cristal violeta
Colistina
Metronidazol
Suero de Caballo
Agar