UNIVERSIDAD DE LA SERENA MICROBIOLOGÍA

FACULTAD DE CIENCIAS PEDAGOGÍA EN BIOLOGÍA Y CIENCIAS

DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA NATURALES

Sanches et.al. (2017). LAS AVES SILVESTRES

EN CAUTIVERIO COMO RESERVORIOS DE
E. COLI ENTEROPATÓGENA (EPEC) Y E.
COLI PRODUCTORA DE TOXINA SHIGA
(STEC). Brazilian journal of microbiology
(48),760-763.
Alumna: Carla Torrejón Castillo.
Profesor: Alex Cea Villablanca.
 INTRODUCCIÓN
 Zoonosis: Se asocia a desequilibrios ecológicos.
 Desequilibrios ecológicos como resultado de:
• Deforestación
• La expansión de la población humana
• Los cambios en las prácticas agrícolas
• La invasión de hábitats de vida silvestre.

 Zoológicos
 Escherichia coli (E.coli) enterobacteria más Figura 1: Guacamayo del orden Psittaciformes.
oportunista, enfermedades sistemáticas en
aves.
 La E. coli productora de toxina Shiga (STEC)
y la E. coli enteropatógena (EPEC) se
consideran diarreogénicos humanos que
afectan a las aves y pueden considerarse
patógenos zoonóticos.
 EPEC y STEC dos patotipos que generan
diarrea en humanos.
 El patotipo EPEC conduce a una alta tasa de
mortalidad infantil en los países en
desarrollo.
Figura 2: Demostración de E. coli
DIARREA
 La diarrea es una consecuencia de
la pérdida de microvellosidades
intestinales, después de la
adherencia bacteriana en los
enterocitos, con las consiguientes
lesiones de unión y borrado.
 Unión y borrado  A/E
 Lesiones A/E

Figura 3: Demostración fijación y borrado (A/E)

por EPEC.
 Gen eae +
CEPAS EPEC

Detección Plásmido
EPEC típicas (tEPEC) EAF
molecular
Gen bfp +

EPEC atípica (aEPEC) Detección Gen eae +

molecular
Ausencia
de
Gen bfp - Plásmido
EAF
CEPAS STEC Stx1
Sintetizadas
en
profágos
Stx2
OBJETIVO

 Buscar la presencia de EPEC y STEC en aves cautivas de diferentes ordenes,

ubicadas en parques zoológicos de São Paulo, Brasil.
 MATERIALES Y METODOS
AVES
 Se examinaron 516 muestras de heces aisladas de aves cautivas pertenecientes a 10
órdenes (70 especies):
 ORDENES:
•Passeriformes (canario y zorzal, n = 88)
• Accipitriformes (halcón, n = 14)
•Falconiformes (halcón, n = 46)
• Galliformes (pava y paujil, n = 50)
•Strigiformes (búho, n = 48)
• Anseriformes (pato y ganso, n = 80) •Columbiformes (palomas, n = 72)
• Psittaciformes (guacamayo, loro y perico, n = 99) •Piciformes (tucán y aracari, n = 10)
• Pelecaniformes (pelícano y garceta, n = 9)
 Las muestras se recolectaron entre
septiembre de 2013 y junio de 2015, en
dos zoológicos municipales: Zoológico
Quinzinho de Barros y Zoológico
Municipal de São Bernardo do Campo
ubicados en el estado de São Paulo, Brasil.
 Heces  AMIES
 Laboratorio en condiciones de
refrigeración.
Identificación de E. coli

 Agar MacConkey y se incubaron a 37 ° C

durante 24 h
 Identificación bacteriana  Pruebas
bioquímicas

Enterokit (Probac® - São Paulo, Brasil).

Amplificación por PCR para genes de virulencia
 Buscar genes de virulencia en los aislamientos diarreicos de E. coli realizados por
PCR para la amplificación de genes eae , bfp, stx1 y stx2 .
 Se usaron las siguientes cepas como control de la PCR: E. coli DH5α (control
negativo); O157: H7 (control positivo de STEC) y O55: H7 (control positivo de
EPEC).
 Se extrajo el ADN y se midió el tamaño molecular.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
De 516 muestras, un total de 401 aislados fueron identificados como E. coli
PCR positivos para genes :
 eae 23/401
 bfp 16/401
 stx2 3/401
Negativo para:
 gen stx1 (0/401)
 Se detectaron EPEC atípicas 3/10 ordenes:  EPEC típicos se detectaron en 2/10 ordenes:
• Psittaciformes (2/99 aves) • Psittaciformes (11/99 aves)
• Columbiformes (2/72 aves) • Columbiformes (4/72 aves).
• Strigiformes (1/48 aves).
 STEC fue detectado solo en Columbiformes,
presente en 3/72 aves.
 Se analizaron 10 ordenes con 70 aves
 Los resultados de las técnicas moleculares para identificar E.coli diarreogénicos
(EPEC ySTEC)
 Psittaciformes presentan mayor cantidad de aves infectadas por EPEC (loros y
guacamayos)
 Aves en cautiverio en contacto con personas y otros mamíferos.
CONCLUSIÓN
 Presencia de EPEC y STEC en
• Psittaciformes
• Columbiformes
• Strigiformes

 El potencial zoonótico de estas cepas puede investigarse debido al impacto

sanitario en las colecciones de aves del zoológico, que son importantes para la
conservación "in situ" de la especie.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

 1. Chomel BB, Belotto A, Meslin FX. Wildlife exotic pets, and emerging zoonoses. Emerg Infect Dis. 2007;13:1–8.
 2. Ahmed AM, Motoi Y, Sato M, et al. Zoo animals as reservoir of Gram-negative Bacteria harboring integrons and
antimicrobial resistance genes. Applied Envirom Microbiol. 2007, http://dx.doi.org/10.1128/AEM.01054-07.
 3. Davies YM, Cunha MPV, Oliveira MGX, et al. Virulence and antimicrobial resistance of Klebsiella pneumoniae isolated
from passerines and psittacine birds. Avian Pathol. 2016;45:194–201.
 4. Mattes BR, Consiglio SAS, Almeida BZ, et al. Influência da Biosseguranc¸a na colonizac¸ão intestinal por Escherichia
coliem psitacídeos. Arq Inst Biol. 2005;72:13–16.
 5. Cunha MPV, Oliveira MGX, Oliveira MC, et al. Virulence profiles, phylogenetic background and antibiotic resistance of
Escherichia coli isolated from turkeys with airsacculitis. Sci World J. 2014;2014:1–8.
 6. Farooq S, Hussain MA, Bhat MA, Wani SA. Isolation of atypical enteropathogenic Escherichia coli and Shiga toxin 1
and 2f-producing Escherichia coli from avian species in India.Lett Appl Micrbiol. 2009;48:692–697
 7. Gioia Di-Chiacchio RM, Cunha MPV, Sturn RM, et al. Shiga toxin-producing
Escherichia coli (STEC): zoonotic risks associated with psittacine pet birds in home
environment. Vet Microbiol. 2016;184:27–30.
 8. Croxen MA, Law RJ, Scholz R, Keeney KM, Wlodarska M, Finlay BB. Recent
advances in understanding enteric pathogenic Escherichia coli. Clin Microbiol Rev.
2013;26:822–880.
 9. Vieira MAM. Ilhas de Patogenicidade. O Mundo da Saúde. 2009;33:406–414.
 10. Trabulsi LR, Keller R, Gomes TAT. Typical and atypical enteropathogenic
Escherichia coli. Emerg Infect Dis. 2002;8:508–513.
 11. Persad AK, Lejeune JT. Animal reservoirs of Shiga toxin-producing Escherichia coli. Microbiol Spect.
2014;2:1–14. 12. Costa ARF, Lima KVB, Sousa CO, Loureiro ECB. Desenvolvimento de PCR multiplex para a
detecc¸ão e diferenciac¸ão de categorias de Escherichia coli diarreiogênicas. Rev Pan-Amaz Saúde.
2010;1:77–84.
 13. Boom R, Sol CJA, Salimans MMM. Rapid and simple method for purification of nucleic acids. J Clin
Microbiol. 1990;28:453–459.
 14. Kobayashi H, Kanazaki M, Hata E, Kubo M. Prevalence and characteristics of eae-and-stx-positive
strains of Escherichia coli from wild birds in the Immediate Enviroment of Tokyo Bay. Appl Environ
Microbiol. 2009;75:292–295.
 15. Saidenberg ABS, Guedes NMR, Seixas GHF, et al. A survey for Escherichia coli virulence factors in
asymptomatic free-ranging parrots. Int Schol Res Network. 2012;2012:1–6.
 16. Saidenberg ABS, Teixeira RHF, Guedes NMR, Allgayer Melville PA, Benites NR. Molecular detection of
enteropathogenic Escherichia coli in asyntomatic captive psittacines. Pesq Vet Bras. 2012;32:922–926.
 17. Marietto-Gonc¸alves G, Almeida SM, Rodrigues J. Presence of a human diarrheagenic
Escherichia coli clone in captivity kept Psittacidaes. Open Microbiol. 2011;5:72–75.
 18. Xenoulis PG, Gray PL, Brightsmith D, et al. Molecular characterization of the cloacal
microbiota of wild and captive parrots. Vet Microbiol. 2010;146:320–325.
 19. Silva VL, Nicoli JR, Nascimento TC, Diniz CG. Diarrheagenic Escherichia coli strains
recovered from urban pigeons (Columba livia) in Brazil and their antimicrobial susceptibility
patterns. Cur Microbiol. 2009;59: 302–308.
 20. Vázquez B, Esperón F, Neves E, López J, Ballesteros C, Mun˜ oz MJ. Screening for several
potential pathogens in feralpigeons (Columba livia) in Madrid. Acta Vet Scand. 2010;52:1–6.
 21. Sacristán C, Esperón F, Herera-León S, et al. Virulence genes,antibiotic resistance and
integrons in Escherichia coli strainsisolated from synanthropic birds from Spain. Avian
Pathol.2014;43:172–175.