You are on page 1of 26

Kromatografi

• C I P TA A L A I N A
• GUSTI LUH GALIH
• R I YA N H A RYA D I
• Y U R I K E FA D I L L A H
A. Pengertian
Menur ut far makope indonesia IV,
kromatografi didefinisikan sebagai prosedur
pemisahan zat ter lar ut oleh suatu proses
migrasi differensial dinamis dalam sistem
yang terdiri dari dua fase atau lebih , salah
satu diantaranya bergerak secara
ber kesinambungan disebabkan adanya
perbedaan dalam adsorpsi , par tisi ,
kelar utan, tekanan uap, ukuran molekul atau
kerapatan ion.
B. Jenis – jenis kromatografi
Secara praktis, biasanya dibedakan jenis –
jenis kromatografi sebagai berikut :
1 . Kromatografi kolom konvensional ,
kromatografi cairan dengan
mekanisme pemisahan yang beragam .
2 . Kromatografi ker tas (paper
c hroma tography ), tergolong
kromatografi cairan planar dengan
mekanisme pemisahan par tisi yang
dominan
B. Jenis – jenis kromatografi

3 . Kromatografi gas (gas c hroma tography )


4 . Kromatografi cairan kiner ja tinggi (high
performance liquid c hroma tography )
C. Pemerian Etanol 96%
1 . Nama : AETHANOLIUM
2 . Nama latin : etanol
3 . Bm/r m : c2h2-oh
4 . Pemerian : cairan tidak berwar na,
jer nih, m udah menguap, m udah
bergerak, bau khas, rasa panas,
m udah terbakar.
C. Pemerian Etanol 96%
5 . Kelar utan : sangat m udah lar ut
dalam air, dalam klorofor m P dan dalam
eter P.
6 . Penyimpanan : dalam wadah ter tutup
rapat

Dalam praktikum kali ini , etanol yang


digunakan adalah etanol 96%.
D. Pemerian Kloroform

1. Nama r e s m i : c h l o ro fo r n u m
2. Nama lain : k l o ro fo r m
3. R u m u s m o l e k u l : C H C L 3/ 1 1 9 , 3 8
4. Pe m e r i a n : c a ira n , m u d a h m e n gu a p,
t i d a k b e r wa r n a ; b a u k h a s, ra s a m a n is d a n
membakar
5 . Ke l a r u t a n : l a r u t da l a m l eb i h k u ra n g
2 0 0 b a g i a n a i r, m u d a h l a r u t d a l a m e t a n ol
m u t l a k p, d a l a m wa d a h m i nya k a t s i r i d a n
d a l a m m i nya k l e m a k
D. Pemerian Kloroform

6 . Penyimpanan : dalam wadah ter tutup


baik, bersumbat kaca, ter lindung dari
cahaya
7 . Kegunaan : eluen
Prinsip Kromatografi
Prinsip ker ja kromatografi ker tas adalah
pelar ut bergerak lambat pada ker tas,
komponen – komponen bergerak pada
laju yang berbeda dan campuran
dipisahkan berdasar kan pada
perbedaan bercak war na.
E. Alat dan Bahan

1 . Ala t : g . Gunting
a . Gelas ukur 10 ml h . Pensil dan jangkar
b . Kaca ar loji i . Penggaris
c . Plastik wrap j . Benang dan jar um
d . Pipet tetes jahit
e . Baker glass k . Toples bening
f . Ker tas saring l . Spidol war na
E. Alat dan Bahan

2 . Bahan :
a . Klorofor m
b . Etanol 96%
Tujuan

Tujuan dari praktikum ini adalah :


• Menjelaskan prinsip-prinsip dasar
kromatografi ker tas
• Mempraktekkan cara ker ja
kromatografi ker tas menggunakan
spidol war na
• Menjelaskan perbedaan kromatografi
ker tas mendatar dan menaik
F. PROSEDUR KERJA
KROMATOGRAFI MENAIK
F. PROSEDUR KERJA

1 . Siapkan etanol 96% dan spidol war na


berwar na merah, hitam dan bir u.
2 . Siapkan ker tas kromatografi ber ukuran
10x4cm.
3 . Beri lubang pada bagian atas
tepatnya di sebelah tengah ker tas dan
masukkan benang jahit yang telah
diberi simpul.
F. PROSEDUR KERJA
4 . Totolkan spidol sebanyak 3 totol pada
bagian yang ber tuliskan A untuk war na
hitam, B untuk war na bir u dan C untuk
war na merah
5 . Masukkan ker tas ke dalam toples
bening dengan hati – hati, lalu tutup
rapat segera toples tersebut.
6 . Amati hingga war na mencapai garis
akhir.
G. PROSEDUR KERJA
KROMATOGRAFI MENDATAR
G. PROSEDUR KERJA
1 . Siapkan c hloroform dan spidol war na
berwar na merah, hitam dan bir u.
2 . Siapkan ker tas kromatografi
ber ukuran 10x4cm.
3 . Beri lubang dengan jar um jahit pada
tengah ker tas dan masukkan benang
jahit yang telah diberi simpul.
G. PROSEDUR KERJA

4 . Totolkan spidol sebanyak 3 totol pada


bagian yang ber tuliskan A untuk war na
hitam , B untuk war na bir u dan C untuk
war na merah
5 . Letakkan ker tas kromatografi diatasnya
dengan posisi tali menyentuh eluen,
tutup dengan kaca ar loji lainnya
6 . Amati hingga war na mencapai garis
akhir
Warna Noda (naik) Warna Noda (mendatar)
Sampel
1:1 4:1 1:4 1:1 4:1 1:4

• Merah
• Ungu • Merah
bata
tua bara
• Orange • Ungu • Biru
Spidol 1 • Orange • Orange
muda tua muda
(Hitam) pudar pudar
• Biru • Pink • Pink
• Biru • Biru
muda
muda muda

• Biru
• Biru tua
Spidol 2 • Biru • Biru tua • Biru
• Pink
(Biru) muda muda • Pink muda
• Ungu
• Ungu

• Kuning • Pink • Kuning


• Pink
Spidol 3 • Pink muda • Orange • Pink
pudar
(Merah) pudar • Pink • Pink pudar
• Pink
• Pink pudar • Pink
Pembahasan

1 . Kromatografi lapis tipis dilakukan


sebanyak 2 kali, dengan pelar ut pada
percobaan per tama yaitu kromatografi
naik adalah etanol 96% sebanyak 8 ml
dan pada percobaan kedua adalah
klorofor m sebanyak 4 ml.
2 . Pemakaian etanol : klorofor m sebanyak
8 : 4 ml yang berfungsi sebagai pelar ut
non polar. (2)
Pembahasan

3 . Ker tas dibuat dari serat seulosa .


Selulosa mer upakan polimer sederhana
yaitu glukosa. Rantai polimer dari
selulosa memiliki gugus hidroksil (-OH)
disekeliling str uktur nya . Karena memiliki
gugus – OH maka selulosa dapat
berinteraksi sedikit dengan air oleh
karena itu fase diam bersifat sedikit non
polar. (3)
Pembahasan
4. Pa d a saat penotolan sampel dan standar
diusahakan tidak terlalu b a nya k karena
m e m p e n g a r u h i u k u r a n s p o t ya n g t e r b e n t u k p a d a
k e r t a s . S p o t ya n g t e r l a l u b e s a r t i d a k b a i k u n t u k
p e n a m p a k a n n o d a nya k a r e n a n o d a nya d a p a t
m e l e b a r k e s a m p i n g a t a u k e b a wa h . ( 5 )
5. To t o l a n d i u s a h a k a n t i d a k t e r e n d a m d a l a m e l u e n
karena dapat mempengar uhi perambatan noda.
Jika totolan larutan standar dan sampel terendam
d a l a m e l u e n m a k a m e n g h a m b a t j a l a n nya e l u e n
sebagai fase gerak merambat naik ke batas atas
ker tas. (5)
Pembahasan
6. Fa k t or – f a k t or ya n g m e m p e n ga r u h i n o d a
dalam k ro ma t o g ra f i ya n g j u ga
m e m p e n ga r uh i h ar ga R f a d a l a h s e tr u k tu r
kimia dari s enya wa ya n g sedang
d i p i s a h k an , d e ra ja t ke j e n u h an d a n u a p
dalam bejana p e n ge m b a n ga n ya g
d i g u n ak a n , keh a d ira n i on p e n g ga n g g u ,
ke a s a m a n l a r u t an p e n ge m b a n g, j en i s ke r t as
s a r i n g yan g d i g u n a k a n , d ia m e t e r t o t o l a n ,
s u h u , j e n i s p e l a r u t ke p o l a ra n / ke l a r u t a n . ( 5 )
Kesimpulan
1. M e n u r u t f a r m a k o p e i n d o n e s i a I V, k ro m a t o g r a f i
d i d e f i n i s i k a n s eb a ga i p ro s e d u r p e m i s a h a n z a t
t e r l a r u t o l e h s u a t u p ro s e s m i g r a s i d i f f e r e n s i a l
d i n a m i s d a l a m s i s t e m ya n g t e r d i r i d a r i d u a
f a s e a t a u l eb i h , s a l a h s a t u d i a n t a r a nya
b e r ge r a k secara b e r ke s i n a m b u n ga n
d i s eb a b k a n a d a nya perbedaan dalam
a d s o r p s i , p a r t i s i , ke l a r u t a n , t e k a n a n u a p,
u k u r a n m o l e k u l a t a u ke r a p a t a n i o n . ( 3 )
2. Pe m a k a i a n e t a n o l : k l o ro fo r m s eb a nya k 8 : 4
m l ya n g b e r f u n g s i s eb a ga i p e l a r u t n o n
p o l a r. ( 2 )
Kesimpulan
3. B e r d a s a r k a n h a s i l d a r i p e r b a n d i n ga n t a b e l ,
p e n o t o l a n ya n g d i l a k u k a n m e m p e n ga r u h i h a s i l
p r a k t i k u m d a r i k ro m a t o g r a f i i t u s e n d i r i .
4. F a k t o r – f a k t o r ya n g m e m p e n ga r u h i n o d a
d a l a m k ro m a t o g r a f i ya n g j u ga m e m p e n ga r u h i
h a r ga R f a d a l a h s e t r u k t u r k i m i a d a r i s e nya wa
ya n g s e d a n g d i p i s a h k a n , d e r a j a t ke j e n u h a n
d a n u a p d a l a m b e j a n a p e n ge m b a n ga n ya g
digunakan, ke h a d i r a n ion p e n g ga n g g u ,
ke a s a m a n l a r u t a n p e n ge m b a n g , j e n i s ke r t a s
s a r i n g ya n g d i g u n a k a n , d i a m e t e r t o t o l a n , s u h u ,
j e n i s p e l a r u t ke p o l a r a n / ke l a r u t a n . ( 4 )
Daftar Pustaka
1. Anonim. 1979. Far makope Indonesia Edisi III.
Departemen Kesehatan RI. hal 151 dan hal.65
2. Alimin, Dkk. 2007. Kimia Analitik. Alaudin Press.
3. E l i ya n o o r, b e n b a s ya r. 2 0 1 7 . F i t o k i m i a . D e p a r t e m e n
kesehatan RI. Jakar ta. Hal. 177 – 183.
4. K h o p k a r, S . M . 2 0 1 0 . D a s a r – D a s a r K i m i a A n a l i t i k .
Jakar ta : UI-Press.
5. P u t r a E f f e n dy. 2 0 0 4 . K r o m a t o g r a f i C a i r K i n e r j a
Tinggi Dalam Bidang Farmasi.
H t t p : / / E f f e n dy p u t r a / k r o m a t o g r a f i c a i r / a c . i d . h t m l
(diunduh pada 15 Desember 2018 Pukul 12.20
WIB)