"IMPORTANCIA DE LA CLOROFILA Y SU

IDENTIFICACIÓN CROMATOGRAFICA"
Las plantas verdes y algunos microorganismos que abundan en la superficie terrestre
llevan a cabo un proceso llamado fotosíntesis, por el cual, mediante la energía solar,
transforman el bióxido de carbono en carbohidratos como la glucosa y su polímero el
almidón, que son compuestos con alto contenido en energía química y, por ello, estos
seres vivos son productores primarios de los ecosistemas. La glucosa formada es utilizada
por ellos mismos y por otros seres vivos durante el proceso de respiración, en el cual se
oxida hasta CO2 y H2O, obteniendo así la energía necesaria para llevar a cabo sus
diversas funciones.
La mayoría de las plantas realizan el proceso de la fotosíntesis, algunos como de los
pigmentos rojos pardos y entre otros que no realizan este proceso...
Las clorofilas son los pigmentos responsables del color verde de las
plantas, los cuales se localizan junto a los carotenoides en los
plastidios. Las clorofilas son moléculas fotorreceptoras que transforman
la energía lumínica en energía química.
Están constituidas, básicamente, por cuatro anillos pirrólicos
sustituidos, y se hallan coordinados con un ion magnesio, siendo una
molécula planar. En la naturaleza se encuentran comúnmente dos tipos
de clorofilas, a y b; la clorofila a contiene un grupo metilo en el carbono
3, mientras que la b posee un grupo formilo las demás clorofilas (c, d, e)
se encuentran únicamente en algas, junto a la clorofila a. A estas
moléculas se encuentra unido un alcohol isoprenoide monoinsaturado
de 20 átomos de carbono, denominado fitol, el cual le confiere el
carácter hidrofóbico a esta molécula.
En 1906, el botánico Ruso M. Tswett realizó un experimento que condujo al
descubrimiento de lo que hoy conocemos como cromatografía. Colocó un extracto de
pigmentos vegetales en la parte superior de una columna de vidrio rellena de
carbonato de calcio (CaCO3). Al agregar éter, observó que la mezcla original se
separaba en diversas bandas coloridas que descendían a través de la columna a
diferentes velocidades.
Un rasgo característico de la cromatografía es la presencia de dos fases; dispuestas de
tal manera que mientras una permanece estacionaria dentro del sistema (fase
estacionaria), la otra se desplaza a lo largo de él (fase móvil). La clave de la separación
en cromatografía es que la velocidad con la que se mueve cada sustancia depende de
su afinidad relativa por ambas fases (equilibrio de distribución).
En el experimento de Tswett, la separación de los pigmentos vegetales se
logró gracias a que cada uno de ellos tenía una afinidad diferente por las fases.
La fase móvil es un disolvente o mezcla de disolventes y la fase
estacionaria un sólido que interactúa con las sustancias que se
desea separar (cromatografía líquido-sólido), o bien un líquido
inmiscible con la fase móvil, depositado en la superficie de un sólido
(cromatografía líquido-líquido).

La cromatografía liquida es un método de análisis

que permite separar mezclas en sus componentes
individuales, utilizando como fase móvil un
liquido(eluyente)
 En este caso la fase móvil es un gas inerte (helio o nitrógeno) y la fase
estacionaria es un sólido (cromatografía gas-sólido) o un líquido “sostenido” por
un sólido inerte (cromatografía gas-líquido).
Este tipo de cromatografía siempre es en columna, ya que es la única manera de
que la fase móvil gaseosa se mantenga fluyendo, confinada dentro del sistema.
La columna puede estar rellena con la fase estacionaria, en forma semejante a
la cromatografía líquida, o bien la fase estacionaria puede depositarse sobre las
paredes de un tubo muy delgado (0.25mm de diámetro) y largo (hasta 100m).
Este tipo de columnas se conocen como columnas capilares y proporcionan la
mayor capacidad de separación. De acuerdo con el mecanismo de retención, la
cromatografía se puede clasificar en los siguientes tipos:
• adsorción (normal, de fase reversa)
• partición líquido-líquido
• intercambio iónico
• permeación sobre gel
• de afinidad
El proceso fotosintético puede separarse en
dos reacciones: luminosa y oscura.

Luminosa:
La energía luminosa, fotones, son capturados por las moléculas de clorofila presente
en los cloroplastos (otros pigmentos, como carotenoides y xantofilas también pueden
absorber energía) y transferida a los fotosistemas. El flujo de electrones, a través de
los fotosistemas I y II da como resultado la formación de ATP y NADPH necesarias
para la asimilación de CO2.
Estos electrones, que llegan al fotosistema II dividen la molécula de agua y se
produce oxígeno molecular, como producto de esta reacción.
 Oscura:
La fase oscura, biosintética o asimilatoria de la fotosíntesis son un conjunto de
reacciones independientes de la luz (mal llamadas reacciones oscuras porque
pueden ocurrir tanto de día como de noche) que convierten el dióxido de carbono
y otros compuestos en glucosa. Estas reacciones, a diferencia de las reacciones
lumínicas (fase luminosa o fase clara), no requieren la luz para producirse (de ahí
el nombre de reacciones oscuras). Estas reacciones toman los productos de la
fase luminosa (principalmente el ATP y NADPH) y realizan más procesos químicos
sobre ellos. Las reacciones oscuras son dos: la fijación del carbono y el Ciclo de
Calvin.
PROYECTO: Separación de pigmentos vegetales por
cromatografía

MATERIALES:
 Papel filtro o comotografico
 Vaso
 Bagueta
 Mortero
 Placa Petri
 Alcohol
 Remolacha
EXPERIENCIA 1:
 Lavar la remolacha , realizamos el picado de la remolacha en pequeños
trozos y
Ponerlas en el mortero , junto con el alcohol .
 Triturar la mezcla , y el disolvente adquiera un color morado
intenso
 Filtrar con un embudo
 Colocar el filtrado en una placa Petri, sobre ella pon un rectángulo de
unos 15 centímetros de ancho por 10 centímetros de alto doblado en
v(montaje) para que se mantenga en pie sobre la placa Petri
 Dejar la muestra como el montaje y esperar unas horas. Pigmentos se
irán separando según su absorción
 Al absorber el papel donde hemos hecho la
cromatografía, vemos cuatro bandas o zonas que
corresponden a los distintos pigmentos fotosintéticos
presentes en la remolacha