Replicación de ADN

• El proceso de replicación,
autorreplicación, duplicación o
autoduplicación de ADN es el
mecanismo que permite al ADN
duplicarse.
 El origen de replicación
La cantidad de ADN que se puede sintetizar a partir de un único origen
de replicación se denomina replicón o unidad funcional de replicación.
El genoma bacteriano es un replicón único circular. En organismos
eucarióticos, la replicación del ADN se inicia en múltiples orígenes a la
vez (hay uno cada 20 kb aproximadamente), es decir, hay varios
replicones.​
• Esta duplicación del material genético se produce de acuerdo con un
mecanismo semiconservador, lo que indica que los dos polímeros
complementarios del ADN original, al separarse, sirven de molde cada una
para la síntesis de una nueva cadena complementaria de la cadena molde, de
forma que cada nueva doble hélice contiene una de las cadenas del ADN
original.
• Gracias a la complementación entre las bases que forman la secuencia de cada
una de las cadenas, el ADN tiene la importante propiedad de reproducirse
idénticamente, lo que permite que la información genética se transmita de
una célula madre a las células hijas y es la base de la herencia del material
genético.
 ADN Polimerasas
El ADN polimerasa es la enzima que cataliza la síntesis de la nueva cadena de
ADN a partir de desoxirribonucleótidos y de la molécula de ADN plantilla o
molde que es la que será replicada. La enzima copia la cadena de nucleótidos
de forma complementaria (A por T, C por G) para dar a cada célula hija una
copia del ADN durante la replicación.
 Modo de operación
• En cada horquilla de replicación, el ADN polimerasa y otras enzimas sintetizan dos nuevas
cadenas de ADN que son complementarias respecto a las dos cadenas originales. Durante
este proceso, el ADN polimerasa reconoce una base nucleotídica no apareada de la cadena
original y la combina con un nucleótido libre que tiene la base complementaria correcta.

• ADN polimerasa cataliza la formación de nuevos enlaces covalentes que ligan el fosfato del
nucleótido libre entrante con el azúcar del nucleótido previamente agregado en la cadena
hija en crecimiento. De esta forma, el ADN polimerasa sintetiza el esqueleto de azúcar-
fosfato de la cadena hija.

• Los ADN polimerasas también realizan otras funciones durante el proceso de replicación. Además de
participar en la elongación, desempeñan una función correctora y reparadora gracias a su actividad
exonucleasa 3', que les confiere la capacidad de degradar el ADN partiendo de un extremo de éste. Es
importante que existan estos mecanismos de corrección ya que de lo contrario los errores producidos
durante la copia del ADN darían lugar a mutaciones.
Proceso general
• La topoisomerasa relaja la tensión provocada por el
superenrollamiento del ADN al abrirse las dos hebras
• La helicasa rompe los puentes de hidrógeno de la doble hélice,
abriendo las dos hebras, permitiendo el avance de la horquilla
de replicación.
• Las proteínas SSB estabilizan las cadenas abiertas y las
mantienen separadas una de otra.
• El cebador fragmentos de ARN que se unen a la cadena molde
por puentes de hidrógeno para que el ADN polimerasa III
reconozca donde debe unirse para empezar a añadir
nucleótidos.
• El ARN primasa sintetiza el cebador de ARN necesario para la
síntesis de la cadena complementaria a la cadena rezagada.
• El ADN ligasa une los fragmentos de Okazaki.
• Las topoisomerasas son enzimas capaces de actuar sobre la topología del ADN, ya sea
enredándolo para permitir que se almacene de manera más compacta o desenredándolo para
que controle la síntesis de proteínas y para facilitar la replicación del mismo.

• El ADN posee una estructura en forma de doble hélice en la cual dos hebras o cadenas de azúcar
2-desoxiribosa unidas por puentes fosfato se encuentran enrrolladas una sobre la otra, con cuatro
bases, adenina, timina, citosina y guanina apareadas y apiladas en el hueco central de esta hélice
casi como los escalones en una escalera caracol, esta estructura permite conservar de manera
estable el material genético
• La helicasa es una enzima vital en los seres vivos ya que participa en
los procesos de duplicación y reproducción celular de este,
transcripción, recombinación y reparación del ADN, y de biogénesis
de ribosoma. Su misión es romper los puentes de hidrógeno que
unen las bases nitrogenadas, haciendo así posible que otras enzimas
puedan copiar la secuencia del ADN.
• Las proteínas SSB en células procariotas (single-stranded DNA binding proteins o proteínas
ligantes de ADN de cadena sencilla) son un conjunto de proteínas encargadas de la estabilización
de la apertura del ADN de cadena sencilla generada por la acción de las helicasas durante el
proceso de replicación del ADN.
• ​ Estas evitan el auto apareamiento entre las bases complementarias de la cadena, protegiéndola
de la acción de las nucleasas y de asociaciones intracatenarias. Su análoga en células eucariotas
se conocen como RPA (proteins A replications).
• Un partidor, cebador, iniciador o primer es una cadena de ácido nucleico o de una molécula relacionada
que sirve como punto de partida para la replicación del ADN. Es una secuencia corta de ácido nucleico que
contiene un grupo 3'hidroxilo libre que forma pares de bases complementarios a una hebra molde y actúa
como punto de inicio para la adición de nucleótidos con el fin de copiar la hebra molde.
• Se necesita un partidor porque la mayoría de ADN polimerasas, enzimas que catalizan la replicación del ADN,
no pueden empezar a sintetizar una nueva cadena de ADN de la nada, sino que solo pueden añadir
nucléotidos a una hebra preexistente. Se necesitan dos para la reacción de PCR, uno en el extremo 3' y el
otro complementario para la otra hebra. Son de aproximadamente 20 nucleótidos, porque es la cantidad
necesaria para que de manera probable se una a un sitio específico de la cadena de ADN.
La ARN primasa o ARN polimerasa ADN dependiente, es una enzima que sintetiza pequeños
fragmentos de ARN sobre la cadena rezagada en la replicación del DNA, de unos 10 nucleótidos,
conocidos como cebadores, complementarios a la hebra de ADN que se copia durante la
replicación. Estos cebadores son necesarios para que el ADN polimerasa III tenga un punto de
partida.

La primasa tiene la particularidad de no necesitar cebador para comenzar la síntesis de la nueva hebra de ADN.
Estos restos de ARN son luego retirados por la ADN polimerasa I , gracias a su capacidad de exonucleasa
(actividad exonucleasa 5' → 3') y rellenados con fragmentos de ADN también por la ADN Pol I (actividad
polimerasa 5' → 3'). Finalmente todos estos segmentos discontinuos de ADN, llamados fragmentos de Okazaki
son unidos por una ligasa
ADN ligasa es una enzima de tipo ligasa que forma enlaces covalentes entre el
extremo 5’ de una cadena polinucleotídica y el extremo 3’ de otra cadena
polinucleotídica. También se denomina enzima de unión de polinucleótidos.

La reparación por escisión puede ser realizada por 3 enzimas: la correndonucleasa

U.V., iniciadora del proceso, la ADN polimerasa I, que elimina y reconstruye el
fragmento de ADN, y la ADN ligasa, que realiza la unión de los fragmentos nuevos y
antiguos.
En el siguiente paso, el ADN Pol III cataliza la síntesis de las nuevas cadenas añadiendo nucleótidos sobre el
molde.

Esta síntesis se da bidireccionalmente desde cada origen, con dos horquillas de replicación que avanzan en
sentido opuesto.

Cuando el avance de dos horquillas adyacentes las lleva a encontrarse, es decir, cuando dos burbujas se
tocan, se fusionan, y cuando todas se han fusionado todo el cromosoma ha quedado replicado.

Puesto que el ADN Pol III necesita de un extremo 3'-OH libre, es necesario que un ARN primasa catalice la
formación de un fragmento corto específico de ARN llamado cebador, que determinará el punto por donde
la ADN polimerasa comienza a añadir nucleótidos.