ANALISIS

INSTRUMENTAL
 Métodos Analíticos

Métodos químicos por Métodos instrumentales

vía húmeda
Se obtiene una señal:
S  Canalito

Gravimetría Análisis Electroquímicos Separación Opticos

volumétrico

Cromatográfico
Precipitación Titulación Potenciométrico Emisión

Pesada Conductimétrico Absorción

 Métodos Clásicos
 Separación de los componentes de interés de una muestra
(analitos) mediante:
 Precipitación
 Extracción
 Destilación
 Análisis Cualitativos
 Los componentes separados se trataban con reactivos
dando origen a productos que se podían identificar por su
color, punto de ebullición o de fusión, su solubilidad, su
olor, su actividad óptica o su índice de refracción.
 Análisis Cuantitativos
 La cantidad de analito se determinaba mediante medidas
gravimétricas o volumétricas.
Metodos Instrumentales
 Métodos modernos que separan, identifican
y cuantifican diferentes especies químicas (orgánicas,
inorgánicas, bioquímicas, etc.)
 Se basan en fenómenos físicos-químicos conocidos.
Su aplicación ha ido en paralelo al desarrollo de
la electrónica.
 Para el análisis cuali o cuanti se miden las propiedades de los
analitos.
SEÑALES ANALITICAS
 Ej.
Absorción o emisión de luz
Conductividad o potencial de electrodo
Dispersión, rotación, refracción,difracción
 Instrumentos para el Análisis
• Un instrumento para análisis químico debe:
– convertir las señales químicas o físicas almacenadas del analíto,
en información que puede ser manipulada e interpretada por el
ser humano.
• El instrumento es un dispositivo de comunicación entre el sistema
de estudio y el investigador.
• Para obtener información el analíto se estímula con energía
electromagnética, eléctrica, mecánica o nuclear.
Componentes de un Instrumento
– Generador de señales
– Transductor de entrada o detector
– Procesador de señales
– Transductor de salida o dispositivo de lectura
DIAGRAMA OPTICO DEL FLUOROMETRO
La selección de un método analítico
• Definición del Problema
- De cuánta muestra se dispone
- Qué componentes de la muestra interferirán
- Cuáles son las propiedades físicas y químicas de la matriz de la
muestra
- Cuántas muestras deben analizarse

- Parámetros de Calidad
- Exactitud y Precisión
- Sensibilidad Y Selectividad
- Límite de detección e intervalo de concentración
Selección de un Método Analítico
• Otras características a tener en cuenta en la
elección del método
1. Velocidad
2. Facilidad y comodidad
3. Habilidad del operador
4. Coste y disponibilidad de equipo
5. Coste por muestra
 Precisión
• Grado de concordancia entre
los datos que se obtienen de
una misma forma.
• Mide el error aleatorio o
indeterminado de un análisis.
Ej.
% Hum.
Vibraciones
Cambio T o
Sus parámetros de calidad son
Desv. est. media, absoluta,
relativa, CV y varianza
Precisión
 Repetitividad
Precisión determinada cuando las mediciones se realizan en
condiciones repetibles, es decir: el mismo método, mismo
material, mismo operador, mismo laboratorio; período de
tiempo limitado.

 Reproducibilidad
Precisión determinada cuando las mediciones se realizan en
condiciones reproducibles, es decir: el mismo método;
diferentes operadores; diferentes laboratorios, diferentes
equipos y un largo período de tiempo.
Exactitud
 Mide el error sistemático, o determinado de un método analítico.
 Se define por la ecuación:  = u – xt
 es la media de la población para la concentración del analito en
una muestra cuya concentración verdadera es xt
La exactitud se determina analizando estándares de referencia.
Ej. Mala calibración, equipo dañado (causas defindias)

Precision and Accuracy

–
Precision Precision+ Precision– Precision+
Accuracy – Accuracy – Accuracy + Accuracy +

Fundamentals of modern UV-visible spectroscopy

Figure : 71
Sensibilidad
 Capacidad de un método o instrumento de diferenciar
pequeñas diferencias en la concentración de los analitos
 La IUPAC, define la sensibilidad como:
La pendiente de la curva de calibración a la [ ] de
interés
 Depende de:
La pendiente de la curva de calibración y
Reproducibilidad o precisión del sistema de medición
 Para dos métodos con igual precisión,
el que presente la mayor pendiente en la curva de
calibración será el más sensible
  Sensibilidad de Calibración: Pendiente de la
curva de calibración a la concentración de interés.

S  mc  Sbl
La sensibilidad de calibración tiene el inconveniente
de no tomar en cuenta la precisión. Por ello, Mandel
y Stiehler proponen la Sensibilidad analítica γ:

  m / ss
Es insensible a los factores de amplificación e
independiente a las unidades en que miden S.
Límite de detección
 Concentración o peso mínimo de analito que puede
detectarse para un nivel de confianza dado.
 Cuando nos aproximamos al límite de detección, la señal
analítica se aproxima a la señal del blanco Sbl.
 La mínima señal analítica distinguible Sm se toma como la
suma de la señal medida del blanco Sbl más un múltiplo k de la
desviación estándar del mismo.

Sm  Sbl  ksbl
Los valores obtenidos se utilizan para calcular
el límite de detección cm

Sm  Sbl
cm 
m

El limite inferior se estima como 10 x Ss

cuando la concentración del analito es cero

Según Kaiser, estadísticamente se considera

que para k=3, el nivel de confianza es 95%.
Límite de cuantificación
 Concentración o peso mínimo de analito que puede
cuantificarse para un nivel de confianza dado.
 La mínima señal analítica cuantificable Sc se toma como la
suma de la señal medida del blanco Sbl más un múltiplo k=10
de la desviación estándar

S q  Sbl  10sbl
S q  Sbl
LOQ 
m
 • Intervalo de [ ] en que es aplicable un método analítico

Rango Lineal
o Dinámico

LINEALIDAD: Capacidad del método de producir resultados

directamente proporcionales a la [ ] del analito en la muestra.

ROBUSTEZ: Capacidad del método para no ser afectado por

pequeños cambios deliberados en sus parámetros y provee
una indicación de su confiabilidad durante su uso normal.
LINEALIDAD
Capacidad del método de producir
resultados que son directamente
proporcionales a la [ ] del analito en
la muestra.

ROBUSTEZ
Capacidad del método para no ser
afectado por pequeños cambios
deliberados en sus parámetros y
provee una indicación de su
confiabilidad durante su uso normal.
Selectividad
 Grado de ausencia de interferencias debidas a otras
especies contenidas en la matriz de la muestra.
 El coeficiente de selectividad de B con respecto a A se
define como:
kB,A = mA/mB
Da la respuesta relativa del método para la especie B cuando
se compara con A
Los coeficientes de selectividad pueden variar desde 0 (no hay
interferencia) hasta valores superiores a uno.
 Calibración de los métodos
Instrumentales
 ISO (International Estándar Office)
Define la calibración como:
El conjunto de operaciones que permiten
establecer en determinadas condiciones
experimentales, la relación existente entre
los valores indicados por el instrumento con
los valores obtenidos con la medida de un
valor conocido.

Curvas de calibración
􀂄 Método de las adiciones estándar
􀂄 Método del estándar interno.
 Curva de calibración
• Se utilizan estándares de concentraciones conocidas del analito de
interés.
• Se requiere un blanco que contenga los componentes de la muestra
original excepto el analito
• Se obtiene una gráfica (recta) de respuesta del instrumento vs
concentración del analito.
• Método de mínimos
cuadrados.
Método de las Adiciones Estándar

 Se utiliza en muestras
complejas donde los efectos de
matriz son importantes.
 Implica añadir uno o mas
incrementos de una solución
estándar a una alícuota de
muestra
 El valor del volumen en la
intersección de la línea recta
con el eje-x es el volumen del
reactivo estándar equivalente a
la cantidad de analito en la
muestra.
Método del Estándar Interno
• Se adiciona a todas las muestras el EI en una cantidad
constante.
• La calibración representa la razón entre la señal del analito y la
del estándar interno como una función de la concentración del
analito
• El EI compensa distintos tipos de errores indeterminados y
sistemáticos.
• Si el EI y analito responden proporcionalmente a los errores
instrumentales y fluctuaciones del método, la razón entre las
señales es independiente de las fluctuaciones
Señales y Ruido
 Cada medida analítica lleva
dos componentes:

La que lleva la información

del analito de interes
La que tiene información
ajena, no deseada: el ruido

Definición de la relación señal/ruido (S/N)

S media..de..la..medida x
 
N desviación..estándar..de..la..media s
 La detección de una señal
mediante un sistema visual
resulta imposible cuando la
relación señal/ruido es < 2 o
3
Fuentes de ruido
 Ruido químico
- Fluctuaciones en la humedad de la muestra
- Estratificaciones en un sólido o polvo
- Cambios en la intensidad de la luz que afectan sustancias
fotosensibles
- Cambios de presión o temperatura que afectan el
equilibrio (ej. humos)
 Ruido instrumental
Se asocia a cada componente del instrumento: fuente,
transductor de entrada o transductor de salida

Puede ser de distinto tipo y provenir de distintas

fuentes
 tipos de ruido instrumental:
1)Ruido térmico (o Johnson)
2)Ruido de disparo
3)Ruido de parpadeo (o 1/f)
4)Ruido ambiental
 Ruido térmico, o ruido Johnson
Se debe a la agitación térmica de los electrones u otros
portadores de carga
Dicha agitación o movimiento origina periódicamente
heterogeneidades de carga que a su vez crean
variaciones de voltaje

 Ruido de disparo:
Se origina siempre que exista una corriente que produzca
un movimiento de electrones o de otras partículas
cargadas a través de una unión 8p y n o el vacío para un
tubo de vacío.

Puede minimizarse reduciendo el ancho de banda de las

frecuencias.
 Ruido de parpadeo
- Sus causas no se comprenden bien.
- Su valor es inversamente proporcional a la frecuencia de
la señal que se observa.
Ruido 1/f
- Significativo para frecuencias < 100 Hz

 Ruido ambiental
Proviene del entorno; cada conductor de un instrumento es
una antena potencial que capta radiación
electromagnética y la convierte en señal eléctrica.
Aumento de la relación S/N
 Puede mejorarse por hardware o software

Hardware: incorpora al diseño del instrumento filtros,

cortadores, escudos, moduladores, detectores sincrónicos

Software: se basan en distintos algoritmos digitales de

ordenador que permiten extraer las señales de entornos
ruidosos
 Métodos de hardware
- Conexión a tierra o blindaje
- Amplificadores diferenciales
- Filtrado analógico
- Modulación
- Corte de la señal (amplificadores de corte)
- Amplificadores de cierre
Métodos de software
- Promediado conjunto
- Promediado por grupos (box car)
- Filtrado digital
- Métodos de correlación
- Transformadas de Fourier