HOSPITAL VICTOR LAZARTE

ECHEGARAY

DEPARTAMENTO DE
PATOLOGÍA CLÍNICA

REACTANTES DE
FASE AGUDA
M.R. LESLY TACANGA ESPINOZA
 REACCIÓN DE FASE AGUDA

 “Conjunto de cambios de diversos órganos y

sistemas, inespecíficos, secundarios a la
liberación de mediadores inflamatorios,
dentro del proceso de reacción ante la
agresión celular”
 Infección
Inflamación
REACCIÓN DE FASE AGUDA
Daño tisular:
Traumatismo

Liberación de
mediadores
y amplificación de
la respuesta
IL-1, IL-6
TNF-alfa

En el hígado se sintetizan proteínas de fase:

Albúmina, transferrina,
prealbúmina y proteína transportadora de retinol.
Se alteran las propiedades físico-químicas del plasma:
aumenta la VSG

Aumento de
reactantes de fase aguda
y VSG
 REACTANTES DE FASE AGUDA

 Son proteínas especificas producidas en el hígado o

secretadas por leucocitos ante infecciones,
traumatismos e inflamación .
 El estimulo procede de citocinas como : IL-1, 3, 6 o
FNT alfa
 La mayor parte no son especificas de las infecciones
son muy utilizadas en el DG precoz.
 Las mas utilizadas son : PCR, VSG, PCT,
 REACTANTES DE FASE AGUDA

 Su concentración aumenta (RFA +) o disminuye (RFA-) al

menos un 25% durante los procesos inflamatorios”
ACCIONES:
 Median la reacción inflamatoria
 Activación del sistema de complemento
 Inhibición de proteasas
 Opsonización
 Depuración de restos celulares y moléculas liberadas en
el foco inflamatorio
 Inmunomoduladora
 Actividad antioxidante
UTILIDAD:
 Detectar la presencia de daño y la respuesta
inflamatoria
 Evaluar la magnitud de la respuesta
inflamatoria
 Monitorizar el tratamiento
 CRITERIOS DE UN RFA IDEAL

 Dependencia exclusiva de la reacción inflamatoria

 Debe ser independiente de la etiología clínica
 Debe tener cinética rápida
 Ha de aumentar significativamente en el curso de
una reacción inflamatoria.
 Debe poder dosificarse por un procedimiento
rápido y preciso
 RFA positivos RFA negativos

• Proteína C reactiva, • Albúmina, Pre

Proteína sérica albúmina,
amiloide A, apolopoproteína,
haptoglobina, alfa-1- A1, Transferrina,
antitripsina, fibronectina
antiquimiotripsina,
Ceruplasmina,
fibrinógeno, factores
del complemento
 VSG
Se define como la velocidad, expresada en mm.
con la que los eritrocitos se precipitan en una hora
en muestra de sangre no coagulada
Se 48 hrs despues de un
proceso inflamatorio y se
normaliza 10 despues de
normalizarse.

VN hasta 50 años 0 a

15mm/h y 0 -20 en mujeres Velocidad de agregación de
los eritrocitos
Mayores de 50 años se
divide la edad entre 2.

Es la prueba de screening para diferentes Su se debe a cambios

morfologicos en globulos rojos como
entidades inflamatorias. De gran utilidad para
anemia de celulas falciformes,
diferenciar procesos inflamatorios de los no hemoglobinopatias, por alt. De
inflamatorios proteinas plasmaticas
 tener en cuenta que los VN no descartan el diagnostico de AR,Lupus, enfermedad
muscular inflamatoria o cualquier otra enfermedad reumática.
 Además de esto los valores suelen ser normales en entidades como la fibromialgia y
osteoartrosis degenerativa y altos en otras entidades como la obesidad
 Se relaciona directamente con la
tendencia de los glóbulos rojos
hacia la formación de acúmulos
así como concentración
eritrocitaria y la concentración
plasmática de proteínas
(globulinas y fibrinógeno).
 METODOS

Westergren Wintrobe Automatizado

Pipetas de Westergren de vidrio VES MATIC
Pipetas de Wintrobe
de 200 mm Sangre venosa en tubo con
Sangre con EDTA
Sangre con citrato de sodio al 3.8 citrato (1/4): tubo de tapa
% negra.

Parece ser que este método es

menos sensible a pequeñas
variaciones de los factores que
aumentan la VSG por ello no detecta
con tanta exactitud las pequeñas
variaciones que se producen en
personas sanas
a. Cargar una pipeta de Westergreen y en el momento de
llegar a la marca 0, poner en marcha el cronómetro.
Asegurarse que la pipeta esta en una posición de 90 º
respecto la superficie, exenta de vibraciones o cualquier
factor que modifique la VSG.
b. Transcurridos 60 minutos exactos, leer la sedimentación
eritrocitaria, que se expresa en mm/hora y comparar los
resultados obtenidos con los resultados normales.
Después del método de Westergren es el más conocido. Tiene la ventaja de
que es más sensible a pequeñas variaciones para valores normales pero es
menos reproductible para valores patológicos. Asimismo, una vez realizada
la VSG en el mismo tubo puede realizarse el hematocrito.
 VSG AUTOMATIZADO – VES
MATIC
 Es un analizador de mesa diseñado para
determinar la VSG mediante un sensor
optoelectrónico que mide el cambio en la
opacidad de una columna de sangre a
medida que va se produce la sedimentación
Los tubos se colocan en forma directa, se
logra la aceleración de la sedimentación
colocando los tubos en un ángulo de 18°
con respecto al eje vertical. En 20 min se
obtienen resultados comparables con los
obtenidos con el método de referencia.
 Menos sensible Mas sensible

Wintrobe, disponible
Westergreen
en nuestro medio
No se modifica con los niveles de hemoglobina

VALORES NORMALES
 Hombres : 0-15 mm
 Mujeres : 0-20 mm
 Aumenta con la edad, menstruación, embarazo, lactancia.
Se modifica con alteraciones hemáticas, presencia de Ig o
aumento de fibrinógeno.
 PROTEINA C REACTIVA
(PCR)
 Es el marcador mas útil como RFA.
 Se utiliza como método directo para la
estimación de la respuesta inflamatoria aguda.
 Glucoproteina no presente normalmente en el
suero
 Aumenta en respuesta inflamatoria aguda
incluyendo infecciones víricas y bacterianas
localizadas

 VALORES NORMALES:
< 10 mg/ dl : ausencia de inflamación
 PROTEINA C REACTIVA
De
diferente

PCR Sintetizada en el
hígado , como
origen

respuesta IL6.
Normalmente
 Responde más rápido pequeñas cantidades Establecer la
a las alteraciones
en sangre severidad y la
inflamatorias (6 a 8 hr) magnitud del
y pico 48 hrs compromiso
 Se eleva antes que la inflamatorio.
Por Turbidimetria VN
VSG
de 0.6mg/dl hasta
 Suele ser el mejor 1mg/dl.
marcador temprano De 1ª 10mg/dl
de los procesos moderadamente
inflamatorios. (IAM) 10 muy elevada
 VN
PCR
Elevación menor a
PCR 1mg/dl
<10mg Ejercicio, resfriado,
/dl embarazo, gingivitis
2-3 d EVC, convulsión, angina
1-10 mg/dl
fosfolípidos 18h
IAM, Neoplasia,
PCR pancreatitis, Infección
de mucosas,
ADN enfermedad reumática
Más de 10 mg/dl
Infección, traumatismo,
vasculitis
Enfermedades Reumaticas con PCR elevada
Fiebre reumatica Ar. Reactiva DISCREPANCIAS DE LA
VSG Y PCR
Artritis reumatoide LES (infeccion,
Sind. Sjogren, LES y
Artritis Idiopatica serositis, sinovitis)
purpura
juvenil Gota
hipergammaglobulinemica
Ar. Psoriasica Polimialgia
puede tener PCR normal y
Espondilitis Granulomatosis de
la VSG muy elevada
anquilosante Wegener
PROTEINA C REACTIVA
(PCR)
VALORES DE REFERENCIA
10 – 50 mg / dl INFLAMACION LEVE O
INFECCION VIRAL

50 – 200 mg / dl INFLAMACION ACTIVA O

INFECCION BACTERIANA

>200 mg / dl INFECCION SEVERA O

TRAUMA

< 3 – 5 mg / dl ESTRATIFICACION DE
RIESGO CARDIO
VASCULAR
 PROTEINA C REACTIVA
(PCR)
UTILIDAD
 INDICADOR PRECOZ DE INFLAMACION: incluso antes que la
clínica. Se eleva a las 3 horas

 Post cirugía, niveles elevados tras 2 días suele indicar

complicación quirúrgica

 En fase precoz postransplante sino existe infección indica

rechazo

 Su disminución indica buena respuesta al tratamiento

 Interés como marcador de riesgo cardiovascular.

 Indicador de necrosis tisular (apendicitis, colecistitis)

 FUNDAMENTO
La PCR-Látex es una técnica de
aglutinación en porta para la
detección cualitativa y Suero fresco.
semicuantitativa de PCR en
suero humano. Las partículas de
látex recubiertas con anticuerpos
anti-PCR humana son
aglutinadas por moléculas de
PCR presentes en la muestra del
paciente.
MATERIALES
MUESTRA
1. Depositar 50 μL de la muestra y una
gota de cada uno de los controles
Estable 8 días a Positivo y Negativo, sobre círculos
2-8ºC o 3 meses distintos de un porta.
a -20ºC. 2.Homogeneizar suavemente el reactivo
de PCR- látex antes de usar. Depositar
una gota (50 μL) junto a Cada una de las
gotas anteriores.
3. Mezclar las gotas con un palillo,
procurando extender la mezcla por toda
la superficie interior del círculo. Emplear
palillos distintos para cada muestra
4.Situar el porta sobre un agitador
rotatorio a 80 – 100 r.p.m. y agitar
durante 2 minutos. El exceso de tiempo
puede originar la aparición de falsos
positivos.
1.Realizar diluciones dobles de la muestra en
solución salina 9 g/L.
2.Proceder para cada dilución, como en la
prueba cualitativa.
LECTURA E INTERPRETACION
Examinar macroscópicamente la presencia o ausencia de
aglutinación inmediatamente después de retirar el porta del
agitador. La presencia de aglutinación indica
una concentración de PCR igual o superior a 6
mg/L
En el método semicuantitativo, se define el título como la
dilución mayor que da resultado positivo.
 FIBRINOGENO
 Es una glicoproteína presente en el plasma, sintetizada por
las células del parénquima hepático, que participa en la
hemostasia, específicamente estabilizando la agregación
de las plaquetas activadas, y como precursor del coágulo
de fibrina.
 Concentración normal es de 200-400 mg/dl y concentración
mínima requerida para una hemostasia eficiente es de 60-
100 mg/dl.
 • hay una severa disminución de la síntesis hepática
de fibrinógeno, con niveles plasmáticos
Afibrinogenemia prácticamente indetectables, la cual origina una
diátesis hemorrágica, con tiempos de coagulación
prolongados y función plaquetaria anormal

• los niveles circulantes de fibrinógeno, muestran una

Hipofibrinogenemia reducción leve a moderada y los pacientes pueden
estar asintomáticos o tener problemas hemorrágicos

• existe una función anormal del fibrinógeno, existiendo

Disfibrinogenemia discrepancia con la medición de este.
 METODO DE CLAUS
 Mide el tiempo de coagulación de un plasma diluido al agregarle una
cantidad estandarizada de trombina, lo que quiere decir que posee una
concentración baja en fibrinógeno que actúa como sustrato, y una alta
concentración de trombina, esto lo hace muy sensible a cambios en la
concentración de fibrinógeno, pero relativamente insensible a los
cambios de concentración de trombina, siendo entonces los tiempos de
coagulación inversamente proporcional a la concentración de
fibrinógeno.

El tiempo de formación del coagulo es inversamente proporcional a

la concentración de Fibrinógeno presente en la muestra de plasma
 PROCEDIMIENTO
CURVA DE CALIBRACION
1- Preparar diluciones del Calibrador 1:5, 1:10, 1:15, 1:20, 1:30, empleando 0,1 ml
del Calibrador reconstituido y 0,4; 0,9; 1,4; 1,9 y 2,9 ml de Reactivo B
respectivamente.
El Calibrador diluido 1:10 representa el 100% del valor asignado en el envase.
2- Precalentar 0,2 ml de cada dilución a 37 C durante 2 minutos.
3- Disparar el cronómetro con el agregado de 0,1 ml de Reactivo A reconstituido
(no precalentar el Reactivo A) a las diluciones preincubadas y registrar el tiempo
de formación del coágulo.
4- Calcular el tiempo promedio de coagulación para cada dilución, por duplicado.
5- Construir la curva de calibración de fibrinógeno representando los tiempos de
coagulación en función de la concentración de fibrinógeno, sobre el papel log-log.
Unir a través de una recta la mayoría de los puntos representados. La recta final
debe contener por lo menos 3 puntos consecutivos.
 PROCEDIMIENTO
El valor de fibrinógeno de cada dilución de la curva se determina multiplicando la concentración de
fibrinógeno en el Calibrador por el factor de dilución. Por ejemplo, si en el Calibrador se indica un nivel de
fibrinógeno de 260 mg/dl, entonces las diluciones 1:5, 1:10, 1:15, 1:20 y 1:30 tienen 520, 260, 173, 130 y
87 mg/dl respectivamente.
II- MUESTRAS DE PACIENTES Y CONTROLES
1- Preparar diluciones 1:10 de los plasmas de pacientes o plasmas controles en Reactivo B.
2- Precalentar 0,2 ml de cada dilución a 37º C durante 2 minutos.
3- Rápidamente adicionar 0,1 ml de Reactivo A y registrar el tiempo de formación del coágulo.
4- Repetir la determinación y promediar el resultado para cada muestra.
 MÉTODO AUTOMATIZADO
 Método magnético-fotooptico
 Método Derivado del Tiempo de Protrombina (dPT), este
no mide directamente la concentración de fibrinógeno, pero
la calcula a través de una curva de coagulación a partir del
PT en el coagulómetro, esta determinación la realiza
midiendo la diferencia de la luz dispersada al final de la
reacción y antes de la transformación de fibrinógeno en
fibrina, esto proporciona los valores de la curva de
calibración que son correlativos con la cantidad de
fibrinógeno presente en la muestra.
 VALOR DE REFERENCIA:
200-400 mg/dl

 Así también existe el método de calor en un tubo

de Wintrobe, el cual tiene como fundamento la
precipitación de roteinas a temperatura, dejando al
fibrinógeno como proteína remanente. Se incuba a
56°C por 15 min, luego se centrifuga por 10 min, y
se hace la lectura.
0.01 mm  120 mg/dl
0.02 mm 180 mg/dl
0.03 mm 240 mg/dl
0.04 mm 300 mg/dl TABLA DE CONVERSIÓN
0.05 mm 370 mg/dl
0.06 mm 430 mg/dl
0.07 mm 500 mg/dl
0.08 mm 560 mg/dl
GRACIAS