MVZ.

BORIS ALAIN DUEÑAS

FERNANDEZ
 La Fisiología microbiana comprende el
estudio de las funciones realizadas por los
microorganismos.
 La función fundamental de todo ser vivo es el
crecimiento, esto es aumentar en forma
ordenada el número y la masa de todos sus
componentes celulares, tales como pared
celular, membrana citoplasmática, ácidos
nucleicos (ADN y ARN), flagelos, fimbrias,
entre otros. Estas estructuras celulares están
compuestas fundamentalmente de
macromoléculas: proteínas, polisacáridos,
lípidos y ácidos nucleicos.
FISIOLOGIA BACTERIANA
 Comprende el estudio de las funciones realizadas
por los microorganismos.
 Las bacterias son muy eficientes fisiológicamente,
sintetizan rápidamente sus componentes
estructurales, siendo la mayoría autosuficientes a
pesar de ser organismos estructuralmente muy
simples.
 La bacteria incorpora los nutrientes desde su
entorno. Luego a través del metabolismo
bacteriano, la célula es capaz de reproducirse y
transmitir su material genético a la progenie
 Bacterias de vida libre: son las que se han
adaptado a vivir libremente en la tierra y el
agua. Tienen requerimientos más simples y
vías metabólicas más complejas que las
bacterias que viven en superficies de tejidos
animales.
 Bacterias relacionadas a los animales: en
general requieren compuestos nutritivos
más complejos (aminoácidos, vitaminas,
etc) y carecen de varias enzimas o vías
metabólicas por lo que generalmente son
parásitas.
CULTIVO:
 Es el proceso de multiplicar
microorganismos creando condiciones
ambientales adecuadas.
 Se debe tener en cuenta:
 Nutrimentos necesarios
 pH
 Temperatura
 Aereación
 Concentración de sales
 Potencial iónico del medio
REQUERIMIENTOS PARA EL
CRECIMIENTO
 La mayor parte de la estructura es a base de:
 Carbono
 Hidrogeno
 Nitrógeno
 Oxigeno
 Fosforo
 Azufre
 Iones: Na, K, Fe, Mg, Ca, Cl
 Las macromoléculas junto a los iones son
requeridos para la producción de energía y la
catálisis, además de una fuente de energía que
permita la síntesis macromolecular.
Nutrición Microbiana

• Las células están compuestas de:

1. Macromoléculas: polisacáridos,
lípidos, ácidos nucleicos y
proteínas (Las proteínas son las mas
abundantes).
2. Agua.
El agua es el solvente ideal para los
organismos vivos debido a su polaridad y
a su cohesión
Nutrición

• Los microorganismos requieren para su

desarrollo y actividad celular compuestos
químicos: nutrientes.
• Dependiendo de las cantidades que se
requieran se habla de macronutrientes y
micronutrientes.
• Existen diferencias en cuanto a los
requerimientos nutricionales de cada
microorganismo.
Nutrientes

• MACRO • MICRO
• Carbono. • Cromo
• Nitrogeno. • Cobalto
• Fosforo. • Cobre
• Azufre • Manganeso
• Potasio • Molibdeno
• Magnesio • Niquel
• Sodio • Selenio
• Calcio • Tungsteno
• Hierro • Vanadio y Zinc.
Factores de crecimiento

• Se requieren en muy pocas cantidades y

solo por algunas células:
• Vitaminas,
• Aminoácidos,
• purinas y
• pirimidinas.
La mayoría de los microorganismos son
capaces de sintetizarlos.
Agua

• Es el principal componente del protoplasma

bacteriano; el medio donde suceden las
reacciones químicas y sus productos.
• La disponibilidad se mide por un parámetro
denominado: actividad de agua (aw) o
potencial de agua. Valores normales entre
0.90- 0.99.
Medios de cultivo

• Satisfacen las necesidades nutritivas de los

microorganismos y pueden ser
químicamente definidos o complejos.

• Para el cultivo correcto de una bacteria es

necesario conocer sus exigencias nutritivas.
Tipos Nutricionales
Tipo Fuente de Fuente de Ejemplos
energía carbono
Fotoautotrofas Luz CO2 Algas y
cianobacterias
Fotoheterotrofas Luz Compuestos Algas y bacterias
orgánicos fotosintéticas
Quimioautotrofas o Química Compuesto Pocas bacterias
Litotrofas inorgánicos: H2,
NH3, NO2, H2S,
CO2
Quimioheterotrofas o Química Compuesto La mayoría de
Heterotrofas orgánicos: glucosa bacterias
Enzimas

• Catalizadores biológicos de naturaleza proteica.

• Su accionar es esencial en el metabolismo
bacteriano.
• Actúan de manera especifica a través de un
sitio activo, produciendo un efecto catalítico
sobre las moléculas del sustrato, convirtiéndola
en un producto especifico.
• Funcionan en forma secuencial: sistema
multienzimatico.
Energía

La transformación de la energía, generación de

ATP, puede ser mediante 3 vías principales:
1. La respiración, que tiene lugar en presencia
de O2 y da como resultado CO2 y H2O, es un
proceso de oxidación.
2. La fermentación: en condiciones sin oxigeno.
3. La fotosíntesis: que obtiene la energía por
absorción de luz visible a través de la clorofila.
FUENTES DE ENERGIA
METABOLICA
 Tres mecanismos:
 Fermentación
 Respiración
 Fotosíntesis

TODOS LOS MICROORGANIOSMOS

UTILIZAN POR LO MENOS UNO DE
ESTOS MECANISMOS
FERMENTACIONES.-
• Una fermentación en una reacción de
oxidación – reducción interna equilibrada,
en la que algunos átomos de la fuente de
energía (donador de electrones) se
reducen, mientras otros se oxidan y la
energía se produce por fosforilación a
nivel de sustrato.
• Una ruta bioquimica muy usada para
la fermentacion de la glucosa es la
glucolisis,tambien denominada via
de Embden-Meyerhof .
• La glicolisis se puede dividir en en 3
etapas principales:
RESPIRACION.-
 Se obtiene la energía de un oxidante
(aceptor de electrones) a lo largo de una
cadena de portadores de éste en la
membrana celular.
 El agente reductor (donador de
electrones) puede ser orgánico o
inorgánico
RESPIRACION.-

Los microorganismos son muy variables en

cuanto a la necesidad del oxigeno.
Se dividen dependiendo del efecto del oxigeno:

1.Aerobiosestrictos: los que requieren oxigeno

como aceptor terminal de electrones, no proliferan
en ausencia de O2. ej. Mycobacterium bovis.

2.Microaerofilos:utilizan O2 a niveles muy bajos.

Un 12%. No proliferen en la superficie de un
medio sólido. Ej. Haemophillus suis
RESPIRACION.-

3. Anaerobios estrictos: las que no emplean

oxigeno para su metabolismo, sino qe
obtienen su energía de reacciones
fermentativas. Ej. Clostridium tetani
4. Anaerobios aerotolerantes: pueden crecer
en presencia o ausencia de oxigeno, pero
la energía la obtienen por fermentación. Ej.
Bacterias acidolacticas.
RESPIRACION.-

5. Anaerobios facultativos:
son bacterias que proliferan mediante
procesos oxidativos, utilizando oxigeno
como aceptor terminal de electrones, o en
anaerobiosis, empleando reacciones de
fermentación para obtener energía.
Ej. Streptococcus, E. coli
FOTOSINTESIS
 Similar a la respiración, la diferencia
consiste en que en la fotosíntesis el
reductor y el oxidante se crean foto
químicamente por medio de la energía
luminosa absorbida por pigmentos de la
membrana celular
 Solo se da con presencia de fuente
lumínica
NUTRICION:
 Debe contener todos los componentes
antes mencionados para la síntesis
biológica de nuevos microorganismos:
FUENTES DE CARBONO:
 Lo utilizan las bacterias que tienen como
fuente de energía la luz (fotosintéticas)
 Pertenecen al grupo de las Autótrofas (no
requieren nutrimentos orgánicos para crecer)
 Quimilitotrofas son las que usan sustratos
inorgánicos (hidrogeno)en calidad de
reductor y el dióxido de carbono como fuente
de carbono
FUENTES DE CARBONO:
 Heterótrofos son aquellos que utilizan
carbono inorgánico para crecer
FACTORES DE CRECIMIENTO:
 Es un compuesto orgánico que debe tener
una célula para poder crecer y que es
incapaz de sintetizar.
 Diferentes especies varían ampliamente en
sus requerimientos y factores de
crecimiento.
 Nutrimentos
 Concentración de Iones Hidrogeno (pH)
 Temperatura
 Aereacion
 Fuerza iónica y presión osmótica
1.- Nutrimentos:
 Aceptores y donadores de H
 Fuentes de carbono
 Fuentes de nitrógeno
 Minerales
 Fuentes de crecimiento
2.- pH
 La mayoría de las bacterias crecen mejor a
un pH de 6 a 8 (neutralófilos)
 Aunque existen algunos acidófilos (pH de 3)
y otros son alcalófilos (pH de 10.5)
 Las bacterias regulan su pH interno
independientemente del pH externo
2.- pH

• La acidez o alcalinidad de un medio tiene

una gran importancia sobre el crecimiento
microbiano. La mayoría de MO. Crecen a un
pH entre 6 y 8.
• El pH intracelular debe permanecer próximo
a la neutralidad.
2.- pH

A. Acidófilos

B. Neutrófilos

C. Alcalófilos
3.- Temperatura

• La temperatura es un factor ambiental

importante en el control de crecimiento
microbiano.
• Los M.O pueden agruparse según los
márgenes de temperatura que requieren.
• Se distinguen 4 grupos:
1. Psicrofilos 2. Mesófilos

3. Termofilos 4. Hipertermofilos.
Clases de M.O. según la temperatura

Tipo Rango de Temperatura M.O

Temperatura Optima

Psicrofilo -10 - 20 15 Algas

Mesofilo 20 - 40 38 E. coli

Termofilo 40 - 70 60 Bacillus
stearothermophi
llus
Hipertermo 90 - 115 106 Thermus
acuaticus
filos
3.- TEMPERATURA
4.- Aereación:
 Dependidendo de su capacidad de utilizar el
02 tenemos:
 Aerobios obligados
 Anaerobios obligados
 Aerobios facultativos
 Aero tolerantes
 Micro aerófilos
Tipo de Crecimiento Producción Vía
bacteria Aerobio Anaerobio Catalasa metabólica
SOD

Aerobia + - + Respiración
estricta
Anaerobia - + - Fermentación
estricta
Facultativo + + + Respiración/
Fermentación
Indiferente/ + + + Fermentación
Aerotolerante
Microaerófilo (+) + (+) Fermentación
METODOS DE CULTIVO
 Se debe considerar la elección de un medio
adecuado y el aislamiento de un
microorganismo bacteriano puro.
 EL MEDIO: Depende de la naturaleza de la
investigación. Tener en cuenta las
características generales y requerimientos
del germen que se desea aislar.
 EL AISLAMIENTO: debe ser puro (libre de
otros microorganismos),para estudiar sus
propiedades (aislar una sola célula)
METODOS DE AISLAMIENTO
 Sembrado en placa: Utilizando un medio
gelificado. Las células crecen aisladas
dando origen a una colonia. El medio
mas ideal es el agar.
 Dilución: Utiliza un medio liquido. De la
suspensión se hacen diluciones
seriadas y se siembra en una placa.
Desventaja: solo se utiliza para aislar el
germen predominante de una población
mixta
CRECIMIENTO BACTERIANO:
TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO
• Según su estado físico:
- Líquidos o caldos
- Sólidos (Agar al 1.5-2%)
- Semisólidos
• Según crecimiento que permitan:
- Enriquecidos
- De enriquecimiento
- Selectivos
- Diferenciales
ESTUDIO CUALITATIVO DEL
CRECIMIENTO BACTERIANO
• Medios líquidos:
Turbidez

• Medios sólidos:
Colonias
COLONIAS BACTERIANAS.
TIPOS

Forma CIRCULAR IRREGULAR FILAMENTOSA RIZOIDE

Superficie CONVEXA PLANA UMBILICADA CRATERIFORME

Bordes REDONDEADO ONDULADO FILAMENTOSO ESPICULADO LOBULADO

CUIDADOS CON LOS MEDIOS DE
CULTIVO
 Los medios de cultivo casi siempre deben
ser reconstituidos, por tanto deben ser
medidos correctamente.
 Deben ser preparados y gelificar a
diferentes temperaturas.
 Depositar en contenedor (placa petri)
teniendo cuidado de no contaminar
 Tener mucho cuidado en el extendido
Metabolismo Bacteriano

• Conjunto de reacciones bioquímicas catabólicas

y anabólicas, que transforman las sustancias
nutritivas para obtener energía.
• Anabolismo: reacciones de síntesis.
• Catabolismo: degradación de compuestos
orgánicos.
• Reacciones Endorganicas.
• Reacciones Exorganicas.
Crecimiento de poblaciones

• Es el aumento en el numero de celulas de

una poblacion.
• Velocidad de crecimiento es el cambio en el
numero de celulas o en la masa celular,
experimentado por unidad de tiempo.
• Durante el ciclo de division celular, todos los
componentes se duplican.
• Tiempo de generacion: es el tiempo que se
requiere para que la poblacion se duplique.
• Los tiempos de generacion varian
ampliamente entre las diferentes bacterias.
Ej. 1 a 3 horas, 10 min, o varios dias.
METABOLISMO MICROBIANO
 Categorías:
 Vías para la inter conversión de metabolitos
 Vías para la asimilación de metabolitos
 Vías de inter conversión de metabolitos
formados a productos terminales
 Vías para producción de energía para el
crecimiento y conservación
TIPOS DE REACCIONES
METABÓLICAS

Reacciones energéticas

Reacciones de biosíntesis

Reacciones de polimerización

Reacciones de ensamblaje
REACCIONES DE
BIOSÍNTESIS

 Formación de elementos estructurales:

 Ácidos grasos
 Azúcares
 Aminoácidos
 Nucleótidos
REACCIONES DE
POLIMERIZACIÓN Y ENSAMBLAJE

 Formación de macromoléculas:
ADN, ARN, proteínas,
peptidoglicano,
fosfolípidos,
LPS...

 Formación de las distintas

estructuras celulares
REGULACIÓN DEL METABOLISMO

 Regulación de la actividad
enzimática

 Regulación de la síntesis
enzimática:
 Represión
 Inducción
REACCIONES
ENERGÉTICAS: FASES
 Digestión extracelular

 Paso a través de la envuelta:

 Difusión simple
 Difusión facilitada
 Transporte activo

 Degradación y obtención de
energía
METABOLITOS FOCALES
 Inter conversiones de Glucosa 6-Fosfato
y carbohidratos
 Formación y utilización de
Fosfoenolpiruvato
 Formación y utilización de Oxaloacetato
 Formación de Alfa cetoglutarato a partir
del piruvato
 NUTRICIÓN BACTERIANA

METABOLISMO

BIOSÍNTESIS
NUTRIENTES ENERGÍA
REACCIONES
ENERGÉTICAS:

 Vía glucolítica de Embder

Meyerhof
 Vía pentosa fosfato
 Ciclo de Krebs

 Vía de Entner Doudoroff