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Detección de anticuerpos

irregulares
Anticuerpos irregulares

Anticuerpos que se desarrollan por la exposición


a antígenos eritrocitarios.
Las fuentes de inmunización pueden ser
transfusiones, embarazos o
desconocidas(natural).
Aloanticuerpo: anticuerpo dirigido contra
antígenos que carece la persona.
Autoanticuerpo: anticuerpo dirigido contra
antígenos propios.
En nuestro país, los anticuerpos irregulares
más frecuentemente encontrados en
donantes de sangre son: anti-Lea, anti-K y
anti-E, mientras que en pacientes son: anti-
D, anti-E y anti-K.

Todos estos anticuerpos son capaces de provocar hemólisis in


vivo y acortamiento en la sobrevida normal de los glóbulos rojos
Detección en el laboratorio

La detección e identificación de anticuerpos irregulares


habitualmente se realiza mediante técnicas de aglutinación en
tubo, en columna o en microplaca, con etapas a temperatura
ambiente, 37°C y antiglobulina humana. En algunas
ocasiones y de acuerdo a condiciones observadas en cada
laboratorio, se puede realizar análisis a 4°C
plasma suero 4ºc

EDTA 72 horas
Células
I, II 2,4%
panel

D, C, E, c, e, M, N, S, s, P1, Lea, Leb,


K, k, Fya, Fyb, Jka y Jkb.
SAGH POLIESPECÍFICO
liss
Suero fisiológico para realizar lavados
Identificación de anticuerpos
irregulares

Ag
Panel 16 células
conocidos
Anticuerpo de importancia
clínica

Provocan reacción postransfusional.


Causan enfermedad hemolítica en el recién
nacido.
Disminuyen la sobrevida de los eritrocitos
transfundidos.
En el laboratorio de inmunohematología se
detectan por test AGH y su temperatura óptima
es 37ºC.
Otros factores:

Especificidad del anticuerpo.


Clase y sub clase de IgG
Densidad de los antígenos en la membrana del
glóbulo rojo.
Actividad del sistema fagocitico mononuclear.
Volumen de glóbulos rojos administrados.
Anticuerpos de importancia
clínica
Comportamiento serológico
de los principales anticuerpos
La detección de anticuerpos irregulares es un
examen pretransfusional de aglutinación o hemolisis
con el propósito de detectar en el suero del paciente
anticuerpos contra antígenos de glóbulos rojos.
Se realiza en pacientes que requieren transfusión y
en embarazadas.
Las características físico-químicas de los anticuerpos
involucrados hacen necesario la utilización de
diferentes medios y temperaturas óptimas de
reacción como también el fenotipo adecuado de los
eritrocitos utilizados.
Debido a que los anticuerpos de
importancia clínica son de tipo IgG
la técnica más apropiada para
detección el test de Antiglobulina
Indirecto.
El test se considera positivo cuando
en cualquiera de sus fases se
observa aglutinación o hemolisis.
Detección de anticuerpos
irregulares en medio
de LISS
Se utiliza para evidenciar la presencia de un anticuerpo
irregula acortando su tiempo de incubación y favorecer la
aglutinación de aquellos anticuerpos que presentan
constantes de asociación relativamente bajas con su
antígeno.
Es importante hacer una estandarización previa para
determinar los tiempos de incubación y respetar la
proporción suero:células (1:1).
Detección de anticuerpos
en medio enzimático
Esta técnica se utiliza para evidenciar y potenciar la
presencia de anticuerpos irregulares que presentan
constantes de asociación relativamente bajas con
su antígeno, incrementado su reactividad (Rh, Kidd).
También es útil cuando hay mezclas de
anticuerpos, dependiendo de la resistencia o
denaturación de los antígenos eritrocitarios.
Se debe utilizar controles para evitar resultados
falsos positivos
Consideraciones

Muestra de sangre:
Que represente estado inmunológico actual del paciente
Muestra no contaminada con otros inyectables ni hemolisada
Células screening
Grupo O
Que contenga antígenos de sistemas de importancia clínica: D, C,E,
c, e, M, N, S, s, P1, Lea, Leb, K, k, Fya, Fyb, Jka y Jkb
R1R1
R2R2
Antígenos c, Fya, Jka homocigotos en al menos 1 célula del
screening
Consideraciones

El diagnóstico del paciente y su historia clínica


aportan información importante para interpretar
los resultados.
Las técnicas de detección independiente del
soporte usado deben incluir controles.
Las técnicas enzimáticas y el uso de
potenciadores son complementarias en algunos
casos.
aproximadamente un 0.3 - 2% de la población, según sea el grupo
estudiado y la sensibilidad del método utilizado.

Una vez detectada la presencia de un anticuerpo irregular, debe

Anticuerpos irregulares
determinarse su especificidad y su significación clínica. Un anticuerpo
clínicamente significativo es aquel que acorta la sobrevida prevista de los
hematíes incompatibles transfundidos, o que se asocia con enfermedad
hemolítica del recién nacido (EHRN). No obstante el grado de significación
clínica es variable. Algunos anticuerpos producen la destrucción de los
G.R. en pocas horas e incluso minutos, mientras que otros acortan la
sobrevida prevista en solo unos pocos días. Por lo tanto, puede utilizarse la
experiencia documentada de un anticuerpo con la misma especificidad
para evaluar la significación clínica de un anticuerpo dado.

COMPORTAMIENTO SEROLOGICO DE LOS ANTICUERPOS IRREGULARES

AC LISIS SALINO AGH ENZIMA ASOCIADO A


In vitro 4ºC 22ºC 37ºC AGH EHRN RPT
M No May Alg Pocos 0 0 Pocos Pocos
N No May Pocos Ocas 0 0 Raros ¿
S No Pocos Alg May Si Si
S No 0 Pocos May Si Si
U No 0 Pocos May May May Si Si
Lua No Alg May Pocos Pocos Pocos No ¿
Lub No Pocos Pocos May Pocos Pocos Mod Si
K No Pocos May Alg May Si Si
K No Pocos May Alg May Si Si
Fya No Raros May 0 0 Si Si
Fyb No Raros May 0 0 Si Si
Jka Alg Pocos May Alg Si Si Si
Jkb Alg Pocos May Alg Si Si Si
Dia No Alg May Alg Si Si
Dib No May Alg Si Si
alg= algunos; may= mayoría; ? = desconocido; O = negativo

Incidencia de aloinmunización
Anticuerpos frecuentemente
identificados

– Rh: anti-D,-E,-c,-C,-e
– Kidd: anti-Jka
– Duffy: anti-Fya
– Kell: anti-K
– MNS: anti-S,-s

Se considera que un anticuerpo es clínicamente significativo, si


él es activo a 37oC y en test AGH.
Elemento Resultado Interpretación

Auto control Negativo Aloanticuerpo

Positivo Autoanticuerpo o reacción por una transfusión


reciente

Fases y Salino Anticuerpo frío o de tipo IgM


Medios
37°C Probable ac. Frío (IgM) si además reacciona a t°
ambiente.
Probable ac. Caliente (IgG) si además no
reacciona a t° ambiente.

AGH Anticuerpo caliente o de tipo IgG, de


significancia clínica.

Comparando Único El patrón se relaciona con la columna de uno


los patrones anticuerpo de los antígenos

Múltiples Es difícil comparar los patrones a menos que las


anticuerpos fases o fuerzas de reacción sean únicas.

Fuerza de Único patrón Probable especificidad por un anticuerpo


reacción

Múltiples Más de un anticuerpo o anticuerpo único que


patrones muestra efecto de dosis.

CALCULO DE PROBABILIDAD:
Para la identificación definitiva del anticuerpo, debe
realizarse un Nº suficiente de muestras de hematíes que