Características histopatológicas de

las lesiones cutáneas causadas por

Leishmania Viannia panamensis en
Panamá.
BRADDICK, ÁNGELA
SALTARÍN, JUAN
MONTENEGRO, ELÍAS
 Abstract
Leishmaniasis Cutánea (LC) es una
enfermedad endémica en Panamá
Causada por parásitos del género
Leishmania (subgénero Viannia, spp.
panamensis)
La manifestación clínica más común es
una úlcera en la piel característica.
Normalmente la lesión tiene inflamación
crónica con linfocitos, macrófagos,
plasma y a veces es granulomatosa.
Este estudio presenta las características
histopatológicas en 49 biopsias de piel
de pacientes con sospecha de LC.
 Introducción
• Leishmaniosis Cutánea (LC), zoonosis causada por un protozoo parásito del género
Leishmania.

• El mosquito que es vector se llama Lutzomyia (chitra o mosquito de arena o sandflies).

• Hay 3 formas de leishmaniosis: cutánea, visceral y mucocutánea.

• La lesión en la piel es muy característica para el diagnóstico.

• Histopatología: 1) inflamación con macrófagos, linfocitos, plama y granulocitos, los

amastigotes se observan dentro de los macrófagos. 2) inflamación crónica granulomatosa
para evitar la diseminación.

• Los amastigotes son circulares, núcleo grande, un cinetoplasto y rodeadas por un halo.

• En el estudio se observaron dos patrones histológicos: la primera con inflamación, linfocitos,

plasma, macrófagos y escombros. La segunda con granuloma, inflamación, células epiteliales
y células gigantes.

• Se han reportado pocos estudios: Darlimg 1911, Henrick 1911, Darlong and Connor 1911,
bates 1913, Fox 1931, Snow 1948. Concluyen en que la úlcera y la histología tienen patrones
muy característicos.
 Diseño del estudio
Objetivo: Describir las características histopatológicas de las biopsias de piel de pacientes con leishmaniasis
cutánea (LC) en Panamá.
Los pacientes fueron atendidos en la Clínica de Medicina Tropical, Instituto de Estudios de Salud Gorgas
Memorial, Ciudad de Panamá.
Este estudio se llevó a cabo de enero de 2012 a diciembre de 2012.
Todos los pacientes eran adultos y aceptaron, participar en el estudio mediante la firma de consentimientos
informados.
Los pacientes fueron sometidos a biopsia y se realizó el diagnóstico histopatológico y molecular de la
Leishmaniasis cutánea.
Todos los pacientes diagnosticados con LC fueron tratados con antimonato de meglumina (Glucantime^TM) en
una dosis de 20 mg / kg / peso corporal, por vía intramuscular durante 20 días.
 MÉTODOS Y MATERIALES
OBTENCIÓN DE MUESTRAS
Se evaluaron 49 biopsias de piel en pacientes
con sospecha de Leishmaniasis cutánea.
Se tomaron muestras de biopsia con un
punzón Harris de 5 mm.
CARACTERIZACIÓN MOLECULAR
La extracción de ADN de las muestras de biopsia se
realizó utilizando el mini kit Qiagen QIamp® DNA
Blood (Qiagen, CA, EE. UU.)
Se utilizaron dos protocolos basados en la reacción
en cadena de la polimerasa (PCR):
◦ PCR para identificar el subgénero Viannia
(cebadores LV-B1)
◦ PCR Hsp-70 (cebadores F25-R1310)
Mediante análisis PCRHsp-70 / RFLP se utilizaron
las enzimas HaeIII y BccI para observar los distintos
patrones de las especies de Leishmania
 ANÁLISIS HISTOPATOLÓGICO

Todas las muestras se fijaron en formalina tamponada al 10% y se procesaron en un periodo de 48

horas. Las muestras de tejido se deshidrataron, se aclararon, se embebieron en parafina, se cortaron
en secciones de 4 a 5 μm de espesor y se tiñeron con hematoxilina-eosina y Giemsa.
Se evaluó:
Intensidad y distribución de las reacciones inflamatorias en la dermis
La presencia de diferentes tipos de células presentes en el infiltrado
La formación de granuloma
La carga parasitaria
Se realizó un análisis histopatológico semicuantitativo comparativo de las secciones teñidas con H-E:
(-) negativo, (+) discreto, (++) moderado y (+++) intenso.
 RESULTADOS
Las lesiones cutáneas de 49 pacientes con sospecha de LC se analizaron mediante métodos
moleculares e histopatológicos.
De los pacientes estudiados, 73% eran hombres y 27% mujeres. La mayoría de los
pacientes (96%) procedían de la provincia de Panamá. El rango de edad fue de 23 a 71 años
con un promedio de 41 años.
El tiempo de evolución de las lesiones varió de 10 a 90 días con un promedio de 30 días. El
número de lesiones varió de 1 a 8, con un promedio de 2 lesiones por paciente, ubicadas
principalmente en las extremidades superiores.
Del total de muestras, el 94% (46/49) fue positivo por PCR (Viannia, Hsp-70). Las muestras
de PCR Hsp-70 positivas (78%, 36/46) se caracterizaron como L. (V.) panamensis mediante
análisis PCR-RFLP.
48% (22/46) de las muestras fueron positivas a amastigotes mediante evaluación microscópica.
En pacientes con lesiones de LC de 30 días o menos (lesiones tempranas), 11 fueron positivos y 13 fueron negativos; y en pacientes
con lesiones de más de 30 días de infección (lesiones tardías), 11 fueron positivos y 11 fueron negativos.
La cantidad de parásitos varió entre discreto (+) e intenso (+++) en los dos grupos.
El infiltrado inflamatorio fue intenso en 39% (18/46), moderado en 57% (26/46) y leve en 4%
(2/46) de los casos con distribución difusa en 37% (17/46) y focal en 63% (29/46) de los casos.
El infiltrado inflamatorio se caracterizó por el predominio de linfocitos (61%), seguido de
histiocitos (22%) y células plasmáticas (20%).

La presencia de granulomas epitelioides bien formados se observaron en el 46% (21/46) de

los casos, junto a células gigantes multinucleadas en el 24% (5/21) y área de necrosis focal
en el 14% (3/21) de estos casos .
La presencia de formas de Leishmania amastigote en el citoplasma de macrófagos se
observó en el 48% (22/46) y la carga del parásito varió de leve a moderada a intensa.
De acuerdo con el predominio de
diferentes células inflamatorias en la
respuesta del tejido dérmico, fue posible
clasificarlas en tres patrones
histopatológicos: infiltración
linfohistiocítica en 50% (23/46),
linfoplasmocítica en 61% (28/46) y
granulomatosa en 46% (21 / 46), siendo
la combinación de estos patrones
frecuentemente encontrados (Figura 3).
Conclusión
Los cambios histopatológicos observados en Leishmaniasis Cutánea por L. (V.) panamensis, son
caracterizados por un reacción inflamatoria, intensa y difusa en la dermis, con granulomas,
linfocitos, plasma, ulceras, acantosis, exocitosis y espongiosis en la epidermis.
Aún así ninguno es específico para establecer el dignóstico por histopatología. Por las
condiciones observadas, la sensibilidad de la técnica histopatológica en el diagnóstico de
Leishmaniasis Cutánea causada por L. (V.) Panamensis, es de 48%.
DISCUSIÓN
El diagnóstico clínico de estas lesiones es muy complicado, aunque los especialistas sean
experimentados en el reconocimiento y tratamiento.
Los descubrimientos de CL en Panamá han sido gracias al soporte del diagnóstico y pronóstico de las
infecciones parasitarias, las mismas son muy frecuentes en Panamá
En los estudios anteriores, se consideró que eran muy importantes los exámenes histopatologicos para
poder describir las infiltraciones inflamatorias asociadas a las leishmaniasis. De todas formas de
acuerdo a estudios este examen tiene baja sensitividad para el diagnóstico (30%-60%).
A veces los parásitos están en el tejido conectivo. Ocasionalmente la histopatologia falla en la
detección de amastigostes hasta en estadios tempranos, estos no se reportan a Epidemiologia.
Las manifestaciones histopatologicas son inflamaciones granulomatosas en los tejidos mucosos y
cutáneos.
Es muy difícil detectar la cronicidad de la inflamación. Para mejorar el diagnóstico de histopatologia se
puede utilizar la técnica de inmunostaining.
 DISCUSIÓN
Los análisis morfológico de las lesiones muestran la distribución de las heridas inflamadas ocasionadas por el
parasito, estas pueden ser focales o disgustas. Las inflamaciones son caracterizadas por linfocitos, histiocitos y
células de plasma. La epidermis muestra acantosis, espongiosis, exocitosis, paraqueratosis y hiperplasia
pseudoepitheliomatosa. También demuestran la presencia de úlceras, necrosis focal y granulómás.
En el estudio que se realizó 63% de las heridas eran focales y el resto de las lesiones eran difusas. 35% de las
muestras presentaba exocitosis.
En otros estudios se clasificaban las heridas en 5 o menos grupos. En este estudio se clasificaron en 3 grupos: el
primer grupo, inflamación linfohistiocitica, se presentó en el 50% de las muestras, el segundo grupo con
inflamación linfoplasmacitica
Se identificaron tres patrones histopatológicos principales: el primero con una presentación linfohistiocítica en el
61% de los casos y el tercer grupo con respuesta granulomatosa en el 46% de los casos.
Los estudios histopatologicos e inmunológicos ayudan a determinar si las heridas son causadas por leishmania.
En general, de los casos siempre se presenta infiltración macrocitica, linfocitos, células de plasma y formación de
granulomas.
GRACIAS