JUAN CARLOS RUMBO USTARIZ

YARCELIS TORREZ MACHUCA

FICHA:851830
 ENTEROBACTERIAS

GENERALIDADES

 Bacilos y cocobacilos gramnegativos.

 Son aerobios o anaerobios facultativos.
 No formadores de esporas.
 Fermentadores de glucosa.
 Oxidasas negativas.
 Reducen nitratos a nitritos.
 La mayoría son móviles.
 Producen catalasa.
INCLUYE GENEROS COMO:

Escherichia sp Enterobacter sp Proteus sp

Shigella sp Serratia sp Morganella sp

Salmonella sp Citrobacte sp Providencia sp

Klebsiella sp Edwarsiella sp Yersinia sp

  PRUEBA IMVIC
Las pruebas son : Indol, Rojo de metilo, Voges-Proskauer y
Citrato. El resultado de este test se expresa mediante
símbolos de positivo o negativo (+ o -) según el resultado de
cada prueba.
SALMONELLA
 Se incluye en la familia Enterobacteriaceae
 Bacilos cortos ( 1-2 µm ).
 Gram negativos.
 Anaerobios facultativos.
 Fermentadores de la glucosa con producción de acido y gas
(características general de Enterobacterias).
 Incapaz de hidrolizar la lactosa y sacarosa .
 Catalasa positivo.
 Oxidasas negativo.
 La mayoría son móviles: provistos de flagelos peritricos
 No formadoras de esporas.
DETERMINACION DE SALMONELLA
EL AISLAMIENTO DE SALMONELLA INCLUYE
CUATRO ETAPAS FUNDAMENTALES:

1. Enriquecimiento no selectivo.

2. Enriquecimiento selectivo.

3. Siembra en placa en agar selectivo y

diferencial.

4. Identificación.
 ENRIQUECIMIENTO NO SELECTIVO

1. Pesar en la bolsa para stomacher previamente

tarada 25 gr representativo de la muestra total.

2. Añadir 225 ml de agua peptonada tamponada(medio

de enriquecimiento no selectivo).

3. Colocar a bolsa de stomacher y hacer funcionar el

aparato por 2 minutos, el tiempo máximo de
homogenización dependerá del tipo de alimento. No
debe sobrepasar los 3 minutos.

4. Incubar a 35- 37 °C por 18 a 24 horas

ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO

1. Transferir 1 ml de cultivo del enriquecimiento no

selectivo en 10 ml de caldo selenito cisteína.

2. Incubar en baño de María a 43°C por 18- 24 horas.

3. Transferir 1 ml de cultivo obtenido del

enriquecimiento no selectivo en 10 ml de caldo
tetrationato, adicionado de 0.2 ml de solución de yodo
y 0.1 ml de solución acuosa de verde brillante al 0.1 %

4. Incubar en baño de María a 43 °C por 18 a 24 horas.

SIEMBRA EN PLACA CON MEDIOS SELECTIVOS Y
DIFERENCIALES
 Se deben utilizar mínimo 2 medios de cultivos
selectivos por cada caldo de enriquecimiento no
selectivo y selectivo. para el aislamiento del
microorganismo.
 El laboratorio puede utilizar el medio diferencial
de su elección.
Se recomienda:
 Agar MacCONKEY
 Agar XLD (Agar de xilosa, lisina, Desoxicolato)
 Agar bismuto sulfito
 MEDIOS DE CULTIVOS SELECTIVOS Y DIFERENCIALES
AGAR MACCONKEY (MCK). Las sales biliares y el cristal
violeta ejercen una inhibición significativa sobre las
bacterias Gram +. La lactosa y el indicador rojo neutro
permiten comprobar la degradación de ese disacárido.
XLD AGAR (AGAR DE XILOSA, LISINA,
DESOXICOLATO)
 Las colonias en el medio se observan pequeñas
de color rojas con centro de color negros por
la producción de H2S.

Salmonella sp
NO ESTERILIZAR
AGAR BISMUTO SULFITO
Es un medio selectivo utilizado para el aislamiento de
Salmonella typhi y otros bacilos entéricos.
Colonias típicas
Las colonias típicas de la Salmonella typhi son marrones
o negras, algunas veces con brillo metálico alrededor de
las colonias.

Salmonella
typhi
AGAR SULFITO BISMUTO

• No esterilizar
• Disolver 47,5 gr en 1
litro de agua
destilada
IDENTIFICACION DE SALMONELLA MEDIANTE PRUEBAS
BIOQUIMICAS

TSI : Por lo general salmonella sp, da como resultado de esta

prueba una reacción alcalina/acido K/A, con producción de
ácido sulfhídrico.
Pico alcalino / fondo alcalino : no hay fermentación de
azucares. Pseudomonas sp.
Pico alcalino/fondo ácido : Glucosa fermentada, lactosa ni
sacarosa fermentadas. Shigella sp.
Pico alcalino/fondo negro : Glucosa fermentada, ni lactosa ni
sacarosa fermentadas, producción de ácido sulfhídrico.
Salmonella sp.
Pico ácido/fondo ácido: Glucosa y lactosa y/o sacarosa
fermentadas. Puede producirse H2S o no. Escherichia coli.
 UTILIZACIÓN DE
CITRATO

 Salmonella sp, por

lo general utiliza el
citrato como fuente
de carbono. Se
produce la
liberación de
amoniaco en el
medio .
Positiva Negativa
 PRUEBA DE INDOL
 Esta prueba se desarrolla para determinar si la
bacteria en estudio esta en capacidad de
desdoblar el Indol de la molécula del triptófano.
 Salmonella sp, no tiene la capacidad de generar el
Indol por lo cual no se presenta ninguna reacción
en el medio.
 PRUEBA DE MOTILIDAD
 Sirve para determinar si un organismo es móvil o
no. La movilidad de las bacterias es consecuencia
de la presencia de flagelos que se encuentran
principalmente entre los bacilos, aunque algunas
formas de cocos son móviles.
 La mayoría de las salmonellas son móviles.
 HIDROLISIS DE UREA
Se debe a la capacidad que tiene el microorganismo
de desdobla e hidrolizar la urea las cuales producen la
enzima ureasa.
Esta prueba se considera vital en la diferenciación
bioquímica entre salmonella sp y Proteus sp.
 ROJO DE METILO
Permite determinar la formación de ácidos
orgánicos que se producen durante la fermentación
de un carbohidrato. Un color rojo significa
positividad de la reacción). Indica que el
microorganismo realiza la fermentación de la
glucosa por la vía ácido-mixta.
La reacción para salmonella sp es positivo.
 REVELAR EL VOGES PROSKAUER (VP)

 Un color rojo indica positividad de la reacción.

Este ensayo pone en evidencia la capacidad del
microorganismo de producir acetilmetilcarbinol
(acetoína) a partir de la fermentación
butilenglicólica de la glucosa.
 La reacción para salmonella sp es negativo.