INMUNOMARCACIÓN

INMUNOCROMATOGRAFIA
LABORATORIO DE INMUNOLOGIA I
UNIVERSIDAD DE SANTANDER
 • El estudiante identifica los procedimientos y
fundamentos de la inmunocromatografía,
recordando las normas básicas de
bioseguridad necesarias.
OBJETIVOS • Conoce los fundamentos teórico-prácticos
de los principales métodos diagnósticos en
Inmunomarcación.
• Describe el procedimiento de las técnicas
de inmunológicas realizadas en el
laboratorio.
AGLUTINACIÓN: UNIÓN AG-AC
DIRECTA
• VDRL INDIRECTA
(Venereal Desease Research Laboratory)

REACCION VISIBLE: LÁTEX O CARBÓN

EJM:
• PCR
• FACTOR REUMATOIDEO
• ASTOS
• RPR- CARBON
ESCALA SEMICUANTITATIVA
 Es importante destacar que NO es posible determinar la
concentración de Ac sino que, en el mejor de los casos,
será posible calcular un título de Ac.

Diluciones seriadas del suero del paciente con cantidades

constantes de Ag y se elige arbitrariamente como título la
inversa de la máxima dilución de suero que produce
aglutinación

CONCEPTO DE TÍTULO
INMUNOMARCACIÓN
 • Métodos para localizar antígenos en tejidos
o células basados en la reacción antígeno
anticuerpo.
• Combinación de técnicas histológicas,
inmunológicas y bioquímicas.
DEFINICIÓN
• Desarrollada desde 1941 en la IHQ
• Utilización de un anticuerpo específico
marcado para formar un complejo visible.
• Marcaje: enzimas, sustancias radioactivas
y fluorocromos
USOS O APLICACIONES
INMUNOFLUORESCENCIA
INMUNOHISTOQUÍMICA • Conjugación de anticuerpos con colorantes
fluorescentes.
• Visualización de la distribución y localización de
componentes celulares específicos en los • Las moléculas fluorescentes tienen la
tejidos. particularidad que emiten luz a determinada
longitud de onda (ultravioleta)
• Altamente sensible.
• Requiere pequeñas cantidades de tejido.
• Analiza uno o varios antígenos
simultáneamente.
• métodos directos e indirectos
USOS
 CAMPO DE DIAGNÓSTICO
UTILIDAD DIAGNÓSTICA BACTERIOLÓGICO
Estudio de proteínas subcelulares
Estudio de anticuerpos
• Diferenciar proliferación celular
maligna y benigna EJM.
• Subtipos de neoplasias para ANAS
selección terapéutica ANCAS
• Caracterizar origen de carcinomas ENAS
• Detección de antígenos Toxoplasmosis
microorganismos (fiebre amarilla-
adenovirus- CMV- histoplasma- Sífilis
paracoccidiodes- leishmania- etc)
ANAS
INMUNOCROMATOGRAFÍA
 • Uso de papel cromatográfico:
nitrocelulosa que permite la migración
capilar de complejos o partículas.
DEFINICIÓN • Sencillez y rapidez
• Método cualitativo
• Absorción selectiva
• Marcación con nanopartículas
coloreadas con metales pesados
 La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado. Esta lleva impregnada un
conjugado formado por un anticuerpo específico
El antígeno se unirá al conjugado
formando un complejo y empezarán a migrar a través de la membrana de
nitrocelulosa.

En la línea de captura los complejos formados por la

unión del antígeno y conjugado quedarán retenidos y la línea se coloreará

La zona control está formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de
detección. Cuando el resto de muestra alcanza esta zona, el anticuerpo se unirá al
conjugado libre que no ha quedado retenido en la zona de captura.
FUNDAMENTO
USOS