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BIOFILM DENTAL

ó
BIOPELÍCULA DENTAL

Mag. Esp. José Luis Vásquez Rivera


Referencias históricas
Desde 1683 se conoció las características bacterianas de los
depósitos sobre los dientes.

Antony van Leeuwenhoek (1632 - 1723), escribió a la Royal


Society de Londres: “es mi costumbre en la mañana frotar mis
dientes con sal, y después lavar la boca con agua, y muchas
veces después de comer limpiar mis dientes posteriores con un
palillo, lo mismo que frotarlos duro con una tela, por lo tanto, los
dientes posteriores y anteriores quedan tan limpios y blancos, que
no a todos los hombres de mi edad les ocurre lo mismo, y mis
encías (no importa que tan dura sea la sal con que las froto)
nunca empiezan a sangrar….

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....Sin embargo, mis dientes no son tan limpios ya que en
algunos de los anteriores y los moledores (cuando los
inspecciono con una lupa) queda pegada ó esta creciendo una
pequeña materia blanca que es tan espesa como si fuera una
masa. Al examinarlos (aunque yo no podía discernir nada en
movimiento) yo creía que todavía había animalitos vivos allí,
que toda la gente que vive en los Países Bajos unidos no iguala
al número de los animalitos vivos que yo llevo en mi boca en
éste mismo día”.

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Black (1898), describió la placa dental por primera vez, y que era una
masa microbiana que recubría las lesiones cariosas.

Bowen (1976), define a la placa dental como depósitos blandos que


forman una biopelìcula que se adhiere a la superficie dentaria ó a otras
superficies duras de la boca.

Moore (1987), estimó que es posible aislar 300 especies bacterianas en


la placa dental

Slots (1979), Leknes y col. (1997) yTimmerman (2001), señalan que la


placa dental con especies anaeróbicas específicas inducen al desarrollo
de la enfermedad periodontal.

Marsh y Martin(2000), la definen como una comunidad microbiana


compleja que se encuentra en la superficie de los dientes, embebida en
una matriz de origen bacteriana y salival.

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Biofilm dental o biopelìcula dental

Comprometido en la etiología y desarrollo de la Gingivitis, Periodontitis y


otras enfermedades periodontales.

Común denominador de las enfermedades inflamatorias del periodonto.

Ningún desequilibrio sistémico, ni el trauma de oclusión, producen lesiones


inflamatorias en ausencia del biofilm dental.

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¿Dónde pueden existir biofilm?
• Superficie interna de los floreros.
• Interior de las tuberías.
• Superficie de las piedras de los ríos.
• Superficie de barcos dentro de la parte sumergida.
• Superficies dentales.
• Catéteres.

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Desarrollo del biofilm

1.- A partir de un m. o. planctónico.

2.- De una porción de biofilm.

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¿De qué está compuesto un biofilm?
Masa de células: una o múltiples especies.

Agua: 97%

Matriz: que lo rodea, compuesta por:

- Exopolisacáridos.
- Proteínas.
- Ác. Nucleicos.
- Productos de la lisis de bacterias.

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¿Quiénes conforman los biofilm?

La capacidad de formar un biofilm no está restringida a


ningún grupo específico de microorganismos, y se
considera que bajo condiciones ambientales adecuadas,
todos los microorganismos son capaces de formar un
biofilm.

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Biopelìcula dental
Es una comunidad de microorganismos que
crecen dentro de una matriz de exopolisacáridos
y adheridos a una superficie inerte o un tejido
vivo.
Las excreciones de los biofilm permiten que
los microorganismos se agrupen en zonas
muy limitadas y seguras, uniéndose con fuerza
a un soporte sólido que les va a proporcionar:

• Estabilidad
• Nutrientes
• Espacio

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Estructura de la matriz del biofilm
La estructura de la matriz del biofilm no es sólida y presenta
canales que permiten el flujo de agua, nutrientes y oxígeno
hasta las zonas más profundas del biofilm.

Sin embargo, esto no evita que se puedan encontrar diferentes


ambientes dentro de un biofilm, y depende de concentración de
nutrientes, pH, y oxigeno.

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¿Qué formas puede tener?
Un biofilm puede tener diferentes formas dependiendo de las
condiciones ambientales donde fue formado:

Propiedades superficiales.
Propiedades internas.
Nutrientes disponibles.
Tipo de bacterias que los conforman.
Hidrodinámica.

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Por ejemplo:
“La disponibilidad de nutrientes es directamente proporcional a la
localización del microorganismo.”

Cerca de la microcolonia:

- mejor manejo de [O2 ]


- múltiples especies: asociación, metabólicamente cooperativos.
- cercanía entre células: facilita la transferencia de genes, plásmidos
o fagos: diversidad genética.

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Biofilm dental
Actualmente, ha sido posible aislar con medios de cultivo
muy sofisticados aprox. 700 especies de
microorganismos (sólo un número reducido se relaciona
con la Periodontitis).

Un milímetro cúbico de biofilm dental que pesa 1 mg.


tiene aprox. 108 microorganismos.

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Organización de la flora bacteriana en el surco
gingival
La cavidad oral es estéril en el momento del
nacimiento.

A las 6 - 10 horas del nacimiento se establece


una flora facultativa.

A los 10 primeros días del nacimiento, aparecen


las formas anaeróbicas, y se van organizando en
los 5 - 6 primeros meses de vida.

Cuando los dientes comienzan a erupcionar, ya


definitivamente se ha establecido una flora
anaeróbica.

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Clasificación del biofilm dental
En relación al margen gingival, se
clasifica en:
Supragingival.- se encuentra coronal al
margen gingival.
Subgingival.- se organiza ocupando la
luz del surco gingival ó de la bolsa
periodontal.

Investigaciones demuestran la
penetración de las bacterias al epitelio,
tejido conectivo subyacente, y vía
sanguínea a diferentes partes del
organismo, y se les denominan bacterias
invasoras.

En la interfase biofilm dental adherido /


epitelio del surco gingival se reconoce la
presencia de bacterias flotantes ó no
adheridas. 17
Biofilm dental supragingival

Se acumula especialmente en
el tercio gingival del diente y
se evidencia con las
soluciones reveladoras ó las
pastillas reveladoras.

Se adhiere aprovechando
pequeñas rugosidades de la Superficies dentarias libres.

superficie dentaria, márgenes


de obturaciones, de
restauraciones protéticas y
bandas de ortodoncia.

Superficies dentarias proximales 18


Biofilm dental supragingival

Prótesis fija

Ortodoncia fija
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Película adquirida

Es una película delgada amorfa que oscila entre 0,1 y 1


micrómetro de espesor.

Compuesta por proteínas y glucoproteínas aniónicas


unidas a la hidroxiapatita del esmalte.

Se adhiere a la superficie dentaría: esmalte, cemento ó


dentina.

A las pocas horas de pulirse los dientes se aprecia


la formación de ésta película.

En su formación intervienen fuerzas electrostáticas, tipo


van der Walls e hidrófobas (hidroxiapatita carga
negativa y glucoproteínas carga positivas).

Opera como barrera de protección proporcionando


lubricación a la superficie dentaria impidiendo su
desecación.

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Película adquirida

Sobre la película adquirida se adhieren las primeras bacterias


(formas cocoídes), y se acumulan otras sucesivamente, y otras se
multiplican.

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Propiedades básicas del biofilm

Hay cooperación comunitaria entre varios tipos de microorganismos.

Los microorganismos están establecidos en microcolonias.

Las microcolonias están rodeadas por una matriz protectora.

Dentro las microcolonias tienen diferente medio ambiente.

Los microorganismos tienen un sistema primitivo de comunicación.

Los microorganismos en un biofilm, son resistentes a los antibióticos,


antimicrobianos, y a la respuesta del huésped.

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Biofilm dental
El desarrollo de las bacterias habían sido estudiadas en laboratorio.

Un técnica microscópica sofisticada como el confocal scanning laser (cLSM), ,


permitió la examinación de los biofilms en su estado natural.

Vistas al microscopio las bacterias se encuentran agrupadas en microcolonias y


rodeadas por una matriz intermicrobiana.

La matriz es penetrada por canales de fluidos por donde discurren el flujo de


nutrientes, productos bacterianos como enzimas, metabolitos, y oxigeno.

Las bacterias en un biofilm se comunican entre si enviando señales químicas


(proteínas y enzimas).

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Biofilm dental subgingival

Usando el Confocal laser


scanning microscopic (cLSM),
se ha podido observar la
conformación in vivo del
biofilm dental.

Confocal laser scanning microscopic (cLSM)

Confocal laser scanning microscopic (cLSM)


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QUORUM SENSING

Detección de células sésiles en un biofilm "habla" entre sí mediante quórum


sensing de las microcolonias y mantener los canales de agua abiertos.
Fuente: Centro para la ingeniería de Biofilm, Montana State University-
Bozeman

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Estructura del biofilm o biopelìcula

El biofilm esta compuesto por bacterias, que


representan un 15% – 20% del volumen
matriz o glicocalix, que representaría el 75% -
80%.

La matriz o glicocalix, está compuesta por


una mezcla de exopolisacáridos, proteínas,
sales minerales y material celular.

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Las bacterias en el centro de la
microcolonia pueden vivir en un
ambiente estrictamente anaeróbico,
mientras que otras bacterias
cercanas al canal de los fluidos
viven en un ambiente aeróbico.

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Los canales de fluidos proveen
nutrientes y oxigeno a las
microcolonias, y a la vez
productos y enzimas de origen
bacteriano salen de la
estructura del biofilm.

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Formación del biofilm dental

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BIOFILM DENTAL SUBGINGIVAL
El medio en que se forma, existe el fluido
gingival, células epiteliales descamadas,
ausencia de oxígeno y leucocitos.

Los m. o. tienen como substrato al fluido


gingival y coexisten con los PMNs.

La microbiota es diferente a la supragingival.

La forma del surco ó de la bolsa alberga gran


cantidad de m. o. y también dificultan su
eliminación.

Se piensa que la fibronectina favorece la


adhesión bacteriana.

Las lectinas (proteínas adheridas a un


carbohidrato) inhiben la adhesión bacteriana a
la célula epitelial.

Tiene dos interfases: biofilm dental / diente y


biofilm dental / epitelio.

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Relación entre biofilm dental y hueso alveolar

La distancia entre el borde del


cálculo dentario y la cresta alveolar
del hueso alveolar en humanos es
constante teniendo una media de
1.97 m.m.

Se indica que las bacterias capaces


de producir actividad de reabsorción
ósea, no pasa de 2.7 m.m.

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Más de 500 especies de biofilm colonizan la boca del ser humano, causando
caries dental, enfermedades gingivales y periodontales. Esta imagen ha sido
tomada por un microscopio de escaneo electrónico.
Fuente: University of Wisconsin-Madison, Department of Bacteriology

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Biofilm dental subgingival

Se aprecia la colonización microbiana


en el surco gingival.
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Biofilm dental subgingival
En la interfase placa / diente hay m. o.
Gram positivos y Gram negativos.

Microorganismos Gram+s:
- Streptococcus mitis.
- Streptococcus sanguis.
- Eubacterium.
- Actinomyces viscosus.
- Actinomyces naeslundii. Porfiromona gingivalis
- Proprionibacterium.
- Bacterionema natruchotii.
- Otras especies.

Microorganismos Gram- s:
Porfiromonas gingivalis y Agregattibacter
actinomycetemcomitans (Aa).

Hay una línea de separación entre la porción Agregattibacter actinomycetemcomitans (Aa)


más apical de la PB y el EU (placa frontal).
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Otros microorganismos

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Invasión bacteriana al conectivo subyacente
Primeros reportes: invasión de
espiroquetas (medianas y grandes) al
tejido conectivo, en la GUN.

Posteriormente, se comprobó invasión


bacteriana en la Gingivitis (al tejido
conectivo), en la Periodontitis Crónica
avanzada y la Periodontitis Agresiva (en
pared lateral de la bolsa periodontal).

Microscópicamente se observa invasión


bacteriana a los espacios intercelulares
del estrato espinoso (cocos, bacilos,
filamentos y espiroquetas) y se ven
acumulados en la lámina basal.

La lámina basal se encuentra


interrumpida y en éstas condiciones, las
bacterias podrían ganar acceso a través
de la ulceración epitelial (por medio de
los túneles que dejan los leucocitos).

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Invasión bacteriana al conectivo subyacente
Se han observado bacterias en el tejido conectivo
Cálculo dentario
y superficie del hueso alveolar.
Biofilm dental

PMN
Eliminando
Bacterias
Los microorganismos identificados “invadiendo” al invasoras
tejido conectivo, al epitelio del surco ó al epitelio
de la bolsa periodontal son: PMN
- Espiroquetas: GUN, Periodontitis Crónica
avanzada, y Periodontitis Agresiva.
- Micoplasma: Periodontitis Crónica avanzada
y Periodontitis Agresiva.
- Agregattibacter actinomycetemcomitans (Aa)
y Capnocitofaga ochracea: Periodontitis
Agresiva.

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Especificidad bacteriana
En la actualidad se reconoce el factor etiológico específico
en la enfermedad periodontal.

También, la variación de la población bacteriana en las


diferentes enfermedades periodontales.

Socransky y Slots, desarrollaron el concepto


especificidad bacteriana (bacterias específicas para
enfermedades específicas).

Sintomatología similar pero etiología bacteriológica


diferente, lo que daría un diagnóstico clínico y de
laboratorio más preciso.

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ACTUALMENTE, EL CONTROL DE LA BIOPELÍCULA DENTAL,
SIGUEN SIENDO CON EL CEPILLADO DENTAL, HILO DENTAL Y
LAS SOLUCIONES Y PASTILLAS REVELADORAS.
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