MEDIOS DE CULTIVO

Primera parte

Microbiología General
Universidad Nacional de San Luis
Agosto 2013
Clasificación de los microorganismos según la fuente de
energía y carbono

Fuente de energía Fuente de carbono Categoría Ejemplos de

microorganismos

Luz CO2 Fotoautotrofos Algas, bacterias ro-

jas y verdes,
cianobacterias.

Luz comp. Fotoheterotrofos Bacterias rojas y

orgánicos verdes
sencillos

Reacciones CO2 Quimioautotrofos Bacterias y Archae

de óxido-reducc.
entre comp. inorg.

Reacc. comp. Quimioheterotrofos Hongos,

de óx-reducc. orgánicos protozoos,
entre comp. org. complejos bacterias
PROCARIOTAS
Bacterias Hongos y levaduras

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Cianobacterias Protozoos
 CONDICIONES QUÍMICAS
1.Elementos energéticos y constitutivos:
a) Macroelementos

Fuente de carbono
Fuente de nitrógeno
Fuente de fósforo
Fuente de azufre
Fuente de calcio, magnesio y potasio
Fuente de sodio
Fuente de Fe

b) Microelementos o trazas: Cr, Co, Cu, Mn, Mo, Ni,

Au, Ag, Cd, Cr, Pb
c) Factores de crecimiento

2. Agua
3. Agentes solidificantes: agar, gelatina, agarosa, silicagel,
albúmina
Factores de crecimiento

A ---- B ---- C ---- Histidina No es factor de

crecimiento

A ---- B --X-- ….. ---- ……. Es factor de crecimiento

Ejemplos: *vitaminas, como las del complejo B

*algunos aminoácidos
*purinas y pirimidinas
CONDICIONES FÍSICAS

•Temperatura

• pH

•Humedad

•Luz

•Requerimientos de O2
Requerimientos de O2

a. Aerobios estrictos

b. Anaerobios obligados

c. Anaerobios facultativos

d. Microaerófilos

e. Anaerobios aerotolerantes
 Medio para fototrofos
(sintético o químicamente definido)

CO2 ………………… burbujeo continuo

KNO3 ……………. 1 g/l
MgSO4 …………… 0.5 g/l
KH2PO4 …………… 0.035 g/l
Trazas …………….. 10-4 - 10 -5 g/l
(NaVO3, NiSO4, ZnCl2, H3BO3,….., etc)
H2O ………………………… 1000 ml
solidificante ??

Exponer a la luz solar o artificial.

 Medio de cultivo sintético para quimioorganotrofos

Medio de cultivo C (sintético o químicamente definido)

K2HPO4 .......................................................................................................... 0.6 g
KH2PO4 …………………………………………………………………………… 0.6 g
NH4Cl ……………………………………………………………………………… 3 g
MgSO4 …………………………………………………………………………… 0.1 g
Glucosa …………………………………………………………………………… 25 g
Acetato sódico …………………………………………………………………… 20 g
Aminoácidos (alanina, arginina, asparagina, aspartato, cisteína, glutamato,
glutamina, glicina, histidina, isolaeucina, leucina, lisina, metionina, fenilala-
nina, prolina, serina, treonina, triptófano, tirosina, valina) ……… 100-200 µg c/u
Purinas y pirimidinas (adenina, guanina, xantina, uracilo) ………….. ….10 mg c/u
Vitaminas (biotina, folato, ácido nicotínico, piridoxal, piridoxamina,
riboflavina, tiamina, pantotenato, ácido p-aminobenzoico) …..……0.01- 1 mg c/u
Elementos traza (Fe, Co, Mn, Zn, Cu, Ni, Mo) ………………………..... 2-10 µg c/u
Agua destilada …………………………………………………………………. 1000 ml
pH 7
 Para QUIMIOOGANOTROFOS
Medio de cultivo A Medio de cultivo B
(sintético o quimícamente (complejo o natural)
definido)

K2HPO4 ............ 7 g
KH2PO4 ……… 2 g Extracto de carne ….. 3 g
(NH4)2SO4 …… 1 g Peptona ……………. 5 g
MgSO4 ……… 0.1 g NaCl ………………… 5 g
CaCl2 ……….. 0.02 g Agua dest. ……. 1000 ml
Glucosa ……. 4-10 g
Trazas: pH 7
Fe, Co, Mn, Zn,
Cu, Ni, Mo) …….... 2-10 µg c/u
Agua destilada …….. 1000 ml
pH 7
 PEPTONAS

Producto de la hidrólisis de proteínas:

mezcla
Peptona:
Proteína de
origen vegetal o Hidrólisis mezcla
animal ácida o de aa y
enzimática péptidos.

Sólo para QUIMIOORGANOTROFOS

-Fuente de nitrógeno
-Fuente de carbono y energía, cuando no hay
azúcares en el medio de cultivo
EXTRACTOS Factores de
crecimiento

-de carne: concentrado de componentes hidrosolubles de

la carne.
-de levadura: producto de lisis ácida o enzimática de
levaduras
-de malta: producto de cebada malteada, reemplaza al
extracto de levadura

Sólo para QUIMIOORGANOTROFOS

-aportan factores de crecimiento,
especialmente vitaminas.
Agar nutritivo

(para bacterias quimioorganotrofas)

Peptona de carne ………….. 0.5 g

Extracto de carne ………….. 0.3 g
NaCl ………………………… 0.5 g
Agar ……………………… 1.5 – 2 g
Agua destilada ……………. 100 ml
 CLASIFICACION DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

-por origen: - sintético o químicamente definido

fórmula química exactamente conocida

- natural o complejo
fórmula química no se conoce con exactitud

-por consistencia: - líquido (sin agar)

-sólido (con agar: al 0.3% semisólido
al 1.5 – 2% sólido)
-por su composición:

- comunes: AGAR NUTRITIVO

-peptona de carne
-extracto de carne
-NaCl
-agar 2%
-agua destilada
AGAR SANGRE
- enriquecidos:
Por su función:

-de transporte: - medio de Stuart

- medio de Cary Blair

Contiene buffer + sustancias criopresevantes (glicerol)

Por su función:
- de enriquecimiento (líq.) - selectivos (sólidos)

Caldo Mac Conkey

(inhibidor + lactosa +
púrpura de bromocresol Agar Mac Conkey
(inhibidor + lactosa + rojo neutro)
Por su función:

-diferencial

Fermentación de.
-glucosa ?
-sacarosa ?
-lactosa ?
Producción de H2S ?

El medio incluye los 3

azúcares, sal de Fe2+
y un indicador de pH
Enterobacter (rojo neutro)
Shigella Pseudomonas
Proteus

Agar triple azúcar hierro (TSI)