La Histotecnología, el

arte de pintar
microscópicamente
HISTOTECNOLOGÍA
MÉTODO HISTOLÓGICO
1.- Toma de muestra
2.- Fijación
3.- Inclusión
4.- Microtomía
5.- Coloración
TOMA DE MUESTRA
 TIPOS DE MUESTRA

• ESTUDIO HISTOLÓGICO
• ESTUDIO PATOLÓGICO
ESTUDIO PATOLÓGICO

• BIOPSIAS
• NECROPSIAS
TIPOS DE BIOPSIAS

• ESCISIONAL
• INCISIONAL
* B. A.
- A. G.
- A. F.
BIOPSIA ESCISIONAL

• Ganglio
• Mama
• Bazo
• Útero
BIOPSIA INCISIONAL
• Piel (punch)
• Gástrica
• Músculo
• Cérvix
• Estereotáxica
PUNCH
B. A. A. F.
B. A. A. F.
B. A. A. G.
¿Quién obtiene la muestra?
• 1° El médico especialista
• 2° El Anátomo-patólogo
 ENVIO DE LAS
MUESTRAS
• Lo ideal es que las muestras
lleguen lo más antes posible al
Laboratorio de Patología y sin
fijador.
 ¿PORQUE DEBEN
LLEGAR SIN FIJADOR?
• Congelación
• Impronta
• M.O.A.R.
• Fotografía
Congelación
Impronta
M.O.A.R.
Fotografía
Mama
ENVIO DE LA MUESTRA

• Si la muestra no puede ser

remitida de inmediato,
conservarla con un fijador.
¿CÓMO DEBEN LLEGAR
LAS MUESTRAS?

• 1° En un envase de boca
ancha. Rotulado con el
nombre del paciente y el
tejido enviado.
¿CÓMO DEBEN LLEGAR
LAS MUESTRAS?
• 2° Deben traer una solicitud
de estudio anatomopatológico
con los siguientes datos:
 SOLICITUD:
• Nombre, edad, sexo, N° H.C.
• Servicio de origen
• Hallazgos operatorios
• Dx. Presuntivo
• Fecha de extracción
• Médico solicitante
¿CÓMO DEBEN LLEGAR
LAS MUESTRAS?
• 3° El recepcionista debe
verificar que los datos estén
completos y que coincidan los
datos del frasco y de la
solicitud.
¿CÓMO DEBEN LLEGAR
LAS MUESTRAS?
• 4° Si la muestra llega con
líquido, verificar que sea un
fijador, de lo contrario
anotarlo en la solicitud.
 LAS MUESTRAS
ACEPTADAS
• 5° Colocarle un número
correlativo y registrarlo en el
cuaderno de recepción.
 MACROSCOPIA

• Es la descripción de cómo se
ve una muestra a simple vista
para anotar sus
características morfológicas.
MACROSCOPIA
• Forma
• Tamaño
• Peso
• Color
• Volumen, etc.
P
a
t
o
l
o
g
í
a
F
o
r
e
n
s
e
MACROSCOPIA

• Obtención de partes
representativas.
FIJACIÓN
¿Qué es fijar?
 • Es detener los procesos
metabólicos de las células para
preservar sus características
morfológicas.
 • La fijación altera la
composición química original
de los tejidos.
 FIJACION
• Preserva la morfología
• Aumenta la dureza del tejido
• Destruye los gérmenes
• Interrumpe los procesos
enzimáticos
CLASIFICACION DE LOS
FIJADORES
• 1.- Por el Nivel de Estudio
• 2.- Por su Naturaleza
Por el nivel de estudio:
• A) Anatómicos
• B) Histológicos
• C) Citológicos
Por su naturaleza:

• A) Físicos
• B) Químicos
Fijadores Físicos:

• Calor
• Frío
• Desecación
Frío:

• La congelación.
 Calor:

• Microbiología
Desecación: • Hematología
 Fijadores Químicos

• Sustancias orgánicas o
inorgánicas, que actúan
básicamente sobre las
proteínas.
CLASIFICACIÓN DE LOS
FIJADORES QUÍMICOS
 Por el número de
componentes:

• A) Fijadores Simples
• B) Fijadores compuestos
 Fijadores simples:
• Sustancias que se usan en
soluciones acuosas o
alcohólicas estas a su vez
pueden ser:
Fijadores simples:

• 1.- Coagulantes
• 2.- No coagulantes
Fijadores simples coagulantes:
• Alcohol

• Dicloruro de mercurio
(HgCl2)

• Ácido pícrico
Fijadores simples no coagulantes:
• Formol

• Ácido acético

• Dicromato de potasio
(K2Cr2O7)
OXIDANTES REDUCTORES
Tetróxido de osmio Formaldehído
Oxido crómico Glioxal
Acido acético Glutaraldehído
Acido pícrico Metanol
Bicloruro de mercurio Etanol
Dicromato de potasio Paraldehído
Acetona Acroleína
 MECANISMO DE ACCION FIJADORES

POR DESHIDRATACION ALCOHOL, ACETONA, CLOROFORMO

DICLORURO DE MERCURIO, ACIDO

FORMACION DE SALES PICRICO, DICROMATO DE POTASIO,
ACETATO DE URANILO

RETICULIZACIÓN FORMOL, TERAOXIDO DE OSMIO

 Fijadores compuestos:

• Mezcla de fijadores simples,

donde cada cual debe actuar
independientemente para
completar la acción o atenuar
el defecto.
Fijadores compuestos:
• Zenker
• Bouin (colágeno)
• Regaud (mitocondrias)
• Carnoy (amiloide)
• Dafano (ap. Golgi)
CARACTERISTICAS DE
UN BUEN FIJADOR
• Penetración rápida
• Reacción rápida
• No endurecer en alto grado
• No producir retracción
• No alterar la coloración
 ALCOHOL
• Coagulante
• 95 - 100 %
• No aditivo
• Levemente reductor
• Deshidratante
 FORMOL

• No coagulante
• 10 - 15 %
• Aditivo
• Fuertemente reductor
• Forma puentes
• ¿Cómo lograr una buena
fijación?
• 1° Rapidez
• 2° Tejido delgado
• 3° Abundante fijador
• 4° Tiempo adecuado
Tiempo
• Por defecto
• Por exceso
 Tiempo
• Por defecto
- Pérdida de componentes
- Pérdida de antígenos
- Perdida de estructuras
- Necrosis, putrefacción
Defecto de fijación:
Defecto de fijación:
• Por exceso (sobrefijación)
- Formol: basófilo, pigmento
- Alcohol: Retracción
- Acido pícrico: acidófilo
Formol
Retracción
Fijadores ácidos
 Fijación adecuada
• Morfología adecuada
• Tinción adecuada
• Conservación adecuada de
sustancias
Morfología adecuada
Tinción adecuada
Sustancias conservadas
TIPOS DE FIJACION QUÍMICA

• Por inmersión
• Por perfusión
Inmersión

Perfusión
 Elección del fijador

• En función de lo que se quiere

observar
• GLICÓGENO, COMPONENTES
INORGÁNICOS: Alcohol
• F. COLAGENAS: F. pícricos
• AP. GOLGI: Sales metálicas (Ag, Co)
• MITOCONDRIAS: F. Crómicos
 COLORACION
Histotecnologia
MICROTOMIA
TOMA DE MUESTRA Pasos

INCLUSION
Para
FIJACION
RAPIDEZ
INVESTIGACION
HISTOLOGICO
TEJIDO DELGADO
preserva ideal
PATOLOGICO
ABUNDANTE FIJADOR
CARACTERISTICAS
MORFOLOGICAS
puede ser
TIEMPO ADECUADO

usa
NECROPSIAS BIOPSIAS
PENETRACION RAPIDA

FIJADORES
puede ser REACCION RAPIDA
ideal

puede ser NO ENDURECER

ESCICIONAL INCICIONAL

FISICOS QUIMICOS NO RETRAER

NO AFECTAR LA COLORACION

COAGULANTES NO COAGULANTES