January 2,

2020 Regional de Rosario

Facultad
TEMA 2

Biomoléculas Cátedra de
Biotecnología
Prof. Adj. Ord.:
Dr. Ing. Germán Campetelli
J. T. P.: Ing. Marta Ortega
Aux. 1º Ing. Pablo Garibaldi

1 Cátedra de Biotecnología
 2 January 2, 2020

Tema 2/3: Biomoléculas - Enzimas

 Bioelementos
 Hidratos de carbono (Glúcidos)
 Lípidos
 Aminoácidos
 Proteínas
 Enzimas
 Vitaminas
 Nucleótidos
 Ácidos nucleicos
Cátedra de Biotecnología
 3 January 2, 2020

Tema 2/3: Acs. Nucléicos - Enzimas

 ADN
 ARN
 ElCódigo Genético
 La expresión de los genes y la síntesis de
proteínas

Cátedra de Biotecnología
 4 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas
• Son moléculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones
químicas, siempre que sean termodinámicamente posibles.
• Las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos, las
cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas
productos.
• A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones
enzimáticas.
• Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que
ocurran a unas tasas significativas.
• Las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos.

Cátedra de Biotecnología
 5 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas

• El conjunto de enzimas presentes en una célula determina el tipo de

metabolismo que tiene esa célula.
• A su vez, esta presencia depende de la regulación de la expresión
génica correspondiente a la enzima.
• Las enzimas son generalmente proteínas globulares que pueden
presentar tamaños muy variables, desde 62 aminoácidos hasta los
2500.
• Las actividades de las enzimas vienen determinadas por su estructura
tridimensional.
• Solo una pequeña parte de la enzima (alrededor de 3 a 4
aminoácidos), centro activo, está directamente involucrada en la
catálisis.
• Algunas enzimas, llamadas enzimas alostéricas poseen dos sitios
activos.

Cátedra de Biotecnología
 6 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas
• Las enzimas son estructuras bastante flexibles y así el sitio activo
podría cambiar su conformación estructural por la interacción
con el sustrato.

Cátedra de Biotecnología
 7 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas
• Las enzimas son estructuras bastante flexibles y así el sitio activo
podría cambiar su conformación estructural por la interacción
con el sustrato. Otros factores:
• pH
• Temperatura
• Concentración de sustrato
• Concentración de sales
• Concentración de enzima
• Inhibidores/Activadores

Cátedra de Biotecnología
 8 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas
• La velocidad de la reacción va aumentando a medida que
aumenta la concentración de sustrato hasta que la enzima se
satura.

Cátedra de Biotecnología
 9 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas

• Como cualquier catalizador químico, basta una pequeña

cantidad de enzima para producir una enorme aceleración de
la reacción que cataliza.

• Estado pre estacionario (ms): el inicio de la rx. conlleva una

variación en la concentración de enzima libre, así como en la
concentración de cualquier otro intermediario que pueda
formarse durante la rx.

• Estado estacionario: la velocidad de la rx. no varía con el

tiempo. Cátedra de Biotecnología
 10 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas

• Estado pre estacionario (ms): el inicio de la rx. conlleva una

variación en la concentración de enzima libre, así como en la
concentración de cualquier otro intermediario que pueda
formarse durante la rx.

• Estado estacionario: la velocidad de la rx. no varía con el

tiempo. Cátedra de Biotecnología
 11 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas
• La velocidad de la reacción va aumentando a medida que
aumenta la concentración de enzima.

E4 > E1

Cátedra de Biotecnología
 12 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas
• Modelo de Michaelis – Menten: [𝑺]
𝒗 = 𝒗𝒎
𝑲𝑴 + [𝑺]

Donde:

• 𝑣 es la velocidad
inicial a una [S]
dada.
• 𝑣𝑚 es la velocidad
inicial a una
concentración
saturante de S.
• 𝐾𝑀 es la constante
de Michaelis-
Menten.

Cátedra de Biotecnología
 13 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas – Modulación Alostérica

• En las enzimas alostéricas, en un sitio se une el sustrato, mientras
en el otro, también conocido como sitio alostérico se unirá un
efector el cual producirá un cambio en la proteína, llevándonos
a una regulación de la actividad de ésta.

Forma tensa (T) Forma relajada (R)

Cátedra de Biotecnología
 14 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas – Regulación positiva

• Un cofactor es una parte funcional de una enzima, es un

componente no proteico, termoestable y de baja masa molecular.
• La parte proteica de la enzima se denomina apoenzima.
• El cofactor, en general, se une a la apoenzima por enlaces no
covalentes.
• Cofactores inorgánicos: Fe2+, Cu2+, K+, Mn2+, Mg2+.
• Cofactores orgánicos: grupos prostéticos y coenzimas.
• Un grupo prostético se une fuertemente a la apoenzima.
• Las coenzimas se unen débilmente: por lo general son
vitaminas.

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 15 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas – Regulación positiva

Cátedra de Biotecnología
 16 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas – Regulación negativa

• Los inhibidores son moléculas que regulan la actividad

enzimática, inhibiendo su actividad.
• Pueden clasificarse en:
• Reversibles,
• Irreversibles, se unen covalentemente (penicilina, aspirina).

Cátedra de Biotecnología
 17 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas – Regulación negativa

• Los inhibidores son moléculas que regulan la actividad

enzimática, inhibiendo su actividad.
• Pueden clasificarse en:
• Reversibles,
Inhibición competitiva Inhibición no competitiva

Inhibición acompetitiva Inhibición mixta

Cátedra de Biotecnología
 18 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas - Clasificación

El nombre de una enzima suele derivarse del sustrato o de la reacción
química que cataliza, con la palabra terminada en -asa.
Oxidorreductasas: catalizan reacciones de oxido-reducción. Precisan la colaboración de las
coenzimas de oxido-reducción (NAD+, etc.) que aceptan o ceden los electrones
correspondientes.

Transferasas: transfieren grupos activos (obtenidos de la ruptura de ciertas moléculas) a otras

sustancias receptoras. Ejemplos: transaminasas, quinasas (grupos fosfato).

Hidrolasas: catalizan reacciones de hidrolisis con la consiguiente obtención de monómeros a

partir de polímeros. Ejemplos: glucosidasas, lipasas, amilasas.

Liasas: catalizan reacciones en las que se eliminan grupos H2O, CO2 y NH3 para formar un
doble enlace o añadirse a un doble enlace. Ejemplos: descarboxilasas.

Isomerasas: actúan sobre determinadas moléculas obteniendo o cambiando de ellas sus

isómeros funcionales o de posición. Ejemplo: mutasas, glucosa-6-fosfato isomerasa, etc.

Ligasas: son aquellas enzimas que catalizan la unión de dos moléculas a partir de la
formación de enlaces covalentes acompañado por la hidrolisis del ATP.

Cátedra de Biotecnología
 19 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas - Usos

Amilasas y glucosa isomerasa: la amilasa cataliza la degradación del almidón
en azúcares sencillos, la glucosa isomerasa transforma glucosa en fructosa.
Producción de jarabe de maíz.

Proteasas: los fabricantes de galletitas las usan para disminuir el contenido

proteico de las harinas.

Celulasas, pectinasas: se utilizan para el aclarado de jugos de fruta.

Renina/Quimosina: producción de queso, hidroliza proteínas.

Lipasas: se introducen durante el proceso de producción del queso Roquefort

para favorecer la maduración.

Lactasas: rotura de la lactosa en glucosa y galactosa.

Papaína: ablandamiento de la carne utilizada para cocinar.

Cátedra de Biotecnología
 20 January 2, 2020

TEMA 3: Enzimas - Usos

Amilasas, xilanasas, celulasas y ligninasas: utilizadas en la industria del papel.

Amilasas, proteasas, celulasas y lipasas: utilizadas en los detergentes o jabones

para lavar la ropa.

Celulasas: utilizadas por la industria de biocombustibles para degradar celulosa

en azucares fermentables.

Ficina: es una proteasa utilizada por la industria fotográfica para disolver la

gelatina en las películas fotográficas que utilizan.

Enzimas de restricción, ADN ligasa y polimerasas: la biología molecular las utiliza

para manipular el ADN mediante ingeniería genética. Muy importantes para la
técnica conocida como Reacción en cadena de la polimerasa o PCR
(Polymerase Chain Reaction), la cual sirve para obtener múltiples copias iguales
de un fragmento de ADN en particular.

Cátedra de Biotecnología
 21 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Vitaminas

Vita: vida, amina

• Son compuestos heterogéneos.

• La mayoría de las vitaminas esenciales no pueden ser sintetizadas por el organismo.

• Las vitaminas son nutrientes que actúan como catalizadoras de todos los procesos
fisiológicos (directa e indirectamente).

• Las vitaminas son precursoras de coenzimas, grupos prostéticos de las enzimas.

Se pueden clasificar en:

• Hidrosolubles, presentes en animales, plantas y microorganismos, contienen N (salvo la

C): B1 (tiamina), B2 (riboflavina), B3 (niacina o acido nicotínico), B5 (acido pantoténico),
B6 (piridoxina), B7/B8 (biotina), B9 (acido fólico), B12 (cobalamina) y C (acido ascórbico).

• Liposolubles, solo presentes en los animales, no contienen N: A (retinol), D (calciferol), D2

(ergocalciferol), D3 (colecalciferol), E (tocoferol), K1 (filoquinona), K2 (menaquinona) y K3
(menadiona).
Cátedra de Biotecnología
 22 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Vitaminas

Vita: vida, amina

• Son compuestos heterogéneos.

Cátedra de Biotecnología
 23 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Ácidos Nucleicos

Formados por 3 moléculas:

Pentosa Grupo fosfato

Bases nitrogenadas

Bases Púricas

Bases Pirimidínicas

Cátedra de Biotecnología
 24 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Bases Nitrogenadas

Bases Pirimidínicas Bases Púricas

Cátedra de Biotecnología
 25 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Nucleósidos

Base + Azúcar
Nitrogenada Nucleósido

Cátedra de Biotecnología
 26 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Nucleósidos

La unión base-pentosa se efectúa a través de un enlace

glicosídico, con configuración beta (β) entre el carbono 1 de
ribosa o desoxirribosa, y un nitrógeno de las base, el 1 en las
pirimidinas, y el 9 en las purinas, con la pérdida de una
molécula de agua.

Cátedra de Biotecnología
 27 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Nucleósidos

Desoxiribosa: desoxiribonucleósido Ribosa: ribonucleosido

Cátedra de Biotecnología
 28 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Nucleótido

Nucleósido + Grupo fosfato Nucleótido

Los nucleótidos son

los ésteres fosfóricos
de los nucleósidos.
Están formados por
la unión de un grupo
fosfato al OH del
carbono 5’ de una
pentosa. A su vez la
pentosa lleva unida
al carbono 1’ una
base nitrogenada.

Cátedra de Biotecnología
 29 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Nucleótido

Nucleósido + Grupo fosfato Nucleótido

Aunque la ribosa
tiene tres posiciones
(OH) en las que se
puede unir el fosfato
(2’, 3’ y 5’), y en la
desoxirribosa dos (3’
y 5’), los nucleótidos
naturales más
abundantes son los
que tienen fosfato
en la posición 5’.

Cátedra de Biotecnología
 30 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Nucleótidos – Nomenclatura

Importante!

Se produce durante la foto-respiración y la

respiración celular, y es consumido por muchas
enzimas en la catálisis de numerosos procesos Cátedra de Biotecnología

químicos.
 31 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Nucleótidos – Nomenclatura

Cátedra de Biotecnología
 32 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Ácidos Nucleicos

Aminoácidos Proteínas

Nucleótidos Ácidos Nucleicos

(ADN – ARN)

Cátedra de Biotecnología
 33 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Ácidos Nucleicos

Componente ARN/RNA ADN/DNA

Ácidos Fosfórico Fosfórico
Azucares D-Ribosa D-2-desoxirribosa
Adenina(A) Adenina (A)
Purinas
Guanina (G) Guanina (G)
Citosina (C) Citosina (C)
Pirimidinas
Uracilo (U) Timina (T)

Cátedra de Biotecnología
 34 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Ácidos Nucleicos – Estructura 1°

Polímeros de nucleótidos formados por enlaces fosfodiester, que unen
los C 5´y 3´de los azucares de nucleótidos adyacentes.

La secuencia de bases se lee en sentido

5´ → 3´ y constituye la estructura primaria
de un oligonucleótido o ácido nucleico. Cátedra de Biotecnología
 35 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Ácidos Nucleicos – Estructura 2°

Es una estructura en doble hélice. Ambas cadenas son anti-paralelas.

Es una cadena doble,

dextrógira o levógira, según el
tipo de ADN. Ambas cadenas
son complementarias, pues la
Adenina de una se une a la
Timina de la otra, y la Guanina
de una a la Citosina de la otra.
Estas bases enfrentadas son las
que constituyen los Puentes de
Hidrógeno.
A→T
C→G
El contenido de purina es el
mismo que el de pirimidina.

Cátedra de Biotecnología
 36 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Ácidos Nucleicos

Estructura Terciaria: el ADN se halla retorcido sobre sí mismo. Esta
disposición se denomina ADN Superenrollado, y se debe a la acción de
enzimas denominadas Topoisomerasas-II. Este enrollamiento da
estabilidad a la molécula y reduce su longitud.

Esta estructura varía según se trate

de organismos procariontes o
eucariontes. Las formas plegadas
están asociadas a proteínas (histonas
y protaminas las mas importantes).

Nucleosomas = Histonas + ADN

Estructura Cuaternaria:
Cromosomas
Cátedra de Biotecnología
 37 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Ácidos Nucleicos: ARN

Estructura Primaria Cátedra de Biotecnología

 38 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Ácidos Nucleicos: ARN

Estructura Terciaria
Estructura Secundaria Es un plegamiento complicado
Hay apareamiento de sobre la estructura secundaria
bases adquiriendo una forma
tridimensional.
Cátedra de Biotecnología
 39 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – Ácidos Nucleicos: ARN

Existen 3 tipos principales de ARN, los cuales están implicados en la

síntesis de proteínas dentro de la célula:
• ARN mensajero (ARNm): lleva la información sobre la secuencia de
aminoácidos de la proteína desde el ADN, lugar en que está inscrita,
hasta el ribosoma, lugar en que se sintetizan las proteínas de la célula.
• ARN de transferencia (ARNt): transfiere un aminoácido específico al
polipéptido en crecimiento; se unen a lugares específicos del
ribosoma durante la traducción.
• ARN ribosomal (ARNr): se halla combinado con proteínas para formar
los ribosomas, donde representa unas 2/3 partes de los mismos. Los
ARN ribosómicos son el componente catalítico de los ribosomas; se
encargan de crear los enlaces peptídicos entre los aminoácidos del
polipéptido en formación durante la síntesis de proteínas; actúan,
pues, como ribozimas.

También existen otros tipos de ARN: con actividad catalítica o de

regulación.

Cátedra de Biotecnología
 40 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – el Código Genético

Cátedra de Biotecnología
 41 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – el Código Genético

En ADN U reemplaza a T, entonces inicia ATG.

Cátedra de Biotecnología
 42 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – la Expresión de los Genes

Cátedra de Biotecnología
 43 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – la Expresión de los Genes

Cátedra de Biotecnología
 44 January 2, 2020

TEMA 2: Biomoléculas – la Expresión de los Genes

https://youtu.be/gG7uCskUOrA
Cátedra de Biotecnología
From DNA to protein – 3D