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Primera etapa
en la primera el anticuerpo se une por uno de sus extremos a un eritrocito
Segunda etapa
el resultado son fuerzas intermoleculares débiles del tipo de los puentes de hidrógeno.
Factores que afectan la aglutinación
pH, la fuerza iónica y la temperatura del medio en que se encuentran suspendidas las células,
hacen más fácil o más difícil su unión, y condicionan su separación.
Hay anticuerpos que provocan la aglutinación más fácilmente a 37°C y por ello se llaman aglutininas
calientes; otros actúan mejor a 4°C (aglutininas frías). Y aún hay anticuerpos que habiéndose unido a su
antígeno en un medio frío, se separan de él cuando la temperatura se eleva.
Potencial Z
Otro factor, que tiene que ver con la segunda etapa de la aglutinación, es el espacio que existe entre un
eritrocito y otro, porque los hematíes no mantienen un contacto íntimo; los separa una capa de iones cargados
eléctricamente que se encuentra a su alrededor, que les acompaña en sus desplazamientos
suero de Coombs: el suero que contiene anticuerpos anti globulina humana, se llama así en honor a su
descubridor. se prepara inyectando a un conejo globulinas humanas, contiene numerosos anticuerpos de diversa
especificidad. Ha podido lograrse su fraccionamiento: se cuenta ya con un suero de Coombs anti IgG, que
solamente une anticuerpos IgG; otro IgM; otros dirigidos contra algunos de los factores del complemento, etc.
• Dentro del sistema ABO, normalmente, en estado de salud hay iso-anticuerpos que son conocidos como
“naturales”. Dichos anticuerpos invariablemente se presentan en la especie humana, aunque no existen
en el momento del nacimiento, sino algunos meses después.
• La regla invariable dice que todo humano debe poseer anticuerpos naturales del
sistema ABO dirigidos contra los antígenos que no presentan sus eritrocitos
Los anticuerpos naturales del sistema ABO son completos, IgM, de alto peso molecular, aglutinan a los eritrocitos
en solución salina y no pueden atravezar la placenta.
Pruebas pre transfusionales
• Siempre que se utilicen eritrocitos para cualquier estudio en un banco de sangre deben
ser lavados tres veces para enfrentarlos a los anticuerpos
• La concentración final de eritrocitos a la que debe trabajarse es de 2.5 a 4.0 por ciento
• Después de lavar todas las células se debe corroborar que cada una de ellas tenga la
misma concentración, ya que una variación entre cada tubo dará resultados diferentes
al enfrentarlas a los anticuerpos en estudio.
• Las temperaturas de incubación y los tiempos deben ser los adecuados para cada
técnica.
Pruebas cruzadas
1. Prueba mayor (D) o del DONADOR:
Se realiza con 2 gotas de suero o plasma del donador más 1 gota de eritrocitos del
receptor.
a) Permite detectar una prueba de antiglobulina directa positiva, así como la presencia
de rouleaux y otras anormalidades autoinmunes (AHAI).
Se realiza con 1 gota de eritrocitos del receptor más 2 gotas de suero del receptor.
Detección de anticuerpos libres en suero:
se realiza enfrentando el suero del paciente o receptor con eritrocitos de fenotipo conocido
(PANEL).
La investigación de anticuerpos irregulares libres en suero se debe realizar por lo menos con dos
técnicas:
La primera siempre será la salina llevada hasta la fase de Coombs, ya que en la mayoría de
los casos permite diferenciar la IgM en su fase rápida a 22 y 37 °C de la IgG en la fase de
Coombs
La segunda puede ser un medio hiperproteico como albúmina, o enzimas como bromelina o
LISS, siendo esta última la más eficaz
A) Anticuerpos negativos y prueba cruzada compatible.
Una detección de anticuerpos negativa no garantiza que el suero se encuentre libre de anticuerpos
eritrocitarios clínicamente significativos, sólo indica que no contiene anticuerpos reactivos. Tampoco
una prueba cruzada compatible indica una supervivencia eritrocitaria normal, por ello debe
realizarse conjuntamente con un tamiz para anticuerpos, o bien diferentes técnicas tanto para
anticuerpos como pruebas cruzadas
Se puede presentar cuando la concentración del anticuerpo es muy baja y sólo se detecta con células
frescas, también ocurre cuando las células del panel de eritrocitos de fenotipo conocido no tienen el
antígeno de la población en estudio.