Replicación del

ADN

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicación del 1

1 material genético
 Posibles modelos de replicación

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicación del 2

2 material genético
 Replicación del DNA
•Semiconservativa: una cadena sirve de molde para una
nueva cadena
•El experimento de M. Meselson y F. Stahl (1958)
demuestra que la replicación es semiconservativa

Mathew Meselson Frank Stahl

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Tema 6: Estructura y replicación del 3

3 material genético
Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicación del 4

4 material genético
 Replicación del DNA
•Enzimas que sintetizan (replican) el DNA
•E. coli
•DNA polimerasa I (rellena huecos y repara)
•DNA polimerasa II y III (función principal en
la síntesis)
•Añade bases en ambas cadenas en la
dirección 5’  3’
•Requiere un 3’ OH final
•Eucariotas
•5 polimerasas
• y  principal en replicación
•,  y  exonucleasas
•Corrección de pruebas: actividad 3’  5’
exonucleotídica. Sustituye bases mal emparejadas
(10-5) por correctas (10-7); mecanismos de reparación
adicionales la reducen hasta 10-10
Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicación del 5

5 material genético
 3’ 5’
Las polimerasas
conocidas añaden
nucleótidos
solamente en la
dirección 5’  3’

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicación del 6

6 material genético
Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicación del 7

7 material genético
 Adición 5’3’

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Tema 6: Estructura y replicación del 8

8 material genético
 P

P
P

P
OH

OH
P
P
P

P
5’ 3’
PP + H2O
P

P
P
OH

OH

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Tema 6: Estructura y replicación del 9

P

P
P
P

9 material genético
 Adición 3’5’
(hipotética)

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Tema 6: Estructura y replicación del 10

10 material genético
 P
P

P
P

OH
OH

P
3’ 5’

PP + H2O

P
P

P
P

OH
Adición 3’5’
OH

(hipotética)
P

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Tema 6: Estructura y replicación del 11

11 material genético
 Replicación del DNA (2)
•Replicación: continua (cadena adelantada, cebador
sólo inicio) y discontinua (cadena retrasada)

•Discontinua
•Cebador (pequeño RNA 2-60 nucleótidos
añadido por enzima primasa o RNA pol que
provee 3’ OH.
•Fragmento de Okazaki por DNA pol III
(1500 bp en procariotas y 150 en eucariotas)
•Pol I elimina cebador 3’ -> 5’ y llena huecos
(gap)
•Ligación (DNA ligasa, enlace fosfodiéster)
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Tema 6: Estructura y replicación del 12

12 material genético
Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicación del 13

13 material genético
Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicación del 14

14 material genético
 ¿Por qué el cebador es RNA?

El cebador es más proclive al error, por

lo que debería eliminarse y el RNA
puede detectarse y eliminarse
fácilmente por la DNApol I

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Tema 6: Estructura y replicación del 15

15 material genético
 Replicación del DNA (3)
El replisoma: complejo enzimático de la
replicación que coordina la síntesis de las
dos cadenas, maquinaria molecular
•Dímero de la DNA pol III (núcleos
catalíticos)
•Primosoma: formado por dos enzimas
•Primasa
•Helicasa (desenrolla el DNA)
•Proteína de unión a cadena sencilla, ssb
(Unión Y, estabiliza el DNA de cadena
sencilla)
•Topoisomerasas tipo I (rotura una cadena)
y II (rotura de dos cadenas) junto a DNA
ligasa -> Relajación del superenrollamiento
Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicación del 16

16 material genético
 El replisoma: una maquinaria de replicación extraordinaria

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicación del 17

17 material genético
 El replisoma: una maquinaria de replicación extraordinaria

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicación del 18

18 material genético
 El replisoma: una maquinaria de replicación extraordinaria

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicación del 19

19 material genético
 Topoisomerasas

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicación del 20

20 material genético
 Replicación del DNA (4)
•Origen de replicación:
•Secuencia reconocida (Ori C en E. coli) por
proteínas iniciadoras. Varios orígenes en
eucariotas
•La replicación es bidireccional

Horquilla
replicación

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Tema 6: Estructura y replicación del 21

21 material genético