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6FM2
¿Qué es?
• Es una técnica de separación de mezclas que contienen analitos o
sustancias semivolátiles ,no volátiles o que se descomponen con
calentamiento.
Fase estacionaria
Tiempo de retención
Mezcla
grande
Fase móvil
Tiempo de retención total (tr1 o tr2)
• Es el tiempo necesario para que el componente de una muestra migre
desde la entrada de la columna (inyección de la muestra) al final de la
columna(detector).
Tiempo muerto (t0)
Tiempo requerido por un compuesto inerte para que migre de la entrada
de la columna al final de la columna sin ninguna interacción por la fase
estacionaria.
Tiempo de retención neto o corregido (t´R1 o t´R2 )
• Es la diferencia entre el tiempo de retención total y el tiempo muerto t0 . Que
es el tiempo que permanece el analito en la fase estacionaria.
t´R1 = tR1 – t0 t´R2 = tR2 - t0
Factor de capacidad (k)
L
H
N
Clasificación de HPLC
• HPLC fase normal Polaridad
Polaridad
Siloxano
• PH 7.5
Componentes
Disolventes
Disolvente Polaridad Disolvente polaridad
•
Pentano
Heptano
0.0
Disolventes.
0.1
Metil terbutil éter
o-Xileno
2.5
2.5
Disolventes
Hexano 0.1 Benceno 2.7
Eter petróleo 0.1 Clorobenceno 2.7
Isooctano 0.1 o-Diclorobenceno 2.7
1)
3) Longitud de la
columna
4)Diámetro de la
columna
Cuidados de de la columna
• Estables a un ph de 2-8