Prueba de

Antiglobulina Directa o
Coombs directo
ELÍAS CUARTAS GÓMEZ
ESTUDIANTE DE MICROBIOLOGÍA Y BIOANÁLISIS
UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
2018
Prueba de Antiglobulina Humana
(AHG) o de Coombs.
 Desarrollada en 1945 por Coombs, Mourant y Race.
 Detectar anticuerpos eritrocitarios incompletos (IgG) o
complemento.
 Puede ser monoespecífico o poliespecífico.
Anticuerpos

 Estructura pentamérica  Reaccionan con los eritrocitos

 Permite aglutinar directamente a
sin aglutinarlos.
los eritrocitos.  Es necesario potenciar las
reacciones con:
 Activar eficientemente el
complemento por vía clásica sin  El suero antiglobulina.
método potenciador para ello.  Albúmina.
 Reaccionan en solución salina y Tº  Enzimas proteolíticas.
óptima de 4ºC
 Centrifugación*.
Prueba directa de antiglobulina
o Test directo de Coombs
Objetivo:

 Estudiar la unión antígeno-anticuerpo producida in

vitro, permitiendo detectar la presencia de
inmunoglobulinas y/o fracciones del complemento
adheridas in vivo (sensibilizados) a los eritrocitos.
Antiglobulina políespecífica anti-IgG/anti-C3d
Indicaciones:
Anemias hemolíticas autoinmunes
AHAI por anticuerpos calientes (IgG)
Primaria o idiopática
Secundaria o asociada
- Neoplasias: Linfomas, carcinomas, sarcoma de Kaposi
- Enfermedades autoinmunes: Lupus Eritematoso Sistémico, artritis
reumatoide
- Inmunodeficiencias: Virus de Inmunodeficiencia Humana
AHAI por anticuerpos fríos (IgM)
Síndrome de aglutininas frías
Primaria o idiopática
Secundaria o asociada
- Síndromes linfoproliferativos: Leucemia linfocítica crónica, Linfoma de células
B, macroglobulinemia de Waldeström.
- Infecciones: Mononucleosis infecciosa, Mycoplasma pneumoniae, y menos
frecuente (Adenovirus, CMV, varicela Zoster) o bacterias (L. monocitogenes, T.
pallidum)
AHAI mixta IgG e IgM
Indicaciones
En el estudio de anemia hemolítica inducida por fármacos

 Adsorción del fármaco.

 La hipótesis del hapteno.

 La hipótesis de los complejos inmunes.

En el estudio de la enfermedad
hemolítica del feto y del recién nacido.
Indicaciones
 Tras el hallazgo de un autocontrol reactivo en el estudio de
anticuerpos irregulares.
 Puede deberse a la presencia de anticuerpos en la membrana
eritrocitaria (autoanticuerpos o aloanticuerpos en el contexto de una
reacción serológica postransfusión).
 En el estudio de una prueba cruzada incompatible en un paciente
con un estudio de anticuerpos irregulares negativo: hallazgo de
una PDAG positiva en el donante.
Indicaciones
 Enel estudio de
reacción hemolítica
postransfusional.
 Si la PDAG es negativa
en la muestra
pretransfusional y
positiva en la muestra
postransfusional, se
debe descartar un
proceso hemolítico
aloinmune frente a los
eritrocitos recién
transfundidos.
Fundamento y métodos
 Método de tubo: Control de coombs
Control de coombs
Fundamento y métodos:
 Método de gel-microcolumna
Coombs fraccionado

 Positividad en clase IgM.

 Positividad en clase IgG sola o acompañada de complemento.
 Positividad en fracciones de complemento.
 Positividad en IgM + IgG con o sin complemento.
 Positividad en clase IgA.
 Comparación entre Coombs
directo y Coombs indirecto
Coombs directo
Detecta Acs (IgG) y/o C directamente
fijados a los eritrocitos en estudio.
La sensibilización se ha producido
espontáneamente en el organismo del
paciente.
La técnica requiere 1 paso.
Los eritrocitos son examinados
directamente con la antiglobulina
humana.
Coombs indirecto
Detecta Acs (IgG) y/o C fijados a los
eritrocitos, procedentes del suero en
estudio.
La sensibilización de los eritrocitos se
ha provocado al incubar el suero en
estudio con los mismos.
La técnica requiere 2 pasos.
La prueba exige una incubación previa
(suero+eritrocitos) antes de añadir la
antiglobulina humana.
Bibliografía

 Inmunohematología básica y aplicada. Armando Cortés Buelvas.

[et al.]. Cali : Feriva, 2014.
 American Associatiom of blood banks. Manual Técnico AABB. 15
edición. 2007. 
 Coombs RRA, Mourant AE, Race RR. A new test for the detection
of weak and « incomplete » Rh agglutinins. Br J Exp Pathol 1945;
26: 255-256. 
 Garratty G. The significance of IgG on the red cell surface.
Transfus Med rev 1987; 1: 47-57.