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El estudio del examen bacteriológico de heces reviste

especial importancia en nuestro medio, particularmente en


consideración de los pacientes de corta edad, los recién
nacidos, que pueden ser víctimas de diarrea frecuente, la
mayoría de las cuales se deben en nuestro medio a
infecciones del intestino por diferentes especies de
enterobacterias que son de tipo patógeno, como algunas
del grupo coliformes integrado por escherichia coli,
klebsiella, enterobacter, destacandose la patogenicidad de
la escherichia coli.
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA
Ademas otras bacteria como la
salmonella, shigella, proteus, clostridium,
estafilococos, estreptococos y
pseudomona aeuruginosa, son también
agentes causantes de diarrea,
dependiendo del estado inmunologico del
paciente.

DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ


JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA
¿Qué es un Coprocultivo?
•Es un examen bacteriológico en el cual se investiga
la presencia de bacterias patógenas (que producen
enfermedad) en materia fecal.

¿Por qué se necesita hacerlo?


•Para identificar el agente causal del cuadro entérico
y tratarlo con el antibiotico adecuado, en caso de que
corresponda hacerlo. No todos los patógenos
intestinales se deben tratar con antibióticos, ya que
que algunos cuadros se autolimitan.
¿Como debo recolectar la muestra?
•Se tomaran con hisopo estéril muestras de las
partes purulentas o sanguinolentas de la deposición.
•Embeber el hisopo, no juntar materia fecal con el
hisopo, solo embeberlo.
•Colocarlo hasta el fondo en el medio de transporte
provisto por el laboratorio.
•Cortar el exceso del palito del hisopo, y con él hacer
dos extendidos en los portaobjetos provistos por el
laboratorio.
•Conservar a temperatura ambiente.

¿Cuanto demora el resultado?


•Usualmente 3 o 4 días.
1. Muestra de heces
2.Instrumentos: caja de petri, tubos de ensayo,
pipetas de 1cc, asa y aguja de inoculación,
mechero, estufa y medios de cultivo.
3.Todo el material referente , instrumentos y
medios de cultivo deben estar en condiciones de
esterilidad.
4.Solución salina en tubos
5.Iodo al 30%
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA
CALDO DE TETRATIONATO: caldo base con tetrationato 4.6 gr.
AGUA DESTILADA
Se lo emplea principalmente para el bacilo tifoideo y otras salmonellas.
AGAR S.S.: se utiliza para aislar las salmonellas y principalmente las
shigellas.
AGAR BISMUTO SULFITO: lo utilizamos para aislar la salmonella tifosa
y otras salmonellas que producen ácido sulfhidrico.
AGAR T.S.I: (KLIGLER) nos va a servir en la lectura final del
coprocultivo, diferenciando los bacilos entericos a base de fermentación de
glucosa, lactosa, sacarosa y de la producción de gas de fermentación y de
SH2
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA
A.- Se inicia tomando una muestra de heces y
sembrando en caldo de Tetrationato, al cual se le
agrega 0,2 de yodo para inhibir la flora Grampositiva.

B.- Luego tomamos otra muestra de heces y la


sembramos en solución salina, con esta realizamos una
suspensión, de esta suspensión tomamos una muestra
y sembramos con el asa en estría en agar Bismuto e
incubamos a 48 horas y a 37°C. Para obtener un
aislamiento bacteriano por diseminación.
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA
C.- Luego tomamos otra muestra de esta
suspensión y la colocamos en una caja de
Petri vacía y estéril a la cual le agregamos
10cc de agar Bismuto fundido y enfriado
a 45°C y mezclamos, incubamos a 48hrs.
y 37°C. Para obtener un aislamiento
bacteriano por dilución.
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA
A.- Del caldo de Tetrationato sacamos una
muestra y sembramos en agar SS en estría,
incubamos a 24 horas y 37°C.

B.- Se incuba el agar para obtener un


aislamiento bacteriano por diseminación
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA
A- Una vez incubado el Agar S.S. Tomamos tres colonias
distintas con la aguja de inoculación y efectuamos un pase
al Agar Kliger en el cual sembramos en profundidad y en
superficie, se utilizan tres Kliger, es decir uno para colonia y
se lo incuba durante 24 horas y a 37°C.
B.- Una vez incubada la siembra en el Agar Bismuto por
diseminación, tomamos tres colonias y efectuamos pase al
Agar Kliger de igual manera que en el caso anterior y con la
misma incubación.
C.- Una vez incubada la siembra en el Agar Bismuto por
dilución procedemos como en los casos anteriores.
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA
A.- Se hace la lectura de los Kliger (coprocultivo)
El agar Kliger o TSI es un medio de cultivo
diferencial de color rojo gelatina y que por efecto de
las enzimas bacterianas puede cambiar su color a:
•Amarillo total.- Indica acidez
•Rojo total.- Indica alcalinidad
•Negruzco.- Presencia de SH2
•Presencia de burbujas.- Indica gas de fermentación
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA
SIEMBRA
SOLUCION SALINA

PASO C 10CC

MUESTRA DE
HECES

0,2CC PASO B AGAR BISMUTO AGAR BISMUTO


SUSPENSION
ESTERIL FUNDIDO Y ENFRIADO
DILUSION 45°C.
AGAR BISMUTO
37°C 48H..
DISEMINASION
CALDO DE TETRATIONATO
PASO A) 37°C 24H.
YODO

SE INCUBAN A
37 °C EN 24 H.

9 KLIGER
AGAR SS
SE REALIZA UNA DOBLE RESIEMBRA EN
INCUBA 37°C 24HORAS
(PROFUNDIDAD Y EN SUPERFICIE)
AISLAMIENTO BACTERIANO POR DISEMINACION
POSIBLE ESCHERICHIA COLI POSIBLE SHIGELLA

AUSENCIA DE SH2 AUSENCIA DE SH2


CON GAS DE FERMENTACION SIN GAS DE FERMENTACION
SUPERFICIE ACIDA SUPERFICIE ALCALINA
FONDO ACIDO FONDO ACIDO

POSIBLE PSEUDOMONA AERUGINOSA


POSIBLE SALMONELLA TIFOSA
DISCRETO PRESENCIA DE SH2 FONDO Y SUPERFICIE SIN
REACIONAR, CON PRESENCIA
SIN GAS DE FERMENTACION DE COLONIAS DE COLOR
SUPERFICIE ALCALINA AZOGADO OSCURO EN LA
SUPERFICIE
FONDO ACIDO

POSIBLE PROTEUS POSIBLE ALCALIGENES FECALIS


ABUNDANTE DE SH2 SUPERFICIE ALCALINO
CON GAS DE FERMENTACION FONDO ALCALINO
SUPERFICIE ALCALINA AUSENCIA DE SH2 Y GAS DE
FERMENTACION
FONDO ACIDO

DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ


JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA

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