Fitoterapia

Histórico

• 2.600 a.C. Mesopotamia – 100 plantas

• 2.900 a.C. Egito:
• Papiro de Ebers - 1.500 a.C. 700 plantas
• Chineses: 1.100 a.C. 52 prescrições
• Índia: 1.000 a.C. 516 drogas
• Gregos e Romanos – Galeno
• Árabes preservaram durante a idade média (sec 5-12) fundiram com
conceitos indianos
• 200 anos atrás
• Friedrich Sertümer
• Morfina – primeiro produto purificado e utilizado em concentrações
definidas
• Independe da idade e fisiologia da planta
• Ópio- papoula (Papaver somniferum)
• Déc de 90 : 80% dos medicamentos derivados de plantas ou seus
análogos
• Plantas tem um papel no desenvolvimento e bem estar da
humanidade
• Preservantes
• Temperos
• Suplementos alimentares
• Saúde
 Mundo-OMS

• 65% da população mundial faz uso de plantas medicinais

• 80% utilizados com mesmo processo
• 94 plantas

ONU - 2050
• Mais comida e fibra
• Menos fome
• Mais moléculas terapêuticas (naturais)
• Produtos não necessários a fisiologia da planta
• Saúde e Defesa da Planta

• Metabólitos primários: aminoácidos, polissacarídeos, proteinas e

lipideos
• Metabólitos secundários: grupo restrito dentro de grupos
filogenéticamente relacionados
• Produzidos durante períodos limitados e em concentrações
submicromolares
Plantas – Bioma Caatinga Ressureição

• Resistente a dessecação
• Resistente a estresse
• Produz mais metabólitos secundários
Fenólicos e Polifenois

• Envolvidos na defesa de plantas

Flavonóides

• Compostos pigmentados – flores e frutas

• Antimicrobianos: bactérias e fungos;
• Ação sobre células microbianas
Quinonas

• Compostos com anéis aromáticos

• Inativam proteínas: adesinas, glicopeptídeos de parede celulares e
enzimas
Taninos

• Compostos polifenólicos poliméricos solúveis em água

• Adstrigentes
• Presentes na maior parte das plantas
• Inativação de proteínas
• Inibição: bactérias, fungos e leveduras.
Alcalóides

• Compostos nitrogenados heterocíclicos

• Intercalantes do DNA
• Impedem replicação DNA e ocasionam morte celular
Terpenóides

• Um dos grupos mais diversos de compostos secundários

• Atividade anti-gram positivas
• Anti micobactérias
• Alteram a membrana
Lectinas e peptídeos

• Formação de canal de íons nas membranas

• Competição por adesinas
• Antiviral, Antibacteriano e Antifungico
Mecanismos

• Alteração da parede celular, membrana citoplasmática e

metabolismo
• Atividade antibiofilme
• Inibição da produção da cápsula
• Atenuação dos fatores de virulência
• Redução na produção de toxinas
• Melhora do sistema imune
• Prebiose
 Busca de Novos Compostos
• Alternativas:
• Própolis
• Fitoterápicos
• Peptídeos de animais
Fontes

• Micro-organismos – Streptomyces spp.

• Micro-organismos do solo
• 1g de solo 5.000 espécies de bactérias
• Micro-organismos do mar
• 1029 espécies
• Plantas
• 300.000 espécies
• Insetos
• Animais
Métodos In Vitro

• Custo
• Validade dos resultados in vivo.
• Controle
• Comparar com drogas antimicrobianas
 Testes de Atividade
Antibacteriana e Antifúngica

• Escolha do micro-organismo;
• Usar cepas multiresistentes
• Usar Cepas de Referência
• Usar o inóculo adequado
 Óleo ou Extrato Vegetal

• Escolha da fonte;
• Extratos tem efeitos aditivos e sinérgicos;

Extrato bruto ou frações?

Efeito sobre a seleção de bactérias resistentes
 Diluentes
• Extratos: Água e Etanol
• Óleos: Tween 20, Tween 80, DMSO, Etanol

-Interações e atividade antimicrobiana

 Padrões

• CLSI
• NCCLS
 Métodos

• Difusão em ágar

Silva et al. Revista Brasileira de Farmacognosia, V. 17, N.4, P. 572-577, 2007

• Discos Impregnados
• 6mm
• Poço –cilindro – porcelana, vidro e alumínio
• Difusão dupla
 Métodos
• Difusão em Caldo
• Sais de Tetrazólio CTT ou MTT

púrpura
• Meio de Cultura
MH (ágar e caldo) TSA e TSB
Ágar Saboraud e RPMI
• Escolher o meio correto
• Atmosfera
• Temperatura

• Bactérias Fastidiosas
Curva de morte

• Determina potencial bactericida e fungicida

• Dose e tempo dependente
• Suspensão bacteriana: 5x105 UFC/ml
• Extrato: 0,25 X CIM e 1 X CIM
• Diferentes tempos (0,4,6,8,10,12and24h)
• Pode avaliar sinergismo e antagonismo
Sá, M.C. et al. Antimicrobial activity of caatinga biome
ethanolic extracts against gram n egative and
gram positive bacteria
R Bras. Ci. Vet. V. 18, n.2/3, p. 62-63, 2011.
Tabela 2- Susceptibilidade antimicrobiana de isolados de
Staphylococcus spp. ao extratos de C. Substellata e ácido
úsnico.

Concentração Inibitória e
Atividade Bactericida Mínima (mg/ml)
Espécie/isolado
observada (%)

Faixa Média

Cladonia Substellata Vainio 100 (136) 0,25 - 0,0019 0,0796

Ácido úsnico purificado 100 (136) 0,25 - 0,0019 0,0796

   Concentração Inibitória e
Fungo Bactericida Mínima
Atividad (mg/mL)
e
Espécie/isolado  
observa
da (%) Faixa Média

C. Substellata Vainio M. canis 100 (02) 0,1953 - 0,09765 0,1464

Ácido úsnico M. canis
100 (02) 0,1953 - 0,09765 0,1464
purificado
M. gypseum 0,0488 –
C. Substellata Vainio 100 (03) 0,0326
0,0003813
Ácido úsnico M. gypseum 0,0488 –
100 (03) 0,0326
purificado 0,0003813
Atividade Antibiofilme

• Em formação x Consolidado

Inibição do biofilme em Inibição do biofilme

Espécie/isolado
formação (%) Consolidado (%)
Cladonia substellata 42 (8/19) 47 (9/19)
Ácido úsnico 37(7/19) 58 (11/19)
Efeito Sinérgico

• Flavonóides e Antimicrobianos convencionais

• Reduzem o efeito tóxico de antimicrobianos

• Silybum marinum – efeito antioxidante, Vitamina E
• Reduz nefrotoxicidade da gentamicina
Table2
Information on the five most potently synergistic flavonoid–antibiotic combinations tested in recent years as identified by PubMed and
ScienceDirect searches for studies published between January 2005 and December 2010
(study marked with an asterisk identified more than one highly synergistic flavonoid).

Flavonoid Antibiotic or Test bacteria Fold reduction

antibiotic class in antibiotic MIC

Epicatechin gallate Oxacillin MRSA 256–512

Quercetin b-Lactam Penicillin-resistant S. >20 to >80

aureus

Baicalein b-Lactam MRSA 16–1024

Myricetin Isoniazid Mycobacterium spp. 8–16

ZP-CT-A Oxacillin MRSA 4–256

Note: To take into account the fact that MICs can vary by a factor of 2 during testing [94], data from studies where flavonoids were used at a
concentration just 2-fold lower than their MIC were excluded. All of the above studies tested for synergy using variations of the
broth microdilution method.
Cunshine and Lamb. International Journal of Antimicrobial Agents, v.38, n. 2, p. 99-107 (2011)
Tabela 1. Concentrações inibitória mínima (MIC) e bactericida mínima (CBM)
do antimicrobiano comercial (Gentamicina + Amoxicilina), extrato etanólico
de própolis (EEP) e antimicrobiano comercial associado a 34,35µg de EEP
frente a Staphylococcus spp. isolados de bovinos com mastite sub clínica

EEP + Antimicrobiano
Antimicrobiano comercial
comercial*
Extrato etanólico
Atividade
de própolis (EEP)
Gentamicina Amoxicilina Gentamicina Amoxicilina

MIC (µg/ml) 0,2258 0,8469   < 0,00695 < 0,02606

CBM (µg/ml) 1,7793 6,6722 68,7 0,1384 0,5235

 Métodos
• Microscopia Eletrônica

Micro-organismo - Lamínula

Com Produto Sem Produto

Natural Natural

Tratamento – Glutaraldeído
e Etanol

Microscopia Eletrônica de
Varredura
Koh et al. (2013) Biochimica et Biophysica Acta (BBA) – Biomembranes 1828: 834-44.
Não existem critérios universais de
interpretação
 Testes de Atividade Antiviral

• Observar efeito em cultivos celulares

• Redução no efeito citopático ou na infecção de células- Vírus não
citopáticos.
• Cels Vero
• Titulação Viral
• Difícil Padronização
Métodos
Inoculação do material – Pré-Tratamento
Vírus NCP IFA

IPX
Testes In vivo

• Aprovação do comitê de ética

• Toxicidade – camarões e braconetas
• Escolha do modelo animal
• Indução de infecção
Dermatologia

• Dermatite Atópica
• Glycyrrhiza uralensis
• Paeonia lactiflora
• Rehmannia glutinosa

• 200mg/Kg por dia – 8 semanas

• Melaleuca alterniflora
• Produtos de cuidado com a pele
• Terpenos
• MRSA, Pseudomonas spp. e Malassezia pachydermatis
• Creme a 10% 2xdia, 4 semanas
• Tóxico para gatos

• Camomila (Matricaria chamomilla)

• Redução de prurido e inflamação
Diarréia

• Suco de Cenoura

• Chá de camomila com suco de limão

• Agua de cozimento de arroz (5-10% ad libidum)

Infecções Urinárias

• Cranberry (Vaccinium macrocarpon)

• Bloqueio da adesão bacteriana – E.coli

• 1,14mg/Kg de peso corporal 1x dia 3 semanas
Desafios

• CIM baixa – toxicidade seletiva

• Toxicidade
• Solubilidade em água
• Hidrofobicidade
• Biodegradabilidade
• Estabilidade
• Capacidades sensoriais
• Contaminações
• Uniformização
• Biase dos estudos