МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ

ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ
ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ
“САРАТОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
ИМЕНИ Н.Г. ЧЕРНЫШЕВСКОГО”
КАФЕДРА АНАЛИТИЧЕСКОЙ ХИМИИ И ХИМИЧЕСКОЙ ЭКОЛОГИИ
ИНСТИТУТА ХИМИИ

«ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОЦЕНКА ПРЕДЕЛА

ВИЗУАЛЬНОГО ОБНАРУЖЕНИЯ ПРИ ТЕСТ-
ОПРЕДЕЛЕНИИ АМОКСИЦИЛЛИНА »

ВЫПОЛНИЛИ:
СТУДЕНТЫ II КУРСА ДЕМЕШКО И.А. 211 ГР.,
КАРЯКИНА А.С. 213 ГР.
НАУЧНЫЕ РУКОВОДИТЕЛИ:
АСПИРАНТ МАРАКАЕВА А.В
ДОЦЕНТ , К.Х.Н. КОСЫРЕВА И.В.,
 АКТУАЛЬНОСТЬ

Активно развивающиеся в
настоящее время тест- методы
позволяют решать различные
задачи качественного и
количественного анализа. Такой
анализ возможно осуществлять в
режиме реального времени даже
вне лаборатории.

2
• Цель настоящей работы - оценка метрологических
характеристик методики тест-определения антибиотика
амоксициллина c помощью индикаторной бумаги на
основе Фелинговой жидкости

Амоксицилли́н -
полусинтетический 
антибиотик  широкого
спектра действия
группы пенициллинов

3
 ИММОБИЛИЗОВАННЫЙ РЕАГЕНТ:

Реактив Фелинга

Изучение реакции взаимодействия амоксициллина

с Фелинговой жидкостью на целлюлозной матрице

Фелингова фильтр с высушивание

жидкость синей лентой при 35˚С

раствор высушивание
амоксициллина при 80˚С (10 минут)
4
 Визуально - колориметрическое определение
амоксициллина

64 32 16 8 4 2 1 0 мг/мл

t  =10 мин,T =80˚С (фосфатный буферный р-р, pH=7,4)

НГОС= 2 мг/мл

5
 ЦВЕТОМЕТРИЧЕСКОЕ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМОКСИЦИЛЛИНА
ЦВЕТОВЫЕ МОДЕЛИ : RGB И HSB
Интенсивность канала В

Lg C

6
Цветометрическое определение
амоксициллина
Цветовые модели : RGB и HSB

Lg C
7
 Некоторые метрологические
характеристики методик обнаружения с
бинарным откликом
Положительный результат – наличие аналитического сигнала (отличие
сигналов анализируемого и холостого образцов);
Отрицательный результат – отсутствие аналитического сигнала
(совпадение сигналов анализируемого и холостого образцов);
Уверенно открываемый минимум (абсолютная чувствительность) –
минимальное количество открываемого иона, которое дает во всех
случаях вполне отчетливый положительный эффект реакции при
оптимальных ее проведения.

8
 Схема алгоритма оценки предела обнаружения для
методик тест-анализа с визуальной индикацией

Пополнить
эксперимент
Нет
25
Описывается ли 25
экспериментальное
распределение Рс Можно ли объединить выборки? (F- и t- критерии)
какой-либо Да Нет
функцией Объединить выборки, вычислить сmin, объед
распределения
Да
Вычислить сmin,1

9
 ПРИМЕНЕНИЕ БИНАРНОГО ОТКЛИКА
ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ СMIN
Цветовая Концентрац Кол – во Результаты
шкала ия, М наблюдател
ей
Да Нет Общее число
ответов

5•10-3 450 0 450

4•10-3 450 0 450
3•10-3 448 2 450
n=9
2•10-3 421 29 450
1•10-3 356 94 450
9•10-4 277 173 450
8•10-4 241 209 450
0
10
 Выбор пороговой концентрации
P(c)

0,99

C, M

0 < Р(с)< 1 nk — число положительных ответов

наблюдателей
P(ck) = nk / Nk, Nk — общее число испытаний 11

N = 450
 Результаты статистической обработки
определения яркости канала B и S для n=50

С,M 5•10-3 4•10-3 3•10-3 2•10-3 1•10-3 9•10-4 8•10-4

P(c) 2,3 2,4 2,5 2,7 3 3 3,1

B 127 137 143 151 157 158 158

S 15 13 14 14 15 17 16

SB 12 9 11 8 9 9 9

SS 6 3 3 4 6 7 7

ΔB 3 3 3 2 2 3 2

ΔS 2 1 1 1 2 2 2

B±ΔB 127±3 137±3 143±1 151±2 157±2 158±3 158±2

S±ΔS 15±2 13±1 14±1 14±1 15±2 17±2 16±2

7
 Функции распределения на согласие с
которыми исследовались результаты тест -
определения

13
 Закон распределения - нормальный
ln(P(c))

Линейная зависимость не наблюдается 14

Закон распределения - логнормальный
ln(P(c))

Линейная зависимость не наблюдается 15

 Закон распределения -
ln(P(c)) экспоненциальный

Линейная зависимость не наблюдается 16

 Закон распределения - Вейбулла
ln(P(c))

Наблюдается линейная зависимость 17

Оценка адекватности воспроизведения
эмпирических данных (Pc от C)

=0.11

=0.15

18
 Некоторые метрологические
характеристики тест - определения
амоксициллина
НГОС ДОС ИНТЕРВАЛ Сmin
НЕНАДЕЖНОСТ
И
Визуально-колориметрическое определение
5,5·10-3 2,5·10-3 -2,0·10-1М 3·10-3 М – 8·10-4 М 2·10-3 М

Цветометрическое определение
2·10-3 М 2,5·10-3 -2,0·10-1М 3·10-3 М – 8·10-4 М

18
Выводы:
• Показали принципиальныую возможность применения методики с бинарным
откликом для тест-системы: Амоксициллин – иммобилизованная Фелинговая
жидкостью (проанализирована выборка из 450 элементов)
• Показали что функции распределения результатов тест- определения
согласуется с законом распределения Вейбулла (получена линейная
зависимость в координатах от С , y=-47090x-4,0519, r2=0,9321),
следовательно результаты эксперимента не противоречат гипотезе о
нормальном распределении при оценке предела обнаружения
• При выполнении неравенства λэксп=0,11< λкрит=0,15 сделали вывод о
согласовании эмпирического распределения P(c) с теоретическим
• Определили метрологические характеристики тест-системы
НГОС= 5,5·10-3 М ( визуально-колориметрическое определение), НГОС= 2·10 -3
М ( цветометрическое определение), ДОС= 2,5·10-3 - 2·10-1 М, интервал
ненадежности 3·10-3 М -8·10-4 М, Сmin= 2·10-3 М

20
Спасибо за внимание