Выделения и очистки целевых

продуктов биотехнологических
производств

Холматов Рузибой

1
 Выделение и очистка продуктов биоферментации –
завершающая стадия биотехнологического процесса
Определяющие факторы:

Целевой продукт накапливается в клетке

Целевой продукт выделяется в культуральную

жидкость

Целевым продуктом является сама клеточная масса

2
Природа конечного продукта
Важным этапом отделения продукта является
фракционирование культуральной жидкости.
Культуральная жидкость представляет собой
двухфазную систему, где твердой фазой
является биомасса, а жидкой вода с
растворенными осадками питательной среды и
внеклеточными продуктами биосинтеза. Каждая
фаза представляет собой сложную
многокомпонентную систему, поэтому
применяют различные методы химической
технологии для выделения конечного продукта в
чистом
3 виде.
Отделение биомассы и методы
разрушения клеток при
накоплении целевого продукта
в клетках

Отделение клеток от культуральной жидкости

Разрушение клеток

Очистка конечного продукта от массы компонентов

4
разрушенных клеток
 Сепарация
Сепарация – это разделение культуральной жидкости и
биомассы

Ультрацентрифугирвоание

Флотация Фильтрация
5
 Флотация – применяется, если клетки из-за низкой
смачиваемости накапливаются в поверхностных
слоях жидкости биореактора. Основной движущей
силой флотации являются всплывающие пузырьки
газа, они захватывают клетки и выносят их на
поверхность.
Оборудование – флотаторы.
Преимущества метода:
1. Метод экономичен;
2. Высокопроизводителен;
3. Возможность применения в непрерывном
процессе.
6
 Центрифугирование – метод основан на осаждении
взвешенных в жидкости частиц с применением
центробежной силы. Данный метод применим если:
1. Суспензия фильтруется медленно;
2. Необходимо максимальное освобождение
культуральной жидкости от содержащихся частиц;
3. Необходим непрерывный процесс сепарации в
условиях, когда фильтры рассчитаны только на
периодическое действие.
4. В некоторых производственных процессах
используют одновременно процессы фильтрации и
центрифугирования – фильтрационные центрифуги.

7
 Методы разрушения клеток

Химико-
Физические
ферментативные
методы
методы

Химические
8
методы
 Отделение клеточных стенок

Центрифугирование (более высокие скорости)

Фильтрация (меньший размер пор)

9
 Отделение, очистка и
разделение продуктов

Осаждение Адсорбция

Экстракция
10
 Осаждение

Физические методы Химические методы

Нагревание,
охлаждение, Перевод в
разбавление или малорастворимые
концентрирование соединения
растворов

11
 Современные методы
разделения веществ

Современные методы разделения веществ основаны

на принципах экстракции и адсорбции.

Хроматография – разделение веществ, основанное

на неодинаковом распределении между двумя
несмешивающимися фазами.

12
Концентрирование, обезвоживание,
модификация и стабилизация
продукта
Концентрирование

Обратный осмос Выпаривание

Ультрафильтрация

13
 Прямой осмос

При прямом осмосе, благодаря диффузии

веществ через мембрану, происходит их
разделение. Если к раствору приложить внешнее
давление, которое превышает осмотическое
давление , то растворитель вытекает через
полупроницаемую мембрану против градиента
концентрации растворенного вещества. Т.е
происходит концентрирование раствора.
14
 Ультрафильтрация

При ультрафильтрации происходит

отделение веществ с помощью мембранных
фильтров. Одни фильтры предназначены
для отделения крупных частиц, другие
мембраны, с более мелкими порами,
задерживают молекулы органических
кислот.
15
 Выпаривание
При выпаривании для удаления воды или иного
растворителя, раствор необходимо нагреть –
основной недостаток метода. Для того, чтобы
ослабить негативное влияние нагревания
используют вакуум-выпарные установки.
Используют также дисковые и пленочные
выпарные аппараты, в них испарение усиливается
из-за растекания жидкости тонким слоем по
нагретой поверхности.
16
 Обезвоживание продукта
(сушка)

Факторы, влияющие на выбор метода

сушки:
1. Физико-химические свойства продукта:
вязкость раствора, стабильность или
жизнеспособность биообъекта при
повышенных температурах.
17
Спасибо за внимание

18