Biossegurana em Biotrios

Anna Layse Clycia Dantas Drick Gustavo Janana Sheyla

INTRODUO

Conceito de segurana biolgica surgiu no contexto das atividades ligadas a microbiologia e se estendeu a todos os mbitos laboratoriais aonde existe contato e/ou manejo de agentes biolgicos que podem propiciar riscos as pessoas e animais

Objetivos da segurana biolgica

Reduzir a exposio dos manipuladores aos agentes biolgicos

Prevenir sada de agentes biolgicos e/ou animais dos sistemas de conteno

Aplicam-se ao biotrio critrios de biossegurana semelhantes aos de laboratrios de agentes infecciosos e/ou OGMs Possuem problemas nicos


Gerao de aerossis e alrgenos Susceptibilidade a mordidas e arranhes Ocorrncia de zoonoses

Normas de biossegurana em biotrios



Guide for the Care and Use of Laboraty Animals NRC National Research Council (1996) Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories NIH National Institute of Health (2000) Manual para Tcnicos em Bioterismo COBEA-FINEP (1996) Manual de Biossegurana (Neves, 2000)

INSTALAES

Devem proporcionar controle de contaminao e preveno de contaminao cruzada por meio de controle ambiental e sanitrio Critrios de construo (CEDATE 1986)

Estabelecimento de fluxo de pessoas, animais e materiais

Layout de reas limpas/suja Sistemas de ventilao

Capacidade de renovar 100% do ar Monitoramento automatizado Sistema indicador de diferena de presso e sistema de alarme Controle de variaveis ambientais (temperatura, umidade, trocas de ar, etc.) Controle de poluentes, odores e contaminantes aerognos

BARREIRAS DE CONTROLE


Barreira: estruturas fsicas ou complexos de estruturas que separam os animais de um ambiente geral em ambientes especficos que protegem os animais de contaminao externa e o ambiente de escapes de animais e contaminantes

Pode ser desde uma parede, isoladores e a prpria distribuio do ar.

SISTEMAS DE BARREIRAS LOCAIS

Objetivos

Proteger os animais contra infeces Proteger os trabalhadores

Isoladores

Sistema fechado de alojamento Garante padro sanitrio e gentico Sistema seguro de conteno Usado para alojar animais microbiologicamente definidos Com presso negativa, protege tambm os trabalhadores Isoladores flexveis confeccionados em PVC laminado Manuais operacionais devem conter testes de integridade de isoladores

Estantes ou gabinetes ventilados



Sistema de ventilao de ar forado por motores ventiladores instalados dentro dos gabinetes Caixas ventiladas individualmente por fluxo unidirecional de ar Proporciona retirada de poluentes advindos do metabolismo dos animais (*amnia) Reduzem a frequncia de trocas de cama das gaiolas No garante controle de contaminao

Microisoladores


Gaiolas com tampas-filtro como barreiras Alojamento contido Restringe o fluxo de ar ventilado Acumulo de gs amonia, alta temperatura e umidade Caixas microventiladas

PADRONIZAO DOS ANIMAIS



Padronizao gentica


Origem das matrizes controle gentico das linhagens

Padronizao sanitria


Origem das matrizes com padro sanitrio atestado pelo fornecedor Monitorao sanitria

Monitorao dos parmetroslinhagens isognicas, Criao e manuteno de genticos, sanitrios e congnicas e a controle definidas nutricionais aliados geneticamente de variveis ambientais Padronizao gentica asseguram confiabilidade e reprodutibilidade dos experimentos

Padronizao nutricional

Nutrio adequada para prover potencial gentico, de crescimento, reprodutivo, longevidade e respostas a estmulos

Padronizao sanitria

Controle sanitrio do animal para evitar contaminao por MO que causem zoonoses, patgenos fatais e patgenos que alterem resultados experimentais ou testes

Normas de Higiene

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Normas de Higiene

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Normas de Higiene


A higiene pessoal uma importante barreira contra infeces

Lavar as mos aps manusear qualquer animal reduz o risco de disseminao de doenas e mesmo auto-infeco

Usar roupas protetoras

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RISCO BIOLGICO
O estabelecimento de POPs deve ser desenvolvido com base nas normas preconizadas sobre conduta dentro de reas que abrigam animais, para menor risco aos seres humanos nessas reas

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Zoonoses


Infeces transmitidas diretamente de animais para humanos, podendo, dessa forma, afetar seriamente os projetos de pesquisa Algumas infeces que no tem habitualmente carter zoontico podem afetar pessoas ou animais susceptveis

Pessoas com alguma falha em seu sistema imune Estresse grave Possuem doenas clinicamente no aparentes

O trabalho que envolve exposio a m.o. requer imunizao de toda a equipe tcnica Realizao de testes sorolgicos e bancos de referncia para amostras de soro de todas as pessoas em atividade em unidades de animais Perigo de grvidas nessas reas teratgenos Toxoplasma gondii
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Primatas


Embora todos os animais devam ser observados como fontes potenciais de zoonoses primata espcie que mais oferece risco estreita relao filogentica que possui com o homem Maiores riscos doenas virais Controle: a instituio deve possuir servios veterinrios e mdicos, estabelecer procedimentos seguros para um rpido diagnstico da doena, dos quais
    

Sorologia Isolamento viral Visualizao direta por imunofluorescncia Deteco dos componentes virais Vacinao, sendo o caso
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Primatas


A melhor maneira de reduzir os riscos elaborar um Programa de Segurana e Sade Ocupacional (PSSO) relativo a primatas Recomendaes para o PSSO
       

Todos os primatas devem ser considerados portadores em potencial de doenas que podem ser transmitidas ao homem Pias para higiene das mos devem estar disponveis em locais adequados Pessoas com ferimentos, cortes ou outra lacerao no devem entrar em contato com primatas Cortes, feridas e puncturas por agulhas adquiridas em instalaes com primatas devem ser informados s autoridades mdicas designadas pela instituio Se ocorrer leso por animal, este deve ser imediatamente imobilizado recomendado o uso de CSB para conduzir necropsias em primatas Pelo risco de hepatite A, recomenda-se que os trabalhadores recebam soro globulina hiperimune profilaticamente Todos em contatos com tais animais devem ser livres de tuberculose
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Alergias


Alergia a animais de laboratrio (LAA) uma doena ocupacional significativa para pessoas que trabalham regularmente com as espcies mais comuns de animais de laboratrio uma reao de hipersensibilidade imediata pelo contato com pelagem, urina, saliva, soro ou qualquer outro tecido do animal Sintomas leves: coriza, coceira e corrimento nasais, prurido, vermelhido e edema na pele Sintomas pelas quaisrespirao comgrau de exposio aos alrgenos As medidas graves: se pode reduzir o chiado, encurtamento da respirao por animais de laboratrio incluem os descritos nos projetos de produzidos e sensao de presso no peito
instalaes, normas de higiene, programas educacionais para funcionrios que trabalham em reas de alto risco e medidas preventivas como a instituio de POPs Biossegurana em Biotrios 20

Danos Fsicos e Perigos Qumicos



Todo funcionrio deve ser treinado e mantido sob superviso durante o perodo de experincia no manejo de espcies com as quais vai trabalhar, informando-se a ele os perigos de cada espcie Os kits de primeiros socorros devem estar disponveis Danos causados por agentes qumicos podem ser evitados mediante cuidados no manuseio Lquidos volteis usados como anestsicos ou eutanasiantes e outros txicos e volteis devem ser estocados em locais ventilados ou cabines projetadas para tal fim

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SUBSTNCIAS TXICAS


Vrias substncias esto em uso regular dentro de unidades de manuteno e experimentao animal

Dentre elas esto: detergentes, desinfetantes, cidos e lcalis (forma concentrada)

Em unidade que se utilizam anestsicos deve-se estar atento aos riscos

DESCARTE DE MATERIAIS


Todo material contaminado deve ser descontaminado antes de colocado para descarte

No caso de carcaas e materiais provenientes de experimentos, as normas mnimas esto contidas na Resoluo n 5 do Conselho Nacional do Meio Ambiente/1993


o

DESCARTE DE MATERIAIS EM GERAL

Materiais como papel, plstico, fichas de identificao devem ser incinerados


o

CAMA SUJA DOS ANIMAIS

Inclui material fecal e restos de rao Acondicionar em sacos plsticos (manual ou sist. a vcuo), vedados e etiquetados com sinal de risco biolgico

CARCAAS DE ANIMAIS -Devem ser descartadas in situ, por meio de maceradores com drenagem para condicionadores especficos

MATERIAL INFECCIOSO -Deve ser acondicionado duplamente em sacos plsticos, etiquetados com sinal de risco biolgico e diferenciados por cdigo de cor

 MATERIAL

RADIOTIVO

-O melhor destino para carcaas que contenham este material a

macerao in situ, com drenagem para condicionadores especficos para materiais radiativos (SMITH, 1987)

OBJETOS CORTANTES
-Devem ser acondicionados em recipientes com sinal de risco biolgico. rgidos, etiquetados

NVEIS DE RISCO ASSOCIADOS AO USO DE ANIMAIS EM LABORATRIO



Os animais usados em experimentos podem algumas vezes ser hospedeiros de organismos infecciosos, que podem acarretar estado de hospedeiro crnico ou persistir de forma latente

Animais podem ser inoculados deliberadamente com microrganismos (de uma das 4 classes de riscos) ou com materiais viveis e/ou suspeitos de conter esses agentes

Sob tais circunstncias, o animal deve ser mantido em alojamento apropriado ao risco que o organismo acarreta

Os critrios de manuteno de animais infectados devem ser diferenciados tanto em escala quanto em grau, mas os princpios bsicos para segurana so semelhantes

NVEIS DE BIOSSEGURANA


BIOSSEGURANA ANIMAL NVEL 1 -Envolve agentes infecciosos que no causam riscos de doenas em humanos adultos saudveis e possuem riscos mnimos para tcnicos de laboratrio e meio ambiente

BIOSSEGURANA ANIMAL NVEL 2 -Envolve agentes infecciosos bem caracterizados que ocasionam doenas em humanos adultos. Os riscos existentes so de contaminao pela ingesto ou exposio de mucosas

Biossegurana Animal Nvel 3

Animais infectados por microrganismos que apresentam potencial de transmisso arogena e que podem causar doenas potencialmente letais Aliados aos procedimentos operacionais padro, os protocolos para situaes de emergncia devem ser estabelecidos pelos responsveis do biotrio e serem aprovados pela Comisso Institucional de Biossegurana O diretor do biotrio limitar o acesso s salas de animais para o menor numero de indivduos e o pessoal que necessitar entrar deve ser avisado do potencial de risco

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Instalaes Nvel 3


Equipamentos de instalaes interna, com luminrias, ductos de ar e outros tipos de instalaes para equipamentos devem minimizar reas de superfcie horizontal No se recomenda janelas Boa drenagem no cho A ventilao tem de ser provida de acordo com os critrios adotados pelo guia de cuidados e manejo de animais de laboratrio, com exausto do ar por meio de ductos As gaiolas tem de ser lavados em mquinas automticas apropriadas com temperatura de 80C conveniente que se tenha uma autoclave para as salas A iluminao tem de ser adequada para que se realize as operaes

Instalaes Nvel 3


As instalaes de nvel 3 devem ter seu projeto e procedimentos operacionais documentados

Algumas protees extras devem ser recomendadas (chuveiros pessoais, filtros HEPA)

Biossegurana Animal Nvel 4

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Instalaes


Semelhantes aos descritos para animais do grupo de risco 3, acrescidos do uso de cabines de proteo

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Biotrio de produo para experimentao da Faculdade de Cincias Farmacuticas da USP



Sistema de ar condicionado Salas com presso negativa Exausto com filtros HEPA Autoclave dupla Fluxo operacional de pessoas

Nossa Realidade - UFPI

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possvel considerar que estamos sempre em estado de alerta, frente variedade e complexidade de fatores e agentes relacionados experimentao animal e biossegurana. Manter a sade e o bem-estar das pessoas, animais e ainda proteger o meio ambiente um desafio que depende principalmente da conscincia de todos os profissionais envolvidos, sejam eles gestores, auxiliares, pesquisadores e estudantes.

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Obrigado (a)!

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Referncias


HIRATA,M.H., MANCINI FILHO, J. Manual de Biossegurana. 1ed. Barueri: Editora Manole, 2002.

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