Род Сальмонелла

Микробиология и
лабораторная диагностика
сальмонелл
 Класификация
Род: Salmonella (Daniel Elmer Salmon, американский ветеринар
открыл бактерию в 1885)
Виды: Salmonella enterica, Salmonella bongori
Подвиды вида S.enterica: enterica, salamae, arizonae, diarizonae,
houtenae, indica

Большинство штаммов, выделенных при различных

человеческих заболеваниях (99,5%) принадлежат подвиду
S.enterica enterica с более 2500 сероваров: S. london, S.
enteritidis, S. typhi, S.paratyphi A, S. paratyphi B, S.choleraesuis,
etc

Salmonella enterica подвид enterica серовар Typhi

или
Salmonella typhi
 Классификация KAUFFMAN-WHITE
(согласно структуре антигена)
• Ag O – 67 разновидностей антигенов (O1, O2, O3, ... O65,
etc), позволяют распределить сальмонеллы в серогруппы (A,
B, C, D, E,...Z, O51,...)
Главные (мажорные) фракции антигенов обозначают группу:
O2 – группа A; O4 – B, O6 – C, O9 – D, и т.д.
Минорные антигенные фракции – O1, O12 - общие
• Ag H – определяет сероваров в пределах группы. Структура
жгутика определяется 2-мя различными хромосомными
генами, которые экспрессируются одновременно или
альтернативно (вариации фазы, частоты 10-4)
Ag H фаза 1 (специфическая) – Ha; Hb; Hc; Hd; Hg,m…
Ag H фаза 2 (неспецифическая) – H1,2; H1,5; H1,7
Серовар монофазный: O1,2,12: Ha (S.paratyphi A)
Серовар двуфазный: O1,4,12: HbH1,2 (S.paratyphi B)
• Ag Vi (K), термолабильный, присутствует у S.typhi,
S.paratyphi C, S.dublin. Сконцентрирован на полюсах
бактерии. Напоминает Ag O. Разрушается нагревание в
течение 10 мин.
S. typhi – O9,12: Hd:Vi+ / O9,12: Hd:Vi-
Согласно патогенности для хозяина выделяют:
I. Сальмонеллы монопатогенные (человеческие)
(S.typhi, S.paratyphi A, S.paratyphi B)
II. Сальмонеллы бипатогенные (патогенные для человека и
животных) – большинство.
Grupa Serovarul Antigenul O Vi Antigene H
faza 1 faza 2

A Paratyphi A 1,2,12 a -
B Paratyphi B 1,4,5,12 b 1,2
Wien 1,4,12,27 b l,w
Typhimurium 1,4,5,12 i 1,2
Derby 1,4,12 f,g -
C Paratyphi C 6,7 + c 1,5
Virchov 6,7 r 1,2
Infantis 6,7 r 1,5
Bovismorbificans 6,8 r 1,5
D Typhi 9,12 + d -
Enteritidis 1,9,12 g,m -
Panama 1,9,12 l,v 1,5
Dublin 1,9,12 + g,p -
Gallinarum 1,9,12 - -
E London 3,10 l,v 1,6
 Морфологические характеристики

Salmonella – бактерия грамм - , подвижная, перитрих

(S.gallinarum, – неподвижная), спор не образует.
 • Культуральные свойства
1. Среды обогащения: Muller, Kauffman (среда с желчью,
тетратионатом Na), селенистый бульон с Na
2. Среды выделения чистой культуры: Endo, Levin, Ploskirev
(колонии S, lactozo-); среда Wilson-Blair с сульфитом
бисмута (чёрные колонии)
3. Среды обогащения и дифференцирования: Olkeniţki, Kligler
(глюкоза КГ, лактоза-, H2S+, мочевина-)
Первичные тесты: используется цитрат Na, вырабатывают H2S,
MR+, LDC+, подвижность+, остальные тесты –
отрицательны.
Вторичные тесты: ферментируют углеводы КГ, индол-,
орнитиндекарбоксилаза+, и др.
ИСКЛЮЧЕНИЕ: S.typhi – цитрат-, H2S-, расщепляет глюкозу до
кислоты;
S.paratyphi A – H2S+/-, LDC-
 Факторы патогенности
• Фимбрии (адгезия)
• Способность внедения в клетку (система секреции III) и
внутриклеточного размножения (макрофаги, эпителиальные
клетки)
• Эндотоксин
• Цитотоксин (SLT) – ингибирует синтез белков (некроз)
• Энтеротоксин (LT, ST) – активирует мембранные
аденилат/гуанилатциклазы (диарея)
• Сидерофоры (связывают Fe)
• Ag Vi (антифагоцитарный, ингибирует активацию
комплемента, устойчивость к бактерицидному действию
сыворотки)
• Большинство сальмонелл (98%) восприимчивы к
бактериофагу O1. Существуют бактериофаги с видовой и
вариантной специфичностью.
• Среда обитания: кишечник людей, животных, птиц,
рептилий. Водные позвоночные (птицы, рептилии), домашние
птицы, быки, овцы, свиньи и т.д. часто заражены (мясо, яйца)
• Устойчивость к внешней среде: сальмонеллы устойчивы к
70°C 30 мин., устойчивость к холоду и большим
концентрациям солей. Выживают несколько недель в
засушливой среде и месяцы – в воде. Размножаются в
пищевых продуктах при комнатной температуре.
Источник инфекции и пути заражения

• Причиной сальмонеллеза, чаще всего, являются

содержащие сальмонеллы яй ца - (до 90 % случаев
сальмонеллезов связано с употреблением сырых или
недостаточно термически обработанных яиц),
• мясные и молочные продукты, и, в меньшей степени,
рыба и рыбные продукты, а также продукты
растительного происхождения.
• Природный резервуар сальмонелл — домашние
птицы и животные: утки, куры, крупный рогатый
скот, свиньи, овцы. Заражение сальмонеллами мяса
происходит после убоя, при нарушении правил
разделки и хранения мяса.
• Попадание сальмонелл в пищу часто происходит при
ее неправильной кулинарной обработке, при
несоблюдении санитарных норм при ее
приготовлении.

• Сальмонеллы могут вызывать различные

заболевания мочеполовых органов человека, в
 Заболевания, вызываемые
сальмонеллами
• Сальмонеллёзы:
I. Тифо-паратифозная лихорадка
II. Сальмонеллёзы пищеварительной системы (пищевые
токсикоинфекции, гастроэнтериты)
III. Внепищевариательные проявления:
        - не тиофидные бактеремии
        - плевро-легочные инфекции
        - костно-суставные нарушения (остит, остеомиелит,
септический артрит и т. д.)
        - внутрибольничные инфекции
        - сердечно-сосудистые инфекции (перикардит,
артериит)
        - инфекции мочевыводящих путей
        - абдоминальные инфекции (холецистит, абсцесс
печени, селезенки)
        - инфекции ЦНС (менингит, абсцесс головного
мозга, эпидуральный абсцесс и др.)
 Тифо-паратифозная лихорадка

• Инфекционные агенты – S.typhi, S.paratyphi A, B, C

• Источник инфекции – больной человек, носитель
• Заражение – фекально-оральный путь (вода, продукты),
прямой контакт
• Инфекционная доза – 105 бактерий

ВОЗ – ежегодно 18 – 33 млн случаев заражения, из них

500.000 – 600.000 случаев – смертельный исход
 • Клинические проявления
I. Период инкубации - 1-3 недели
Инвазия и внутриклеточное размножение
II. Продромальный период (инвазии) – 1-3 дня
- Проникновение в лимфатические узлы с размножение
сальмонелл (продромальный период)
I неделя болезни (бактеремия). Попадание в кровоток через
лимфатическую систему (разрушение микробов с выделением
эндотоксина). Эндотоксин с кровью достигает
нейровегетативных центров третьего мозгового желудочка,
вызывая температуру, тифозное состояние, сердечно-сосудистый
коллапс и т.д. Период разгара.
Внезапное начало, озноб, температура 39-41 градусов, головные
боли, ступор, сонливость, бред, кома.
Сыпь появляется на животе, груди, спине на 8-9 день болезни
(лимфатические эмболы с бактериями).
Диарея, запор, сердечно-сосудистые расстройства.
Продолжительность 7-10 дней.
II неделя болезни (паренхиматозная диффузия)
Бактерии фиксируются на органах и размножаются в печени,
селезёнке, костном мозге, лимфотической ткани и т.д. С этого
периода сальмонеллы выявляются в слюне, фекалиях, моче,
желчи и т.д.
III-IV неделя болезни (аллергическая фаза). Из печени
сальмонеллы попадают в желчевыводяцие пути, потом снова в
кишечник. На уровне Пейровых бляшек развивается – некроз,
язвы.

• Осложнения: кишечные кровотечения, перфорация

кишечника, перитонит, миокардит, менингит, психоз и т.д.
• Период реконвалесценции (1-3-6 месяцев)
• Иммунный ответ – клеточный, гуморальный
• 5-10% выздоровивших – носители до 3-х месяцев (бактерии в
желчи и/или в моче)
• 3-5% выздоровивших (с билиарным литиазом) – хронические
носители– (1-10 лет – всю жизнь)

• Рецидивы возможны (бактериальные выделения из глубоких

очагов, L-формы), характеризуются ослабленными
симптомами и кратковременным развитием.
 Лабораторная диагностика тифо-
паратифозной лихорадки

• Биоптаты: кровь (период лихорадки, в особенности в 1-ю

неделю),
• эксудат с высыпаний, (с 8-9го дня),
• сыворотка крови желчь, (с 10-11го дня),

фекалии, моча, костный мозг (2 - 3-я неделя болезни)

 Методы диагностики
• Микроскопия – РИФ, окраска по Грамму
 Бактериологический экзамен

Гемокультура – 10-15 мл крови засеивается на 100 мл

желчного бульона, среду Rappoport, глюкозный бульон 1% или
бифазную среду для обогащения сальмонелл. Инкубируются
при 37 градусах и на 1, 2, 3, 5, 7 и 10 высеиваются на ДД
(Endo, Levin, Ploskirev, W-B) для выделения чистой
культуры. Колонии лактозо – высеиваются на среду Kligler

(Olkeniţki) для накопления чистой культуры.

• Финальная идентификация - на основе изучения
морфотинкториальных, культуральных, биохимических,
антигенных характеристик (РА на пластинке с
поливалентными иммунными сыворотками ABCDE,
моновалентной сывороткой анти-О (O2, O4, O6, O9 и т.д.),
моноспецифической сывороткой анти-Н, чувствительность
к бактериофагам).
• Окончательный отрицательный результат - на 11-й день.
• Розеолокультура (эксудат из розеол засеиваем в 3-5 ml
желчного бульона)
• Миелокультура (0,5 ml костного мозга из грудины в 3-5 мл
желчного бульона )
• Желчекультура (через 3-6 месяцев после выздоровления, 5-10
мл желчи вводятся в ПБ)
Roseolo-, миело- и желчкультура проверяются как и
гемокультура
• Копрокультура (со 2-ой недели) – 3-5 г фекалий засеваются
прямо на ДД среды и на среды обогащения (Muller,
Kauffman). Положительный результат – 4-5 день,
отрицательный результат – после 3-х дней.
• Урокультура (10 мл мочи центрифугируются, осадок
исследуется как и копрокультура)
• Серодиагностика (со 2-рой недели)
1. РА Widal – к разведёниям сыворотки пациента добавляется
диагностикум OH от S.typhi, Paratyphi A и B. Диагностический
титр 1/200 или возрастание титра в динамике.
2. РА модификация Felix (диагностикумы O и H используются
отдельно).
Антитела анти-O (Ig M) появляются первыми (начиная с 7-8 дня)
и и исчезают через 2-3 месяца (максимальный уровень 2-3-я
неделя).
Антитела анти-H (Ig M, потом Ig G) появляются позже ( на 10-12
день) и сохраняются на более длительный период. К началу
выздоровления (4-я неделя) титры Ат anti-O и anti-H
выравниваются.
3. РНГА (с эритроцитарным диагностикумом O)
 Выявление носителей

• Копрокультура
• Урокультура
• Желчекультура
• Серодиагностика
1. Реакция Vi-аглютинации (эритроциты, чувствительные к
Ag Vi). Диагностический титр - 1/40
2. Реакция латекс-аглютинации
3. Определение классов Ig G
 Лечение и профилактика
Лечение:
- Флорохинолоны
- Цефалоспорины 3-го поколения
- Хлорамфиникол
- Ампицилина
- Котримаксозол
Антибиотикограмма обязательна, мультирезистентные штаммы часто
встречаемы!!!
Специфическая профилактика: селективная вакцинация (зоны эндемий,
военные, мед. персонал и т.д.)
- Вакцина химическая TABTe
- Вакцина антитифозная инактивированная
- Вакцина атенуирования Ty21a (оральный приём, местный иммунитет с
IgA), противопоказана беременным, детям, людям с иммуннодефицитом
- Вакцина субединичная к Ag Vi (ареактогенная, иммунитет
на 3-5 лет)
 Сальмонеллёзы пищеварительные
(гастроэетериты, пищевые токсикоинфекции)

• Последствие потребление заражённых продуктов

питания (яй ца, май онез, кондитерский крем, мясо,
молочные продукты и т. д.).

• Инфицирующие агенты: бипатогенные сальмонеллы

Gr. B (S. typhimurium, S. paratyphi B, S. heidelberg, S.
derbi)
Gr. C (S. choleraesuis, S. newport, S. paratyphi C)
Gr. D (S. enteritidis, S. dublin)
Gr. E (S. anatum)
 Патогенез гастроэнтеритов
• Источник инфекции: домашние животные и птицы (больные
или хронические носители)
• Передача пищевым путём: (пища, заражённая непосредственно
от источника или во время процесса приготовления) через воду
или прямой контакт. Редко при вдыхании загрязненной пыли.
• Инфекционная доза - в зависимости от вирулентности штамма,
восприимчивости хозяина, возраста, использования АВ,
концентрации инокулята и т. д.
• Сальмонелла колонизирует слизистую оболочку тонкого
кишечника, проникает и размножается в энтероцитах, М-клетках
и макрофагах. Происходит интенсивная воспалительная реакция
(гастроэнтерит, острый гастроэнтероколит). Энтеротоксин
вызывает диарею (активирует аденилатциклазу или
энтероцитарную гуанилатциклазу), абсорбируемый эндотоксин
действует на ЦНС - признаки интоксикации.
• Гастроэнтерит может сопровождаться бактеремиями.
 • Клинические проявления:

Инкубационный период – 8 - 48 часов

Внезапное начало и краткосрочное развитие (1-3 дня) с

диареей, рвотой, температурой, головными болями,
слабостью.
Тяжёлое течение– у младенцев, стариков, людей с
иммунодефицитами (в особенности со СПИДОМ).
• Пищевые токсикоинфекции
Появляется как последствие употребления продукта, массивно
осеменённого микроорганизмами (105 – 107). Попадая в
кишечник, бактерии разрушаются, высвобождая эндотоксин,
вызывающий клинические признаки интоксикации.

• Другие формы сальмонеллёзов (сепсис, менингит, инфекции

мочевыводящих путей, нозокомиальные инфекции и т. д.)
Развивается у людей с низким иммунитетом.
Лабораторная диагностика сальмонеллёзов
• Биоптаты: в зависимости от клинической формы –
фекальные, рвотные массы, кровь, желудочные смывы,
моча, гной, остатки употреблённых продуктов.
• Методы диагностики:
1. Бактериологическое исследование – стандартное
(копро-, гемо-, урокультура...)
2. РИФ – для быстрой диагностики
3. Серодиагностика - РНГА
• Профилактика сальмонеллёзов – неспецифическая

• Лечение – симптоматическое, антибиотикотерапия при

необходимости (тяжёлые формы инфекции, маленькие дети,
старики, люди с иммунодефицитами)