Mtodos Cuantitativos

Soluciones y Disoluciones Parte I

Universidad Rice Departamento de bioqumica y biologa celular

Soluciones Peso/Peso (P/P)

La manera mas sencilla de describir una solucin Una solucin 1% es 1g de soluto en 100g del peso final de la solucin Para crear: pesar soluto, pesar solvente y mezclar 1ml. De agua pesa 1g, puede mezclar el peso del solvente con un volumen de agua P/P es comnmente usado en microbiologa

Notas del narrador

Parte

I de esta serie presenta los tipos de mezclas que pueden ser preparados y / o se encuentran en un laboratorio biolgico, y hablaron de sus propiedades. Se examinaron las propiedades del agua, el ms importante biolgicos disolvente, y se describen las calidades de agua con respecto a la calidad. Tambin introdujo el equipamiento bsico para la solucin de la toma de trminos y conceptos relacionados con las frmulas, y el concepto de la mole. La segunda parte se mostrar cmo preparar las soluciones de los tipos comunes de las frmulas y le mostrar cmo realizar diluciones con

Referencias
Farone,

M. B. & Farone, A. L. (1999). Dilution Solutions. Kendall-Hunt. [This work is a practical student guidebook and workbook that includes descriptions of types of formulas and how to conduct dilutions, problem sets, and chapters on working with cells, viruses, nucleic acids, and proteins]. Gerstein, A. (Ed.). (2001). Molecular Biology Problem Solver. John Wiley & Sons, Inc. Reed, R., Holmes, D., Weyers, J., & Jones, A. (2003). Practical Skills in Biomolecular Sciences (2nd ed.). Pearson/Prentice Hall. Scopes, R. K. (1994). Protein Purification: Principles and Practice (3rd ed.). Springer-Verlag. Seidman, L. A. & Moore, C. J. (2000). Basic Laboratory Methods for Biotechnology. PrenticeHall. [This handbook thoroughly describes a broad range of laboratory methods and is written at a level suitable for students. It serves as a good

Soluciones Peso/Volumen (P/V)

Son

referentes a una masa especifica en un volumen final Una solucin P/V significa 1g de soluto diluido en 100 ml. de solvente 100%=100g/litro (g/l)= 1000g=1000ml.=1g/1ml. 0.85% de NaCl puede ser 0.85g en 100 ml.

Cuando describimos una operacin de concentracin como un porcentaje sin especificar el tipo de frmula, que implica que la solucin es hacerse con el peso en volumen (w / v) el mtodo. Al igual que con w / w, el peso en volumen es un tipo simple de la frmula para describir la preparacin de una solucin de material slido en un solvente lquido. Este mtodo puede ser usado para describir cualquier solucin, pero es comnmente utilizado para las soluciones salinas simples y cuando el peso frmula del soluto se desconoce, variable, o irrelevantes, que a menudo es el caso con tintes de complejos, enzimas y otras protenas. Soluciones que requieren de materiales procedentes de fuentes naturales a menudo estn dispuestos w / v, porque la frmula molecular de la sustancia es desconocida y / o porque la sustancia no puede ser descrito por una frmula nica. Una solucin por ciento se define como 1 gramo de soluto por 100 mililitros de volumen final. Por ejemplo, 1 gramo de cloruro de sodio, llev a un volumen final de 100 ml con agua destilada, es una solucin de NaCl al 1%. Para ayudar a recordar la definicin de una solucin al 1%, recuerde que un gramo es la masa de un mililitro de agua. La masa de un soluto necesarios para hacer una solucin al 1% es de 1% de la masa de agua pura del volumen final deseado. Ejemplos de soluciones 100% son 1000 gramos en 1000 mililitros o 1 gramo en 1 mililitro. Hagamos un 0,85% de solucin de cloruro de sodio, una solucin salina fisiolgica a menudo llamado por la combinacin de 0,85 g de NaCl en un volumen final de 100 ml de agua de alta calidad. Podemos tener un uso de esta solucin, porque los iones sodio y cloro son los principales iones inorgnicos en la sangre de los vertebrados. Esto significa que son los principales iones inorgnicos en el lquido en los tejidos que rodean nuestras clulas. La concentracin de NaCl en sangre es de aproximadamente 0,85%, por lo que si estamos trabajando con los rganos, tejidos o clulas, se utiliza este tipo de soluciones (a menudo con otros componentes en menor concentracin) para mantener las membranas celulares del deterioro y mantener un entorno neutral osmticamente .

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Ejemplo: Preparar 2 litros de NaCl al 0.85%

0.85%

P/V es agregar 0.85g por 100ml. De solvente 2 litros es 20 X 100ml. La cantidad a pesar es 20 X0.85 = 17g Obtenerla en matraz Agregar agua destilada al matraz sobre el NaCl.

 Con

el 1% se define como 1 gramo por cada 100 ml, 0,85% es de 0,85 gramos por cada 100 ml. Desde dos litros es 20 veces el volumen de 100 ml, necesitamos 20 gramos x 0,85, o 17 gramos de NaCl. Para esta cantidad, podemos utilizar un equilibrio de carga superior o incluso un balance del viaje. Una balanza electrnica tpico tiene una precisin de centsimas de gramo, que es lo suficientemente preciso para pesando 17 gramos. Primero "tara" el instrumento al colocar un peso en barco sobre la cacerola y la creacin a "cero". No queremos contaminar nuestras poblaciones de qumica, de modo que sea limpiar la esptula o una cuchara antes de sumergirla en un recipiente, o simplemente agitar la sustancia qumica a cabo en el barco. Supongamos que toque a 16,97 gramos de NaCl. Habra que llegar a la molestia de que duran 0,03 gramos? No, estamos bastante cerca. Si era necesario para ser ms exactos, diramos que la frmula es algo as como 0,846% de NaCl, o tal 0,8495%. Si hay alguna ventaja de ser tan precisa, se debe ejercer de precisin. De lo contrario, tratando de ser demasiado precisos slo una prdida de tiempo. Recuerde cmo utilizar cifras significativas? Diecisiete gramos significa ms de 16,5 gramos y menos de 17,5 gramos. Si

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Soluciones Volumen/volumen (V/V)

Es

mezclar lquidos compatibles por volumen Salvo que el agua es tomada como el solvente menos especifico Se usa tpicamente cuando diluyes soluciones stock, por ejemplo el alcohol Etanol al 70%=0.7 L. de etanol puro en un volumen final de un litro

De volumen en volumen es otra forma comn de describir una solucin. Nosotros simplemente describir el por ciento del volumen total aportado por el soluto lquido. Al igual que con los otros tipos de frmulas utilizadas en la biologa, suponemos que el solvente es el agua a menos que se especifique de otro disolvente. V / V a menudo se utiliza para describir las soluciones de alcohol utilizados en la histologa o para trabajar con las protenas y cidos nucleicos. Por ejemplo, el 70% de etanol no es ms que 70 partes de etanol puro mezclado con agua para hacer un total de 100 partes. Para hacer un litro de solucin de este tipo que se iniciara con 0,7 L de etanol absoluto y llevar el volumen final a 1 litro con agua. Ms a menudo, podemos encontrarnos con un 95% de alcohol. Para hacer una solucin de 70% a partir de un 95% de solucin de valores requiere un clculo poco ms. Hablaremos de eso ms tarde, cuando hablemos de cmo hacer diluciones. Decoloracin de los geles de protenas se refiere a la inmersin de un gel teido en alcohol acidificado para eliminar todos los tintes que no est unido a protenas, lo que revela las bandas. Una solucin decolorante til consiste en un 7% de metanol y cido actico al 10%. Esto significa que con 100 ml de puro (o "glacial") de cido actico y 70 ml de metanol por litro de solucin final.

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Molaridad
Define

soluciones por la concentracin de molculas en vez de la masa Mas universal que P/V til cuando proporciones especificas de molculas son necesitadas, o cuando las soluciones tienen diferentes formas El peso molecular o formula de peso de la sustancia debe ser conocido

Una desventaja de las frmulas que describen como w / v (%) es que la descripcin no dice nada sobre la concentracin real de las molculas en solucin. Qu pasa si queremos cantidades iguales de dos productos qumicos que se mezclan, de manera que por cada molcula de la sustancia # 1 hay una sola molcula de la sustancia # 2? La misma cantidad en gramos probablemente no va a contener el mismo nmero de molculas de cada sustancia. Otra desventaja de la w / v mtodo es que el mismo producto qumico puede venir en muchas formas, y un gramo de una sustancia qumica de una forma puede contener una cantidad diferente de la sustancia qumica de un gramo de otra forma. Imagnese trabajar con un producto qumico que puede utilizarse en varias formas de hidratacin. Por ejemplo, el cloruro de calcio (CaCl2), se puede adquirir como un producto qumico seco en forma anhidra, de modo que lo que pese a cabo es casi todo el cloruro de calcio puro. Por otra parte, usted puede tener un stock de producto qumico en polvo que se hidrata con siete molculas de agua por molcula de CaCl2. La misma masa de este producto qumico en el presente formulario contendr menos molculas de cloruro de calcio que en forma anhidra. Dado que con frecuencia quieren saber la concentracin real de las molculas de una sustancia en solucin, que a menudo es mejor tener una medida universal que funciona independientemente de cmo se suministra la sustancia qumica. Mientras que el peso molecular (a veces llamado peso frmula) es conocido, podemos describir una solucin en forma de moles por

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Preparacin de soluciones M/L Determinar el volumen que se necesita

expresado en litros Determinar la concentracin deseada, en moles por litro Determinar el peso molecular del soluto Multiplicar el peso molecular por la concentracin deseada, para obtener peso por litro Mezcla con el disolvente tal como se describe anteriormente, quedando la solucin final con el volumen deseado.

The first step in the preparation of any solution is to decide how much to make. To simplify the calculations, express the desired volume in liters. For example, if you want to prepare 200 milliliters of a solution, express the volume as 0.2 liter. Your formula may describe the concentration in moles per liter. For example, 0.25M means 0.25 moles/liter. It may call for a millimolar (mM) solution, a micromolar (M) solution,a nanomolar (nM) solution, or even a picomolar (pM) solution. One mM, one m, one nM, and one pM are 1/1000, 1/1,000,000, 1/1,000,000,000, and 1/1,000,000,000,000 mole/liter, respectively. Whatever prefix is used to describe the desired molar concentration, it is easier to do the calculation by converting the concentration to moles/liter. For example, 25 M can be expressed as 0.000025M, or 2.5 x 10-5M. If you know the desired concentration in moles/liter and the formula weight of the substance, you can multiply these numbers and obtain mass per liter (moles/liter X grams/mole = grams/liter). And if you know the volume you need in liters, you then can multiply mass per liter times the desired volume to figure the amount to weigh (grams/liter X volume in liters = grams to weigh). Remember that extreme precision is seldom either necessary or practical. It usually is good enough to get the actual concentration to within 1% of the desired

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Trabajando con las formulas de peso El peso molecular = al peso en

gramos de una mol de una sustancia La formula de peso es mayor que o igual al peso molecular, dependiendo de cmo esta preparado el peso La solucin preparada con la formula de peso ser el mismo independientemente del edo. De hidratacin del material

Al igual que con w / v soluciones, nos Pesar una cantidad especfica de productos qumicos al tomar una solucin molar. A diferencia de w / v soluciones, la cantidad de peso depende del peso molecular (MW) de la sustancia en gramos por mol (g / mol). Para calcular la masa de soluto deseado, necesita conocer el peso de frmula. Pesos frmula generalmente estn impresos en la etiqueta y el identificado por la sigla FW Peso molecular es la masa de material en gramos que contiene un mol de sustancia. Puede incluir materiales inertes y / o la masa de las molculas de agua, en el caso de los compuestos hidratados. Para los compuestos puros, el peso frmula es el peso molecular de la sustancia y puede ser identificado como tal. Por ejemplo, el peso molecular del cloruro de calcio es de 111,0 gramos por mol (g / mol), que es el mismo que el peso de la frmula si el material es anhidro. Cloruro de calcio (CaCl2 2H2O) es 147,0 g / mol. El peso frmula de CaCl2 6H2O (hexahidratado) es 219,1 g / mol. Un compuesto hidratado es un compuesto que est rodeado por molculas de agua mantienen en su lugar por puentes de hidrgeno. Las molculas de agua en un compuesto hidratado a formar parte de la solucin cuando se disuelve el material. Por lo tanto, 111,0 gramos de CaCl2 anhidro, 147,0 gramos de CaCl2 dihidratado, o 219,1 gramos de CaCl2 hexahidratado en un litro de volumen final de todos los productos a 1 mol por litro solucin, abreviado 1M. Suponga que usted necesita un litro de una solucin de cloruro clcico al 10 mm (10 milimolar, o un 0,01 moles por litro), y usted slo tiene dihidrato CaCl2. Para hacer su solucin de 10 mm, se pesarn 1 / 100 del peso frmula para CaCl2 dihidratado, que es de 0,01 x 1,47 = 147,0 gramos y llevarlo a un litro.

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Complicaciones de la formula de peso

La

formula de peso puede ser desconocida El material puede ser no puro El material puede ser higroscpico

Tal vez usted no puede encontrar una frmula de peso en la etiqueta, o quizs usted est planeando un protocolo y no tienen los productos qumicos reales en la mano. Se puede calcular el peso molecular de la frmula qumica con la ayuda de una tabla peridica. Hay que tener en cuenta a la hora de comprar el producto qumico que el peso de la frmula no puede ser idntica a la del peso molecular. Supongamos que usted ya ha determinado cunto pesarn, basado en el peso molecular, pero el peso frmula es mayor debido a la hidratacin o la presencia de material inerte. Su nico recurso es simplemente para multiplicar su masa calculada por la proporcin entre el peso frmula para el peso molecular (o, simplemente, volver a calcular el peso necesario). Por ejemplo, supongamos que usted necesita 10 gramos de CaCl2 puro (MW 111,0 g / mol), pero descubri que todo lo que tiene es la forma hexahidratado (CaCl2 6H2O, FW 219,1 g / mol). Tome 219,1 dividido por 111,0 y multiplicar por 10. Necesitas 19,7 gramos de CaCl2 6H2O. Los materiales no siempre estn disponibles en 100% puro. La descripcin de la etiqueta puede indicar que el producto qumico es> 99% de pureza. Este suele ser el caso de enzimas y otras protenas que debe ser purificado a partir de fuentes naturales. La mayora de nosotros no te preocupes por la pureza si es superior a 99%. Una mayor precisin podra ser importante para anlisis qumico, por ejemplo, pero rara vez es necesario en aplicaciones biolgicas. Si hay impurezas significativas o si te empeas en ser tan precisos como sea posible, a continuacin, calcular la cantidad de material que necesita y se dividen por la fraccin que representa la pureza de la sustancia. Por ejemplo, si usted necesita 10 gramos de una sustancia pura, pero lo que tenemos es el 95%, y luego dividir 10 gramos por 0,95 para obtener 10,5 gramos (nota de que el resultado ha sido redondeado a un nivel razonable de precisin). La mayora de los productos qumicos tienden a absorber el agua a menos que se encuentren desecado, es decir, hasta cierto punto, son higroscpicas. Este problema no debe confundirse con el estado de hidratacin, que se refiere a la asociacin directa de molculas de agua con molculas de la sustancia a travs de puentes de hidrgeno. Cloruro de magnesio se utiliza comnmente en buffers biolgicos, y es notablemente higroscpica. El peso frmula no incluye la masa aadida de agua que se absorbe de la atmsfera. De hecho, la cantidad de contaminacin depende de cunto tiempo y bajo qu condiciones el producto qumico ha sido dejado de lado, especialmente con respecto a la humedad.

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Quieres

Ejemplo: preparar 200ml. De sacarosa al 70 mM

preparar 200ml. Entonces son

0.2 L La concentracin es de 70 mM, entonces es 0.07M La formula de peso de sacarosa es de 342.3g/mol Amt./litro= (342.3)(0.07)=23.96 gramo/litro La cantidad necesaria es 0.2L X 23.96 g/L=4.792

 Suponga

que usted necesita 200 milliters de una solucin de 70 mm de sacarosa. Doscientos mililitros es 0,2 l, y 70 mm es 0.07M. El peso molecular de la sacarosa, puede determinarse a partir de su frmula qumica, es decir, C12H22O11, y los pesos atmicos de carbono, hidrgeno y oxgeno. El peso de la frmula de la sacarosa es idntica a su peso molecular, es decir, 342,3 gramos por mol. Una solucin 1M consistira en 342,3 gramos de sacarosa en un litro de volumen final. Una concentracin de 70 mm es el mismo que 0,07 moles por litro. Multiplique 0,07 moles / litro de 342,3 gramos por mol y se obtiene 23,96 gramos necesarios por litro. Para hacer 200 mililitros de la solucin, se multiplican gramos / litro de litros necesarios. Desde 200 mililitros es 0,2 l, multiplicar 23,96 gramos de 0,2 l para obtener los 4,792 gramos necesarios. Desde el tpico Top Electronic carga masiva muestra equilibrio con una precisin de 0,01 gramos, la cantidad que se pesarn deben redondearse a 4,79 gramos, aunque es perfectamente aceptable y quizs incluso preferible redondear a 4,8 gramos.

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Molaridad y Normalidad
La

molaridad se refiere al No. De moles por unidad de mas, usualmente es usada Normalidad se refiere al No. De equivalentes por unidad de volumen Normalidad no puede ser algn mltiplo de la molaridad Normalidad es usada cuando se habla de cidos y bases

Yo nunca he preparado una solucin de una frmula de molar. Molalidad se refiere a un nmero de moles por kilogramo de disolvente (disolvente puro, es decir, no el total de kilogramos de la solucin). Molalidad es til cuando la preocupacin es el efecto de un soluto en las propiedades fsicas de una solucin, especialmente en el punto de ebullicin o punto de congelacin. Tenemos algunas aplicaciones para las frmulas de molares en la biologa. Si encuentra una frmula de molares, las normas para la preparacin de una solucin molar de aplicacin. Sin embargo, se deber sustituir moles por gramo de la solucin completa para moles por el volumen final. La normalidad se refiere al nmero de moles de un nmero de soluto (equivalentes), en relacin con algn producto. En estos das, la normalidad es la ms utilizada para describir las concentraciones de cidos y bases. Hidrxido de sodio (NaOH) se utiliza comnmente para hacer que las soluciones biolgicas ms alcalino. Un mol de NaOH se disocia para producir un mol de iones hidroxilo. Por lo tanto, hay un equivalente de NaOH por mol de NaOH. Un mol de HCl se disocia para producir un mol de iones de hidrgeno, por lo que es un equivalente de HCl por mol. Por otro lado, el cido sulfrico (H2SO4) libera dos moles de iones de hidrgeno por mol en la disociacin. Por lo tanto, hay 2 equivalentes de cido sulfrico por mol. El nmero de equivalentes depende de la reaccin qumica de preocupacin. Si el cido sulfrico reacciona con otra sustancia qumica para producir agua, por ejemplo, un mol de cido sulfrico sera uno equivalente, ya que una molcula de agua requiere de dos iones de hidrgeno. En una reaccin similar, un mol de HCl sera 1 / 2 equivalente. Las soluciones normales son preparados como se preparan las soluciones

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