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AGROBIOTECNOLOGIA
CARLOS ALMENDARES UM1100SBO1983
Noviembre, 2002
AGROBIOTECNOLOGIA
Contenido
1 .- Alcance............................................................................................................................................. 4
2 .- Objetivos .......................................................................................................................................... 5
3.- Percepcin 4.- Introduccin 5.- Biotecnologa ....................................................................................................... ................................................................................................... .............................................................................................................. ..................................................................................... 6 8 10 11
6.- Que es la Biotecnologa ? 7.- Mtodos utilizados en la Biotecnologa 8.- Transformacin de plantas
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8.1.- Cmo se realiza la modificacin gentica?..................................................................... 22 8.1.1- Por Agrobacterium. ..................................................................................................... 8.1.2- Por Balstica 8.1.3- Electroporacin 9.- Marcadores Moleculares 10.- Otros Mtodos Biotecnolgicos 11.- Aplicaciones de la Ingeniera Gentica .......................................................................................... 30 31
AGROBIOTECNOLOGIA
Contenido
12.- Como mejorar la calidad de los alimentos............................................... .................................... 13.- Otras mejoras a la calidad de los alimentos ..............................................................................
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14.- Posible impacto en la agricultura.............................................................................. .................... 53 15.- Efectos sociales y economicos...................................................................................................... 16.- Conclusiones y Recomendaciones .............................................. 54 55
17.- Bibliografa...................................................................................................................................... 59
1. Alcance
El propsito de esta presentacin es el proporcionar una breve
descripcin de los mtodos utilizados en el desarrollo de productos modificados genticamente, informar de algunas opiniones sobre el tema, describir algunos de los productos que estn actualmente en el mercado o estn en proceso de ser comercializados y cual podra ser el impacto de estos productos en la agricultura y el medio ambiente. Se trata de informar y dar a conocer los principios de la Biotecnologa aplicada al reino vegetal.
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2. Objetivos
1. 2. Ampliar el conocimiento sobre la Biotecnologa de plantas. Proporcionar un mayor conocimiento en el tema a las personas de los diferentes estratos sociales con el nimo de ampliar su capacidad de reflexin para la toma de decisiones. Reconocer el esfuerzo de la aplicacin de la biotecnologa de plantas como una tecnologa alternativa para ayudar a resolver los problemas agroalimentarios en la creciente poblacin mundial. Provocar un cambio positivo de actitud hacia los esfuerzos de los cientficos por descubrir nuevas alternativas.
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3. Percepcin
Las biotecnologas agrcolas contienen el potencial para crear productos que nos pueden conducir en una de dos direcciones opuestas. Nos pueden ayudar a trascender o a perpetuar la era de la dependencia petroqumica de la agricultura. En qu direccin se encamine depender en gran medida de las instituciones y los actores sociales que promuevan su desarrollo. La visin corto-placista y motivada por los fines de lucro prevalecer en la medida en que los gobiernos, las agencias pblicas internacionales, las universidades pblicas y organizaciones no gubernamentales permanezcan como espectadores del desarrollo biotecnolgico, en vez de cumplir con sus misiones originales de cuidar el inters general del pblico. Por su parte, los movimientos sociales podran llenar el vaco que dejen algunas de estas instituciones para hacer llegar a la industria biotecnolgica las voces de los campesinos, los agricultores y del pblico consumidor. Aun cuando estas voces no se escuchan muy bien, podramos decir que hay una gran preocupacin porque la tecnologa agrcola sea accesible a agricultores de cualquier escala productiva (pequeos, medianos y grandes), de tal manera que no slo los grandes agricultores puedan ser viables, y porque los productos que lleguen al mercado sean saludables y no amenacen con destruir el medio ambiente y la biodiversidad.
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Percepcin
Existen ya varios productos de la biotecnologa que se han implementado en los campos, incluyendo varios cultivos transgnicos, cuyas superficies han aumentado exponencialmente en los ltimos aos. Por otra parte, la mayora de los pases europeos no han aprobado el uso de los cultivos transgnicos, han surgido movimientos sociales significativos en varios pases para protestar contra el desarrollo de cultivos modificados genticamente, y en ocasiones han forzado algunas compaas gigantes como la propia Monsanto a que archiven algunas tecnologas importantes. El punto que quiero resaltar, entonces, es que si bien hasta ahora la biotecnologa se ha desarrollado prcticamente sin tomar mucho en cuenta las preocupaciones del publico, la reciente movilizacin social demuestra que es posible obtener alguna respuesta por parte de la industria. Se pueden entonces estudiar las caractersticas de la industria y de los nuevos movimientos sociales que se han generado en respuesta a las nuevas tecnologas. Pues el conjunto de estas fuerzas socioeconmicas, como la industria, las polticas pblicas y los movimientos sociales conformarn el futuro de las tecnologas agrcolas y su sustentabilidad social y ambiental.
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4. Introduccin
Las plantas, fuente de alimento de la humanidad, han sido modificadas y mejoradas continuamente desde hace cientos de aos. Inicialmente, se logr mejorar la cantidad y la calidad de las cosechas, seleccionando semillas de las mejores plantas y reproducindolas mediante un continuo proceso de seleccin y mejoramiento. La utilizacin de mtodos tradicionales de mejoramiento ha resultado en un incremento substancial en la productividad, ocasionando rendimientos de casi el doble en cultivos como trigo y maz en los ltimos 50 aos. Recientemente, y a travs de tcnicas conocidas como Biotecnologa, Ingeniera Gentica o ADN recombinante ha sido posible introducir ADN directamente a las clulas de las plantas dando origen a modificaciones genticas muy especificas, evitando la introgresin de ADN repetitivo o ADN sin valor en el genoma que pudiera repercutir en un mal desarrollo de las plantas.
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Introduccin
Actualmente, existe un gran nmero de cultivos con alto rendimiento, que se han desarrollado a travs de Biotecnologa con caractersticas especficas, como: a) autoproteccin al ataque de insectos, hongos, virus y bacterias; b) selectividad contra ciertos herbicidas; c) incremento en el valor nutricional; d) control del proceso de madurez de frutas y vegetales para una mayor vida de anaquel; e) frutas y vegetales con mejor sabor; f) utilizacin de plantas como fbricas de polmeros biodegradables; g) incremento en masa de productos farmacuticos, etc.
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5. BIOTECNOLOGIA Despus de los trabajos que resultaron en la propuesta de una doble hlice como la estructura del cido desoxirribonucleico ( ADN ), fueron la plataforma de lanzamiento de un nuevo desarrollo de la biologa que se cristaliz en lo que hoy se conoce con el termino de Biotecnologa. La Biotecnologa es la integracin de las ciencias naturales y la ingeniera para conseguir la aplicacin de organismos, clulas, de sus partes y anlogos moleculares en la generacin de productos y servicios. Por tanto, la Biotecnologa debe entenderse como un rea de conocimiento que utiliza las herramientas desarrolladas en biologa molecular para aplicaciones concretas en campos tan diversos como salud y alimentacin humana y animal, agricultura y medio ambiente.
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6. QU ES LA BIOTECNOLOGA?
El trmino biotecnologa fue acuado por el hngaro Karl Ereky, hacia fines de la Primera Guerra Mundial. Ereky utiliz esta palabra para referirse a mtodos agrcolas intensivos. Desde entonces, la biotecnologa ha sido definida de diversas formas; sin embargo, casi siempre ha sido asociada con la produccin de alimentos y su procesamiento. En particular, la biotecnologa generalmente ha abarcado la manufactura tradicional del pan, vino, queso y otros alimentos fermentados. Sobre estas bases, la biotecnologa puede reconstruir sus races miles de aos atrs hasta los antiguos sumerios, que fabricaban cerveza con levaduras producidas naturalmente. Las fermentaciones practicadas en la antigedad no siempre llegaron a buen resultado. Los microbios que caan en la tinaja donde se haca el vino podan producir la ms fina cosecha o transformar todo el producto en vinagre. En el siglo XIX, Louis Pasteur sent las bases de la microbiologa e identific a los microorganismos bacterias, hongos, algas y protozoos- como la causa de los cambios tanto deseable como indeseables en los alimentos. La aplicacin de la investigacin de Pasteur llev a un procesamiento y preservacin de los alimentos ms seguro y confiable y ayud a asegurar la consecuente alta calidad de, por ejemplo, vinos y quesos. Pasteur aseveraba que los procesos de fermentacin estaban vinculados estrechamente con las actividades de los microbios vivos. Hacia fines del siglo pasado, se descubri que extractos libres de clulas provenientes de las levaduras tambin podan originar cambios qumicos sin la intervencin de los microbios de los cuales provenan. Los componentes activos de dichos extractos fueron denominados enzimas (enzima significa en levadura).
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QU ES LA BIOTECNOLOGA?
Las enzimas son protenas, producidas por todos los seres vivos, que catalizan reacciones qumicas especficas. Sin darse cuenta, los productores de queso siempre han utilizado una mezcla de enzimas naturales cuajo- para transformar la leche en cuajada slida y suero lquido. Durante los aos cuarenta, se desarroll equipo para la fermentacin a gran escala, lo que condujo a la produccin industrial eficiente, mediante la utilizacin de microorganismos, de enzimas puras, aditivos y otros compuestos valiosos (como las vitaminas) para su uso en los alimentos. As como las diferentes cerveceras tienen sus propias cepas de levaduras patentadas, las que son mantenidas cuidadosamente, los productores de enzimas cultivan cepas especialmente seleccionadas de los microorgan-ismos escogidos. Durante muchos aos se han hecho grandes avances para mejorar la eficiencia en la produccin, seguridad, calidad y espectro de productos microbianos disponibles. Sin embargo, todava se depende, en gran medida, de sucesos fortuitos seguidos por el aislamiento sistemtico de los organismos que posean las caractersticas deseadas. Durante los aos setenta se obtuvo la capacidad para hacer cambios precisos en el material gentico, la biotecnologa haba sido transformada. El desempeo de los organismos ahora puede ser sintonizado finamente, y con ello la biotecnologa ahora casi se ha convertido en un sinnimo de modificacin gentica. En 1980, un influyente informe britnico (el Informe Spinks) intent encapsular casi medio siglo de pensamiento europeo y estadounidense, definiendo a la biotecnologa como: la aplicacin de organismos, sistemas o procesos biolgicos a las industrias manufactureras y de servicios. Esta amplia definicin sirve a nuestros propsitos, ya que incluye la produccin de alimentos a travs de organismos vivos, su consiguiente procesamiento con la ayuda de microbios o enzimas y el aseguramiento de la calidad y seguridad de stos, utilizando las herramientas de la biologa molecular.
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Los genes, que pasan de una generacin a la siguiente, determinan todas las caractersticas hereditarias. Los genes estn hechos de ADN (cido desoxirribonuclico), gran parte del cual est almacenado en los cromosomas dentro del ncleo de las clulas de hongos, (incluidas las levaduras), vegetales y animales (Figura 1). Algunos genes tambin se encuentran fuera del ncleo: en las mitocondrias (que liberan la energa para las actividades celulares) y dentro de los cloroplastos de las clulas vegetales (lugar donde se realiza la fotosntesis). En las bacterias, la mayora de los genes se producen en un nico cromosoma circular, a pesar de que tambin pueden estar presentes en pequeos anillos de ADN denominados plasmidios . La doble hlice del ADN se asemeja a una escalera de cuerdas torcida. Las dos hlices entrelazadas estn hechas de molculas de azcar y fosfato unidas en forma alternada. A cada molcula de azcar se encuentra ligada una base. Existen cuatro bases diferentes: adenina (A), timina (T), citocina (C) y guanina (G). Las bases se encuentran unidas por enlaces dbiles que mantienen juntas a las dos hebras de la doble hlice al igual que los peldaos de una escalera. La A siempre hace par con la T y la C con la G. Este mecanismo de pareamiento de las bases asegura la duplicacin idntica de las hebras de ADN durante la divisin celular (Figura 2.)
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Por miles de aos, las enzimas, como el cuajo de los animales y la papana de las plantas, han sido utilizados para realzar el sabor, textura y apariencia de los alimentos. Debido a la diversidad de microorganismos, ha sido posible encontrar un amplio espectro de enzimas microbianas que son activas en las condiciones dadas en el procesamiento de alimentos. Con la modificacin gentica, se puede producir con mayor eficiencia un amplio grupo de enzimas puras y altamente especficas. Estas enzimas pueden utilizarse para realizar cambios deseables a los alimentos de manera rpida y a temperaturas relativamente bajas, con una consecuente reduccin en los requerimientos de combustible y en el impacto ambiental del procesamiento de alimentos. Para el consumidor, los beneficios directos incluyen mejor sabor, textura y duracin, a menudo, con una reduccin en la necesidad de procesamiento y aditivos.
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8. Transformacin de Plantas La primer planta transformada genticamente se logr en 1983 utilizando Agrobacterium tumefaciens, la cual es una bacteria que tiene la habilidad de transferir una porcin de su propio ADN (conocido como T-ADN) al genoma de las plantas al momento de infectar sus races. Ingeniosamente, los cientficos tomaron ventaja de esta propiedad de Agrobacterium, eliminando las secuencias en el T-ADN de Agrobacterium, para insertar en su lugar el ADN (gen) que codifica alguna caracterstica de importancia econmica (ejem. Proteccin contra insectos). Para optimizar le expresin del gen, se le agregaron a sus costados, secuencias de ADN para regular en que lugar, en que momento y en que parte de la planta el producto del gen debe expresarse.
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Transformacin de Plantas
Lo ms importante de este descubrimiento es que una vez que el gen es insertado en el cromosoma de una planta, este puede ser transferido a otras variedades usando mtodos tradicionales de mejoramiento, manteniendo su estabilidad y la progenie producto de un cruzamiento segrega en forma mendeliana. Este sistema funcion inicialmente con plantas dicotiledoneas (de hoja ancha como tomate, tabaco, algodn, soya, etc.). Sin embargo, utilizando cepas de Agrobacterium ms agresivas y con un rango de hospederos ms amplio, los cientficos, lograron transformar plantas de la familia Gramineae (maiz, trigo y arroz, etc.) usando esta metodologa. Para facilitar an ms la transformacin de cereales de importancia econmica se desarrollaron otras tcnicas como transformacin de protoplastos y bombardeo de partculas, los cuales permitieron transferir ADN directamente a los cromosomas de las clulas de las plantas. En la actualidad, despus de casi 16 aos de que la primera planta fue transformada, casi todos los cultivos de importancia econmica han sido transformados genticamente, indicando que quizs la Biotecnologa con todas sus metodologas y principios se podra considerar como uno de los mas grandes descubrimientos del siglo XX.
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8.1.3. Electroporacin
Electroporacin. El ADN tambin puede ser introducido en los tubos de
paredes delgadas que se desarrollan a partir de los granos de polen al someterlos a pulsos de microsegundos de un fuerte campo elctrico. Esta tcnica, llamada electroporacin, produce la dilatacin momentnea de los poros en los tubos de polen a travs de los cuales el ADN de la solucin que rodea a los tubos puede entrar en ellos. Las semillas que se desarrollan a partir de vulos fertilizados con ese polen transportan los genes introducidos. La electroporacin tambin funciona en clulas de plantas en que la pared celular ha sido removida por un tratamiento con enzimas. A partir de estas clulas desnudas de la planta, se puede regenerar toda una planta por medio del cultivo celular (ver ms adelante). La electroporacin tambin ha sido utilizada para transferir molculas de ADN en un amplio espectro de microorganismos.
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9. Marcadores Moleculares
Genes marcadores y sondas genticas. Cualquiera sea el mtodo utilizado, en el mejor de los casos, slo una pequea proporcin de las clulas tratadas absorber el ADN introducido. Por lo tanto, es necesario examinar las clulas para descubrir cules lo han hecho. Como se dijo anteriormente, los plasmidios, a menudo, transportan genes que ayudan a los microbios que los poseen a descomponer determinados antibiticos. Estos genes pueden ser utilizados como marcadores para identificar a aquellas clulas qu han absorbido plasmidios, para lo cual las clulas son colocadas en un medio de crecimiento que contiene un antibitico apropiado; slo las clulas con plasmidios sobrevivirn. En el reino vegetal, existen muchos tipos diferentes de genes marcadores y stos han sido desarrollados como alternativa a los marcadores antibiticos. Otros mtodos para identificar genes transferidos incluyen la PCR. Este mtodo permite la amplificacin de las secuencias de ADN transplantado, que luego pueden ser detectadas utilizando sondas genticas, que son pequeos fragmentos de una hebra de ADN o ARN que se une a secuencias complementarias en el ADN que est siendo seleccionado (Figura 7).
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Marcadores Moleculares
Las sondas tambin se pueden utilizar para detectar el ADN de microorganismos que podran contaminar los alimentos. Las sondas son tan sensibles y especficas que es posible utilizarlas para diferenciar cepas de una misma especie y determinar si microorganismos en particular son capaces de producir toxinas.
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Marcadores Moleculares
Interruptores genticos.
Para asegurar que la maquinaria bioqumica de las clulas receptoras permitir expresarse a los genes introducidos, se requieren secuencias de ADN, llamadas regiones de control. Una regin de control bien estudiada conecta y desconecta un gen para producir - galactosidasa. Esta enzima permite a las bacterias metabolizar la lactosa, pero slo se produce cuando ese azcar est presente en el medio circundante. El interruptor gentico asociado con el gen que codifica a la -galactosidasa puede ser ubicado frente a otros genes para que la adicin de lactosa al caldo de cultivo, en donde las clulas modificadas estn creciendo, gatille la expresin de los genes nuevos. Existen muchos interruptores genticos, algunos de los cuales, incluso, pueden ser regulados con un simple cambio de temperatura.
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1. Prdida de la expresin del gen. 2. Prdida del ADN durante la regeneracin de la planta. 3. Efectos de posicin, efecto del ADN que rodea al gen o el efecto.
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Conclusiones y Recomendaciones
Los beneficios de las plantas modificadas genticamente empiezan a ser una realidad. Sin embargo, es necesario hacer un anlisis muy profundo que demuestre que los beneficios de un producto son mayores que el impacto negativo que pudieran ocasionar en un ecosistema determinado. Sin embargo, esto no indica que debemos de cerrar las puertas a la utilizacin de tecnologas ms avanzadas a la par de otros pases, siempre y cuando sea de una manera ordenada y racional. Sera un error no aprovechar los beneficios de los productos derivados de la Biotecnologa, quizs el descubrimiento ms grande del siglo XX. Es importante sealar que la ingeniera gentica hace uso de algunos genes que no son de origen vegetal y que generalmente provienen de microorganismos procariotes y eucariotes, lo cual hace necesario que se incluyan para su correcta expresin secuencias reguladoras.
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Conclusiones y Recomendaciones
La ingeniera gentica no reemplaza al mejoramiento gentico tradicional, sino que proporciona una herramienta bsica que facilita la transferencia de genes de inters agronmico. La manipulacin e insercin de genes forneos en el genoma de una planta permite generar combinaciones genticas nuevas, con la finalidad de mejorar un carcter ya presente en la planta o introducir un carcter deseable para desarrollar un genotipo deseado. Actualmente a travs de la ingeniera gentica adems de manipular caracteres de inters agronmico, se esta trabajando en la mejora de la calidad de productos vegetales, contribuyendo a lograr en un futuro a una mejor nutricin.
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17. Bibliografa
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