ATLANTIC INTERNATIONAL UNIVERSITY

AGROBIOTECNOLOGIA
CARLOS ALMENDARES UM1100SBO1983

Noviembre, 2002

AGROBIOTECNOLOGIA

Contenido
1 .- Alcance............................................................................................................................................. 4

2 .- Objetivos .......................................................................................................................................... 5
3.- Percepcin 4.- Introduccin 5.- Biotecnologa ....................................................................................................... ................................................................................................... .............................................................................................................. ..................................................................................... 6 8 10 11

6.- Que es la Biotecnologa ? 7.- Mtodos utilizados en la Biotecnologa 8.- Transformacin de plantas

........................................................................................ 13 ............................................................................. 20

8.1.- Cmo se realiza la modificacin gentica?..................................................................... 22 8.1.1- Por Agrobacterium. ..................................................................................................... 8.1.2- Por Balstica 8.1.3- Electroporacin 9.- Marcadores Moleculares 10.- Otros Mtodos Biotecnolgicos 11.- Aplicaciones de la Ingeniera Gentica .......................................................................................... 30 31

......................................................................................................... 32 ...................... ............................................................ ............................. 33 36 40

AGROBIOTECNOLOGIA

Contenido

12.- Como mejorar la calidad de los alimentos............................................... .................................... 13.- Otras mejoras a la calidad de los alimentos ..............................................................................

45 48

14.- Posible impacto en la agricultura.............................................................................. .................... 53 15.- Efectos sociales y economicos...................................................................................................... 16.- Conclusiones y Recomendaciones .............................................. 54 55

17.- Bibliografa...................................................................................................................................... 59

1. Alcance
El propsito de esta presentacin es el proporcionar una breve

descripcin de los mtodos utilizados en el desarrollo de productos modificados genticamente, informar de algunas opiniones sobre el tema, describir algunos de los productos que estn actualmente en el mercado o estn en proceso de ser comercializados y cual podra ser el impacto de estos productos en la agricultura y el medio ambiente. Se trata de informar y dar a conocer los principios de la Biotecnologa aplicada al reino vegetal.
4

2. Objetivos
1. 2. Ampliar el conocimiento sobre la Biotecnologa de plantas. Proporcionar un mayor conocimiento en el tema a las personas de los diferentes estratos sociales con el nimo de ampliar su capacidad de reflexin para la toma de decisiones. Reconocer el esfuerzo de la aplicacin de la biotecnologa de plantas como una tecnologa alternativa para ayudar a resolver los problemas agroalimentarios en la creciente poblacin mundial. Provocar un cambio positivo de actitud hacia los esfuerzos de los cientficos por descubrir nuevas alternativas.
5

3.

4.

3. Percepcin
Las biotecnologas agrcolas contienen el potencial para crear productos que nos pueden conducir en una de dos direcciones opuestas. Nos pueden ayudar a trascender o a perpetuar la era de la dependencia petroqumica de la agricultura. En qu direccin se encamine depender en gran medida de las instituciones y los actores sociales que promuevan su desarrollo. La visin corto-placista y motivada por los fines de lucro prevalecer en la medida en que los gobiernos, las agencias pblicas internacionales, las universidades pblicas y organizaciones no gubernamentales permanezcan como espectadores del desarrollo biotecnolgico, en vez de cumplir con sus misiones originales de cuidar el inters general del pblico. Por su parte, los movimientos sociales podran llenar el vaco que dejen algunas de estas instituciones para hacer llegar a la industria biotecnolgica las voces de los campesinos, los agricultores y del pblico consumidor. Aun cuando estas voces no se escuchan muy bien, podramos decir que hay una gran preocupacin porque la tecnologa agrcola sea accesible a agricultores de cualquier escala productiva (pequeos, medianos y grandes), de tal manera que no slo los grandes agricultores puedan ser viables, y porque los productos que lleguen al mercado sean saludables y no amenacen con destruir el medio ambiente y la biodiversidad.
6

Percepcin
Existen ya varios productos de la biotecnologa que se han implementado en los campos, incluyendo varios cultivos transgnicos, cuyas superficies han aumentado exponencialmente en los ltimos aos. Por otra parte, la mayora de los pases europeos no han aprobado el uso de los cultivos transgnicos, han surgido movimientos sociales significativos en varios pases para protestar contra el desarrollo de cultivos modificados genticamente, y en ocasiones han forzado algunas compaas gigantes como la propia Monsanto a que archiven algunas tecnologas importantes. El punto que quiero resaltar, entonces, es que si bien hasta ahora la biotecnologa se ha desarrollado prcticamente sin tomar mucho en cuenta las preocupaciones del publico, la reciente movilizacin social demuestra que es posible obtener alguna respuesta por parte de la industria. Se pueden entonces estudiar las caractersticas de la industria y de los nuevos movimientos sociales que se han generado en respuesta a las nuevas tecnologas. Pues el conjunto de estas fuerzas socioeconmicas, como la industria, las polticas pblicas y los movimientos sociales conformarn el futuro de las tecnologas agrcolas y su sustentabilidad social y ambiental.
7

4. Introduccin
Las plantas, fuente de alimento de la humanidad, han sido modificadas y mejoradas continuamente desde hace cientos de aos. Inicialmente, se logr mejorar la cantidad y la calidad de las cosechas, seleccionando semillas de las mejores plantas y reproducindolas mediante un continuo proceso de seleccin y mejoramiento. La utilizacin de mtodos tradicionales de mejoramiento ha resultado en un incremento substancial en la productividad, ocasionando rendimientos de casi el doble en cultivos como trigo y maz en los ltimos 50 aos. Recientemente, y a travs de tcnicas conocidas como Biotecnologa, Ingeniera Gentica o ADN recombinante ha sido posible introducir ADN directamente a las clulas de las plantas dando origen a modificaciones genticas muy especificas, evitando la introgresin de ADN repetitivo o ADN sin valor en el genoma que pudiera repercutir en un mal desarrollo de las plantas.
8

Introduccin
Actualmente, existe un gran nmero de cultivos con alto rendimiento, que se han desarrollado a travs de Biotecnologa con caractersticas especficas, como: a) autoproteccin al ataque de insectos, hongos, virus y bacterias; b) selectividad contra ciertos herbicidas; c) incremento en el valor nutricional; d) control del proceso de madurez de frutas y vegetales para una mayor vida de anaquel; e) frutas y vegetales con mejor sabor; f) utilizacin de plantas como fbricas de polmeros biodegradables; g) incremento en masa de productos farmacuticos, etc.
9

5. BIOTECNOLOGIA Despus de los trabajos que resultaron en la propuesta de una doble hlice como la estructura del cido desoxirribonucleico ( ADN ), fueron la plataforma de lanzamiento de un nuevo desarrollo de la biologa que se cristaliz en lo que hoy se conoce con el termino de Biotecnologa. La Biotecnologa es la integracin de las ciencias naturales y la ingeniera para conseguir la aplicacin de organismos, clulas, de sus partes y anlogos moleculares en la generacin de productos y servicios. Por tanto, la Biotecnologa debe entenderse como un rea de conocimiento que utiliza las herramientas desarrolladas en biologa molecular para aplicaciones concretas en campos tan diversos como salud y alimentacin humana y animal, agricultura y medio ambiente.
10

6. QU ES LA BIOTECNOLOGA?
El trmino biotecnologa fue acuado por el hngaro Karl Ereky, hacia fines de la Primera Guerra Mundial. Ereky utiliz esta palabra para referirse a mtodos agrcolas intensivos. Desde entonces, la biotecnologa ha sido definida de diversas formas; sin embargo, casi siempre ha sido asociada con la produccin de alimentos y su procesamiento. En particular, la biotecnologa generalmente ha abarcado la manufactura tradicional del pan, vino, queso y otros alimentos fermentados. Sobre estas bases, la biotecnologa puede reconstruir sus races miles de aos atrs hasta los antiguos sumerios, que fabricaban cerveza con levaduras producidas naturalmente. Las fermentaciones practicadas en la antigedad no siempre llegaron a buen resultado. Los microbios que caan en la tinaja donde se haca el vino podan producir la ms fina cosecha o transformar todo el producto en vinagre. En el siglo XIX, Louis Pasteur sent las bases de la microbiologa e identific a los microorganismos bacterias, hongos, algas y protozoos- como la causa de los cambios tanto deseable como indeseables en los alimentos. La aplicacin de la investigacin de Pasteur llev a un procesamiento y preservacin de los alimentos ms seguro y confiable y ayud a asegurar la consecuente alta calidad de, por ejemplo, vinos y quesos. Pasteur aseveraba que los procesos de fermentacin estaban vinculados estrechamente con las actividades de los microbios vivos. Hacia fines del siglo pasado, se descubri que extractos libres de clulas provenientes de las levaduras tambin podan originar cambios qumicos sin la intervencin de los microbios de los cuales provenan. Los componentes activos de dichos extractos fueron denominados enzimas (enzima significa en levadura).
11

QU ES LA BIOTECNOLOGA?
Las enzimas son protenas, producidas por todos los seres vivos, que catalizan reacciones qumicas especficas. Sin darse cuenta, los productores de queso siempre han utilizado una mezcla de enzimas naturales cuajo- para transformar la leche en cuajada slida y suero lquido. Durante los aos cuarenta, se desarroll equipo para la fermentacin a gran escala, lo que condujo a la produccin industrial eficiente, mediante la utilizacin de microorganismos, de enzimas puras, aditivos y otros compuestos valiosos (como las vitaminas) para su uso en los alimentos. As como las diferentes cerveceras tienen sus propias cepas de levaduras patentadas, las que son mantenidas cuidadosamente, los productores de enzimas cultivan cepas especialmente seleccionadas de los microorgan-ismos escogidos. Durante muchos aos se han hecho grandes avances para mejorar la eficiencia en la produccin, seguridad, calidad y espectro de productos microbianos disponibles. Sin embargo, todava se depende, en gran medida, de sucesos fortuitos seguidos por el aislamiento sistemtico de los organismos que posean las caractersticas deseadas. Durante los aos setenta se obtuvo la capacidad para hacer cambios precisos en el material gentico, la biotecnologa haba sido transformada. El desempeo de los organismos ahora puede ser sintonizado finamente, y con ello la biotecnologa ahora casi se ha convertido en un sinnimo de modificacin gentica. En 1980, un influyente informe britnico (el Informe Spinks) intent encapsular casi medio siglo de pensamiento europeo y estadounidense, definiendo a la biotecnologa como: la aplicacin de organismos, sistemas o procesos biolgicos a las industrias manufactureras y de servicios. Esta amplia definicin sirve a nuestros propsitos, ya que incluye la produccin de alimentos a travs de organismos vivos, su consiguiente procesamiento con la ayuda de microbios o enzimas y el aseguramiento de la calidad y seguridad de stos, utilizando las herramientas de la biologa molecular.
12

13. MTODOS UTILIZADOS EN LA BIOTECNOLOGA

Gentica y Modificacin Gentica Cromosomas, genes y ADN

Los genes, que pasan de una generacin a la siguiente, determinan todas las caractersticas hereditarias. Los genes estn hechos de ADN (cido desoxirribonuclico), gran parte del cual est almacenado en los cromosomas dentro del ncleo de las clulas de hongos, (incluidas las levaduras), vegetales y animales (Figura 1). Algunos genes tambin se encuentran fuera del ncleo: en las mitocondrias (que liberan la energa para las actividades celulares) y dentro de los cloroplastos de las clulas vegetales (lugar donde se realiza la fotosntesis). En las bacterias, la mayora de los genes se producen en un nico cromosoma circular, a pesar de que tambin pueden estar presentes en pequeos anillos de ADN denominados plasmidios . La doble hlice del ADN se asemeja a una escalera de cuerdas torcida. Las dos hlices entrelazadas estn hechas de molculas de azcar y fosfato unidas en forma alternada. A cada molcula de azcar se encuentra ligada una base. Existen cuatro bases diferentes: adenina (A), timina (T), citocina (C) y guanina (G). Las bases se encuentran unidas por enlaces dbiles que mantienen juntas a las dos hebras de la doble hlice al igual que los peldaos de una escalera. La A siempre hace par con la T y la C con la G. Este mecanismo de pareamiento de las bases asegura la duplicacin idntica de las hebras de ADN durante la divisin celular (Figura 2.)
13

MTODOS UTILIZADOS EN LA BIOTECNOLOGA

14

MTODOS UTILIZADOS EN LA BIOTECNOLOGA

Un gen particular (tramo de ADN con una secuencia particular) determina la estructura de todo o parte de una protena especfica (Figura 3).

15

MTODOS UTILIZADOS EN LA BIOTECNOLOGA

Las secuencias de bases en el ADN especifican los residuos de aminocidos necesarios para fabricar las protenas. Tres bases en una fila especifican a cada aminocido, y la secuencia que especifica a cada uno de ellos el cdigo gentico es el mismo en todos los organismos vivos. (Figura 2). En el ADN tambin se encuentran codificadas las instrucciones para regular la produccin de protenas. A pesar de que todas las clulas de un organismo contendrn el mismo ADN, slo ciertas protenas sern producidas en un momento o tipo de clula determinado; es decir, slo se expresarn ciertos genes. El ADN tiene una estructura idntica en todos los seres vivos y, debido a que el cdigo gentico es universal, ha surgido la posibilidad de poder transferir genes entre especies completamente distintas. El proceso de transferencia, remocin o alteracin de informacin gentica a travs de la modificacin del ADN se denomina, comnmente, modificacin gentica (o ingeniera gentica).

16

MTODOS UTILIZADOS EN LA BIOTECNOLOGA

En la naturaleza, a menudo las protenas son producidas en cantidades muy pequeas y, por lo tanto, son difciles o imposibles de extraer y purificar. Estas protenas incluyen enzimas y una variedad de compuestos farmacolgicamente activos, como la insulina para los diabticos, interferonas para la terapia del cncer y vacunas para ayudar a prevenir las enfermedades. A menudo, se requieren grandes cantidades de estas valiosas protenas. Los biotecnlogos pueden lograr esto al transferir los genes relevantes a microbios que se pueden cultivar fcilmente en grandes cantidades. La misma tecnologa aplicada a la produccin de alimentos podra traer importantes beneficios. Variedades mejoradas para la agricultura. Durante siglos, los criadores de animales y plantas han seleccionado ganado y plantas con caractersticas deseables. La crianza a partir de un grupo escogido es un proceso muy lento que puede ser retrasado por la recombinacin fortuita de los genes de las cras descendientes. Un criador puede seleccionar una caracterstica preferida, slo para encontrar que es acompaada por otra indeseable, que luego debe ser cuidadosamente eliminada.
17

MTODOS UTILIZADOS EN LA BIOTECNOLOGA

Los mtodos tradicionales de seleccin de las mejores plantas o animales a partir de los cuales se realiza la crianza, han sido mejorados, en gran medida, por las tcnicas genticas modernas. Ms an, en la actualidad, es posible hacer cambios muy precisos al material gentico. Esto puede ayudar a mejorar la resistencia a las enfermedades y al estrs ambiental entre las plantas de cultivo y los animales de crianza. Tambin puede ayudar a incrementar la productividad agrcola y realzar el nivel nutricional, las propiedades de almacenamiento la facilidad para el procesamiento de los productos alimenticios. Aditivos alimentarios y medios auxiliares para el procesamiento. Las enzimas son protenas especializadas esenciales para la vida. Ellas catalizan todos los procesos biolgicos y, por ende, controlan el metabolismo de los organismos vivos. Una vez que son extradas de los organismos vivos, estas protenas permiten la realizacin de ciertos procesos en la produccin de alimentos.
18

MTODOS UTILIZADOS EN LA BIOTECNOLOGA

Por miles de aos, las enzimas, como el cuajo de los animales y la papana de las plantas, han sido utilizados para realzar el sabor, textura y apariencia de los alimentos. Debido a la diversidad de microorganismos, ha sido posible encontrar un amplio espectro de enzimas microbianas que son activas en las condiciones dadas en el procesamiento de alimentos. Con la modificacin gentica, se puede producir con mayor eficiencia un amplio grupo de enzimas puras y altamente especficas. Estas enzimas pueden utilizarse para realizar cambios deseables a los alimentos de manera rpida y a temperaturas relativamente bajas, con una consecuente reduccin en los requerimientos de combustible y en el impacto ambiental del procesamiento de alimentos. Para el consumidor, los beneficios directos incluyen mejor sabor, textura y duracin, a menudo, con una reduccin en la necesidad de procesamiento y aditivos.

19

8. Transformacin de Plantas La primer planta transformada genticamente se logr en 1983 utilizando Agrobacterium tumefaciens, la cual es una bacteria que tiene la habilidad de transferir una porcin de su propio ADN (conocido como T-ADN) al genoma de las plantas al momento de infectar sus races. Ingeniosamente, los cientficos tomaron ventaja de esta propiedad de Agrobacterium, eliminando las secuencias en el T-ADN de Agrobacterium, para insertar en su lugar el ADN (gen) que codifica alguna caracterstica de importancia econmica (ejem. Proteccin contra insectos). Para optimizar le expresin del gen, se le agregaron a sus costados, secuencias de ADN para regular en que lugar, en que momento y en que parte de la planta el producto del gen debe expresarse.

20

Transformacin de Plantas
Lo ms importante de este descubrimiento es que una vez que el gen es insertado en el cromosoma de una planta, este puede ser transferido a otras variedades usando mtodos tradicionales de mejoramiento, manteniendo su estabilidad y la progenie producto de un cruzamiento segrega en forma mendeliana. Este sistema funcion inicialmente con plantas dicotiledoneas (de hoja ancha como tomate, tabaco, algodn, soya, etc.). Sin embargo, utilizando cepas de Agrobacterium ms agresivas y con un rango de hospederos ms amplio, los cientficos, lograron transformar plantas de la familia Gramineae (maiz, trigo y arroz, etc.) usando esta metodologa. Para facilitar an ms la transformacin de cereales de importancia econmica se desarrollaron otras tcnicas como transformacin de protoplastos y bombardeo de partculas, los cuales permitieron transferir ADN directamente a los cromosomas de las clulas de las plantas. En la actualidad, despus de casi 16 aos de que la primera planta fue transformada, casi todos los cultivos de importancia econmica han sido transformados genticamente, indicando que quizs la Biotecnologa con todas sus metodologas y principios se podra considerar como uno de los mas grandes descubrimientos del siglo XX.
21

8.1 Cmo se realiza la modificacin gentica?

Corte y pegado de ADN. Las enzimas especializadas, obtenidas de las bacterias son una herramienta esencial para los bilogos moleculares. En la naturaleza, estas enzimas ayudan a las bacterias a detener los ataques virales por medio de la diseccin precisa del ADN extrao de los virus invasores. De este modo, se restringe la proliferacin de los virus. Las enzimas de restriccin (como se les conoce) reconocen y cortan las molculas de ADN en lugares especficos (Figura 4).

22

Cmo se realiza la modificacin gentica?

Muchos cientos de enzimas de restriccin han sido aisladas de diferentes microbios y se encuentran a la venta. Con las enzimas restrictivas, casi cualquier seccin de ADN y, en consecuencia, cualquier gen puede ser cortado a voluntad. El final de una molcula de ADN estar listo para unirse a otra que haya sido cortada con la misma enzima. Para unir dos molculas de ADN en forma permanente es necesario formar enlaces qumicos a lo largo de la columna vertebral de azcar-fosfato del ADN. Una enzima denominada ADN ligaza puede realizar este trabajo. La funcin de estas enzimas que cortan y pegan en el ensamble de nuevas molculas de ADN es obvia; sin embargo, el juego de herramientas de la ingeniera gentica estara incompleto sin la participacin de un par de enzimas adicionales. Para entender su papel es necesario apreciar el proceso de formacin de las protenas. Un intermediario gentico. La informacin gentica codificada en el ADN se encuentra en el ncleo de la clula. Sin embargo, las protenas no son hechas en el ncleo, sino en otro lugar, en estructuras especiales denominadas ribosomas. Antes de que se haga una protena en particular, primero se debe transcribir una copia de las instrucciones apropiadas y luego transportarlas a los ribosomas. 23

Cmo se realiza la modificacin gentica?

Las instrucciones copiadas son hechas a partir del ARNm (cido ribonucleico mensajero). Este ARNm es virtualmente una imagen espejo de la secuencia de bases en una hebra de ADN, segn las reglas de pareamiento de bases. A la llegada a los ribosomas, la secuencia base en al ARNm dirige la construccin de protenas a partir de los aminocidos. Se necesita una secuencia de tres bases adyacentes en la molcula de ARNm para determinar cada aminocido en la protena. Las clulas que producen una protena en particular tendrn muchas copias idnticas de ese ARNm de la protena dentro de ellas. A menudo, es ms fcil buscar genes entre las pequeas molculas de ARNm que a lo largo de la cadena completa del ADN de la clula. Una vez que un trozo escogido de ARNm ha sido aislado, se necesitan dos enzimas adicionales para lograr obtener un gen. ADN a partir de ARN. La enzima transcriptasa inversa une a una hebra de ADN complementario a lo largo del trozo correspondiente de ARNm. Una segunda enzima (ADN polimerasa) se puede utilizar luego para construir una hlice de doble hebra, utilizando la primera hebra de ADN como plantilla. El ADN hecho de esta forma es denominado ADN copia o complementario (ADNc). En la modificacin gentica se utiliza la copia de un gen de una clula donante.
24

Cmo se realiza la modificacin gentica?

Sntesis de genes. A travs del uso sensato de enzimas de restriccin y de otras, los bilogos moleculares son capaces de ensamblar molculas de ADN que contengan uno o ms genes de inters. En tanto es difcil aislar un trozo de ADN en particular, a veces es posible fabricarlo de manera artificial, utilizando un sintetizador de ADN. Bajo control computacional, estos aparatos dispersan los precursores bioqumicos necesarios para hacer tramos cortos de ADN. Por supuesto, para programar el sintetizador es necesario conocer la secuencia de bases presente en el gen deseado; esto tambin puede ser determinado automticamente, utilizando un secuenciador de ADN. Tambin es posible copiar genes especficos, utilizando la polimerasa de reaccin en cadena (PCR). La PCR ha sido comparada a un fotocopiador gentico. A partir de una cantidad muy pequea de ADN, se pueden hacer rpidamente millones de copias de una seccin especfica de ste.
25

Cmo se realiza la modificacin gentica?

La PCR deja atrs muchos de los espectaculares xitos de la impresin dactilar gentica forense, donde los criminales han sido identificados a partir de unas pocas gotas de sangre o incluso un par de clulas aisladas de una colilla de cigarrillo. Plasmidios. Una vez que se ha construido la molcula adecuada de ADN, sta debe ser incorporada a una clula en la cual pueda expresarse y duplicarse para pasar de una divisin celular a la siguiente. Uno de los mtodos ms exitosos en los microorganismos involucra la utilizacin de Plasmidios como vehculo para transferir a los genes. Los Plasmidios son anillos de ADN que se encuentran en algunas clulas. Transportan una cantidad limitada de grupos de genes y, normalmente, slo constituyen un pequeo porcentaje del ADN total de la clula. Durante el curso de la evolucin, la naturaleza ha seleccionado a los Plasmidios que transportan genes que ayudan a sobrevivir a sus huspedes, los microbios. Algunos Plasmidios otorgan a sus huspedes la capacidad de degradar sustancias en el medioambiente, como nutrientes y/o antibiticos. Muchos alimentos tradicionales, como el yogurt, queso y otros productos lcteos fermentados, contienen gran cantidad de microbios vivos que naturalmente albergan Plasmidios.
26

Cmo se realiza la modificacin gentica?

Al igual que el ADN de los cromosomas, el de los Plasmidios puede ser cortado con enzimas de restriccin y se les puede pegar ADN adicional. El resultado es un anillo de ADN recombinado que puede colocarse en una bacteria. Los Plasmidios especializados pueden utilizarse para transportar genes desde bacterias a clulas de levadura e incluso plantas (Figura 5).

27

Cmo se realiza la modificacin gentica?

Una limitacin de los Plasmidios es que no pueden albergar fragmentos de ADN superiores en largo a los 15000 20000 pares de bases. Sin embargo, algunos virus inocuos, especialmente diseados, pueden almacenar molculas de ADN ms grandes. Tales virus han sido utilizados para transferir genes a microbios, plantas, animales e incluso para el tratamiento de enfermedades humanas. Plantas modificadas genticamente. Un sistema vector que es utilizado para una gran variedad de plantas es el plasmodio inductor de tumores en plantas (plasmodio IT) que se encuentra en una bacteria presente en el suelo, denominada Agrobacterium tumefaciens. A travs de este plasmodio, la Agrobacterium tiene la capacidad de modificar naturalmente las clulas de la planta para que desarrollen tumores que producen compuestos que las bacterias necesitan para nutrirse. Los bilogos moleculares utilizan versiones desactivadas (que no inducen tumores) de estos Plasmidios para introducir en las plantas los genes ajenos seleccionados. Debido a que toda clula lleva en sus cromosomas una copia completa de todos los genes de la planta, es posible hacer crecer una planta completa a partir de una clula nica modificada (cultivo de clulas).
28

Cmo se realiza la modificacin gentica?

En la actualidad, se han producido Plasmidios IT, especialmente modificados, los que ayudarn a transferir genes de gran tamao en las plantas. Desafortunadamente, las monocotiledneas (incluidos los cultivos de cereales importantes) son resistentes a la Agrobacterium. La Agrobacterium ha demostrado ser especialmente til cuando se trabaja con rboles (Figura 6).
29

8.1.1. Transformacin por Agrobacterium

30

8.1.2. Transformacin por Balstica

Un procedimiento denominado bombardeo balstico ha logrado xito con diversos cultivos, incluidos el arroz, trigo y soya. En este mtodo, el ADN que ser introducido en las clulas de la planta, primero es fijado a unas diminutas partculas de tungsteno u oro. Las partculas cubiertas de ADN son disparadas a gran velocidad en el tejido blando de la planta, generalmente en el callo (ver cultivo celular ms adelante). Esto introduce el ADN funcional en las clulas de la planta.

31

8.1.3. Electroporacin
Electroporacin. El ADN tambin puede ser introducido en los tubos de
paredes delgadas que se desarrollan a partir de los granos de polen al someterlos a pulsos de microsegundos de un fuerte campo elctrico. Esta tcnica, llamada electroporacin, produce la dilatacin momentnea de los poros en los tubos de polen a travs de los cuales el ADN de la solucin que rodea a los tubos puede entrar en ellos. Las semillas que se desarrollan a partir de vulos fertilizados con ese polen transportan los genes introducidos. La electroporacin tambin funciona en clulas de plantas en que la pared celular ha sido removida por un tratamiento con enzimas. A partir de estas clulas desnudas de la planta, se puede regenerar toda una planta por medio del cultivo celular (ver ms adelante). La electroporacin tambin ha sido utilizada para transferir molculas de ADN en un amplio espectro de microorganismos.

32

9. Marcadores Moleculares
Genes marcadores y sondas genticas. Cualquiera sea el mtodo utilizado, en el mejor de los casos, slo una pequea proporcin de las clulas tratadas absorber el ADN introducido. Por lo tanto, es necesario examinar las clulas para descubrir cules lo han hecho. Como se dijo anteriormente, los plasmidios, a menudo, transportan genes que ayudan a los microbios que los poseen a descomponer determinados antibiticos. Estos genes pueden ser utilizados como marcadores para identificar a aquellas clulas qu han absorbido plasmidios, para lo cual las clulas son colocadas en un medio de crecimiento que contiene un antibitico apropiado; slo las clulas con plasmidios sobrevivirn. En el reino vegetal, existen muchos tipos diferentes de genes marcadores y stos han sido desarrollados como alternativa a los marcadores antibiticos. Otros mtodos para identificar genes transferidos incluyen la PCR. Este mtodo permite la amplificacin de las secuencias de ADN transplantado, que luego pueden ser detectadas utilizando sondas genticas, que son pequeos fragmentos de una hebra de ADN o ARN que se une a secuencias complementarias en el ADN que est siendo seleccionado (Figura 7).
33

Marcadores Moleculares
Las sondas tambin se pueden utilizar para detectar el ADN de microorganismos que podran contaminar los alimentos. Las sondas son tan sensibles y especficas que es posible utilizarlas para diferenciar cepas de una misma especie y determinar si microorganismos en particular son capaces de producir toxinas.

34

Marcadores Moleculares
Interruptores genticos.
Para asegurar que la maquinaria bioqumica de las clulas receptoras permitir expresarse a los genes introducidos, se requieren secuencias de ADN, llamadas regiones de control. Una regin de control bien estudiada conecta y desconecta un gen para producir - galactosidasa. Esta enzima permite a las bacterias metabolizar la lactosa, pero slo se produce cuando ese azcar est presente en el medio circundante. El interruptor gentico asociado con el gen que codifica a la -galactosidasa puede ser ubicado frente a otros genes para que la adicin de lactosa al caldo de cultivo, en donde las clulas modificadas estn creciendo, gatille la expresin de los genes nuevos. Existen muchos interruptores genticos, algunos de los cuales, incluso, pueden ser regulados con un simple cambio de temperatura.

35

10. Otros mtodos biotecnolgicos

Cultivo celular Muchos tipos de clulas vegetales de una variedad de especies pueden cultivarse in vitro al suministrarles nutrientes y substancias para el crecimiento bajo estrictas condiciones aspticas (Figura 8). Para esto tambin se puede requerir de iluminacin. Los cultivos de clulas individuales, desarrolladas en un fermentador, pueden ser utilizados, en vez del cultivo de toda la planta para producir productos de alto valor, como colorantes naturales (por ejemplo, la betanina, que corresponde al color rojo de las betarragas) y saborizantes naturales (por ejemplo, aceite de vainilla y menta) para los alimentos.

36

Otros mtodos biotecnolgicos

Para algunas especies, las plantitas que surgen de clulas clonadas pueden ser plantadas directamente en los campos. A pesar de que es costoso, este mtodo es muy adecuado para cultivos como las bananas, que no poseen semillas. Con mayor frecuencia, se utiliza el cultivo celular de plantas para generar variedades de gran valor, uniformes y libres de virus (como las especies ornamentales) o plantas de las cuales se obtienen semillas posteriormente. Por ejemplo, las semillas de coliflor se obtienen de esta forma. El cultivo celular tambin se puede utilizar para producir semillas artificiales embriones cultivados de plantas que posteriormente son cubiertos con una capa protectora de un gel duro. Actualmente, el costo de produccin de estas semillas artificiales restringe su uso para cultivos muy preciados. Sin embargo, el proceso es altamente productivo; en una estimacin al respecto se sugiere que con 10 litros de fermentador se podran producir suficientes embriones para satisfacer la demanda anual de semillas de zanahoria de los agricultores franceses. Las paredes de las clulas vegetales estn compuestas en gran parte de celulosa. Para remover estas paredes se puede utilizar una preparacin con la enzima celulasa, dejando a los protoplastos esfricos unidos por una membrana delgada.
37

Otros mtodos biotecnolgicos

Fusin celular
Los protoplastos de las clulas vegetales de diferentes especies pueden ser fusionados para crear hbridos complejos con dos o ms ncleos. Incluso, se pueden unir protoplastos derivados de gneros distintos, sin importar si estas plantas son incapaces de cruzarse. En teora, al fusionar los protoplastos se pueden regenerar plantas hbridas con caractersticas de ambas clulas donantes. Esto podra proporcionar una va simple para introducir en los cereales, por ejemplo, la capacidad que tienen las legumbres para fijar el nitrgeno atmosfrico. Sin embargo, el entusiasmo por el uso de esta tcnica ha disminuido desde los primeros experimentos exitosos realizados durante los aos setenta. Se ha demostrado que es difcil o imposible desarrollar en cultivo protoplastos de varias especies, fusionados o no, y menos an, regenerarse para convertirse en plantas completas. La fusin celular de un tipo diferente, utilizando clulas animales ha sido ms valiosa. Los anticuerpos pueden ser producidos por hibridomas desarrollados in vitro. Un hibridoma es una clula productora de anticuerpos (que normalmente es difcil de desarrollar en cultivo por separado) fusionada con una clula tumoral (que es prcticamente inmortal en cultivo).
38

Otros mtodos biotecnolgicos

Se pueden producir grandes cantidades de anticuerpos especficos (denominados anticuerpos monoclonales, debido a que son todos idnticos) al poner a los hibridomas en cultivo en un fermentador. Estos anticuerpos pueden ser utilizados en exmenes de diagnstico de gran sensibilidad. Por ejemplo, las aflatoxinas son compuestos potencialmente letales que son producidos por hongos que contaminan los alimentos almacenados. En la actualidad, se utilizan de manera rutinaria los anticuerpos producidos para detectar las aflatoxinas, ya que son baratos y fciles de usar. Tambin se utiliza la misma tecnologa de anticuerpos para detectar hormonas asociadas con la ovulacin y el embarazo. Dicho conocimiento trajo ventajas importantes a los programas de crianza de animales.
39

11. Aplicaciones de la Ingeniera Gentica

Resistencia a insectos Las plantas transformada han sido modificadas para expresar un gen derivado de la bacteria Bacillus turingiensis que produce una protena insecticida altamente especfica (toxina Bt) que es txica a un rango reducido de insectos de importancia agronmica. El cristal insecticida esta compuesto de una protena grande que es inactiva. Al ingerir el insecto esta protena, las condiciones alcalinas del esfago y la presencia de proteasas causa la ruptura del polipptido no txico liberando la toxina activa. La protena insecticida activada se une a un receptor especfico en el esfago en la membrana de las clulas insertndose en ellas. Al agruparse y formar complejos, estos forman un poro o canal a travs de la membrana ocasionando goteo del contenido celular, causando la muerte de las clulas. Los insectos debido al dao causado dejan de alimentarse y mueren en aproximadamente 24 horas de hambre o de infecciones bacterianas secundarias (Llewellyn et al., 1992). Los genes que codifican para estas protenas txicas se les denomina genes cry, de los cuales el gen cry I codifica para una protena txica nicamente a larvas de lepidpteros; el cry II codifica para protenas txicas para larvas de lepidpteros y dpteros; el cry III produce protenas especficas para larvas de colepteros; mientras que el cry IV es txico nicamente a dpteros. 40

Aplicaciones de la Ingeniera Gentica

Estos grupos de protenas han sido divididos ejemplo: cry IA, cry IB, cry IC, etc. La protena insecticida mas utilizada es la codificada por la clase cry IA. Entre los cultivos transformados con el gene cry se pueden citarlos siguientes: papa Newleaf (resistente a la larva del escarabajo de la papa), algodn Bollgard (resistente al gusano rosado y al bellotero del tabaco), maz Knockout (resistente al barrenador europeo del maz) y el maz NatureGard (resistente al barrenador europeo del maz).
Resistencia a Herbicidas La resistencia a herbicidas se puede manipular a travs de los siguientes mecanismos: a) Sobre-expresin de la protena blanco, lo cual garantiza que la planta tolere ciertas concentraciones de herbicidas. Resistencia a glifosato se ha obtenido mediante la sobreexpresin de la enzima EPSPS (5enolpiruvilsikimato-3-fosfato sintasa) que cataliza una reaccin en la ruta del cido shikmico, inhibiendo la sntesis del los aminocidos aromticos triptfano, fenilalanina y tirosina. En plantas resistentes se ha logrado una actividad enzimtica 20-40 veces superior, tolerando dosis dos veces superiores a la dosis requerida para eliminar malas hierbas (Horsch et al., 1987).
41

Aplicaciones de la Ingeniera Gentica

Cultivos transgnicos resistentes a glifosato incluyen soya, algodn y canola conocidos como Round-up. b) Genes bacterianos de detoxificacin de herbicida. El herbicida bialafos inhibe la actividad de la enzima glutamina sintetasa (GS), provocando acumulacin de amonio el cual es txico. La enzima GS cataliza la conversin de glutamato a glutamina en la va de asimilacin de nitrgeno. El gen bar que detoxifica el herbicida en plantas se obtuvo de la bacteria Streptomyces hygroscopicus. Este gen se ha manipulado para su expresin en plantas y tiene la capacidad de inactivar el herbicida por lo cual confiere tolerancia a fosfinotricina (PPT), ingrediente activo de herbicidas como el Basta y el Bialafos. c) Modificacin del sitio de unin del herbicida. A travs de la manipulacin de genes que codifican para protenas modificadas se ha logrado resistencia a herbicidas. Entre estos genes se pueden citar los siguientes: el gen sulI obtenido de Escherichia coli codifica para resistencia a sulfonamidas, el gen aroA tambin de Escherichia coli codifica para resistencia a glifosato, el gen psbA obtenido de una especie del gnero Amaranthus que codifica para resistencia a atrazina y el gen csr1-1 de Arabidopsis thaliana codifica para resistencia a sulfonilureas.
42

Aplicaciones de la Ingeniera Gentica

Para lograr la expresin de estos genes se requiere ubicarlos en el genoma del cloroplasto. Resistencia a herbicidas del tipo sulfonilurea (Glean) cuyo mecanismo de accin consiste bsicamente en la inhibicin de la enzima acetolactato sintasa (ALS), tambin conocida como acetohidroxicido sintasa (AHAS) que interviene en la sntesis de valina, leucina e isoleucina, se ha obtenido de genes mutantes obtenidos de Arabidopsis thaliana y de Brassica napus (Swason et al., 1988). El gen obtenido de Arabidopsis muestra una sustitucin de un par de bases (serina por prolina) la cual es responsable de la resistencia. Otros Caracteres de Inters Agronmico La ingeniera gentica ha proporcionado estrategias importantes para la manipulacin de caracteres de inters agronmico. Entre ellos se puede citar la resistencia a virus, la cual se ha logrado a travs de la insercin y expresin de genes virales dentro del genoma de la planta.
43

Aplicaciones de la Ingeniera Gentica

Se ha logrado tambin manipular la resistencia a hongos patgenos a travs de interacciones planta-patgeno con la insercin de genes que se activan en respuesta al ataque fngico. La mejora de la calidad de productos vegetales se ha logrado a travs de la manipulacin con la finalidad de mejorar la composicin de aminocidos, de protenas de reserva, de carbohidratos y de aceites. Herencia del ADN Insertado El transgen generalmente se integra en el genoma nuclear de la planta y su herencia es de tipo Mendeliano. Problemas que se han Detectado Despus de la Transformacin.

1. Prdida de la expresin del gen. 2. Prdida del ADN durante la regeneracin de la planta. 3. Efectos de posicin, efecto del ADN que rodea al gen o el efecto.
44

12. Cmo mejorar la calidad de los alimentos

La pectinasa clave. Muchos genes participan en el desarrollo del color, sabor y textura de la fruta. Despus de varios aos, se identific la clave para cambiar la textura durante la maduracin del tomate, la responsable es una enzima denominada poligalacturonasa (PG). A medida que los tomates maduran, la PG degrada la pectina que mantiene unidas las paredes celulares, lo que hace que la fruta se ablande. Un grupo de cientficos industriales, que trabajaban con el grupo de Nottingham, descubrieron una forma de inhibir al gen PG sin interferir con los otros aspectos del mecanismo natural de maduracin del tomate, lo que signific que el proceso de ablandamiento podra retrasarse mientras los tomates continuaban desarrollando las caractersticas deseables de color y sabor. Actividad antisentido. El gen PG fue neutralizado al introducir un gen antisentido en la planta de tomate (ver Figura 9). A pesar de que en los primeros experimentos alrededor del 10% de los genes PG se mantuvieron activos suficiente para degradar la pectina y producir un fruto blando- el gen antisentido fue heredado en forma estable, de modo que la polinizacin cruzada entre plantas con los niveles ms bajos de actividad PG produjo una descendencia que tena slo un 1% de la actividad enzimtica normal.
45

Cmo mejorar la calidad de los alimentos

Investigadores de los Estados Unidos hicieron un uso similar de un gen PG antisentido. Su tomate modificado se denomina Flavr Savr y ha obtenido la aprobacin para su comercializacin entre los consumidores de Estados Unidos. Al permanecer pendiente la aprobacin del registro, los comerciantes europeos tendrn que esperar un poco ms para tener una alternativa casera de tomates sin sabor y aguados. Otras frutas de maduracin lenta. Las frutas producen gas etileno como parte del proceso de maduracin natural. Se puede utilizar una atmsfera de etileno para hacer madurar frutas artificialmente. La tecnologa antisentido ha sido utilizada para inhibir la produccin de etileno y con ello impedir la maduracin. Entre los cultivos que se han beneficiado con este tipo de modificacin, se encuentran el brcoli, las frambuesas, los tomates y el euromeln, resultado de un proyecto conjunto entre cientficos franceses, espaoles, britnicos y griegos. Todas estas frutas pueden ser cosechadas cuando no han madurado y permanecern en esa condicin hasta que sean expuestas a una atmsfera que contenga etileno.
46

Cmo mejorar la calidad de los alimentos

47

13. Otras mejoras a la calidad de los alimentos

Los seres humanos sintetizan slo la mitad de los 20 diferentes aminocidos que se necesitan para fabricar las protenas. Por lo tanto, una dieta sana debe contener cantidades adecuadas de los restantes 10 aminocidos. El riesgo de malnutricin se aumenta cuando se depende de un solo tipo bsico de alimento. Las protenas en algunos cultivos (por ejemplo, muchas de las legumbres que se cultivan en frica y Amrica del Sur) slo contienen pequeas cantidades de ciertos aminocidos esenciales. Estas deficiencias pueden ser superadas al insertar en los cultivos afectados, genes de otros organismos que tengan cantidades apreciables de estos aminocidos. En Israel, ya se han desarrollado papas modificadas genticamente con un contenido de aminocidos mejorado. Este trabajo podra resultar altamente beneficioso, ya que las papas son el cuarto cultivo ms importante en el mundo, adems de una importante fuente de nutricin en algunos pases. La produccin de papas tambin podra aumentar, a travs del mtodo practicado por investigadores australianos que aislaron un gen que duplica la produccin de tubrculos de papa en las plantas en las que ha sido insertado. Otros criadores de plantas han introducido un gen bacteriano en las plantas de papas que aumenta la proporcin de almidn en los tubrculos y a la vez reduce el contenido de agua. Esto significa que las papas absorben menos grasas cuando se fren.
48

Otras mejoras a la calidad de los alimentos

Aceites alterados. Numerosas compaas y grupos de investigadores han utilizado una combinacin de crianza convencional de plantas, modificacin gentica y fusin de protoplastos para alterar las propiedades del aceite de colza de semillas oleaginosas. El resultado va desde plantas que producen una mayor proporcin de grasas saturadas (adecuadas para la produccin de margarinas) hasta otras que producen aceites para fritura a altas temperaturas que contienen una proporcin baja de grasas saturadas. Frutas ms dulces sin azcar adicional. Se han producido cultivos ms dulces (por ejemplo, lechugas y tomates) al transplantarles genes de los edulcorantes proticos naturales, la monelina y la taumatina. Los genes de ambas protenas provenan originalmente de plantas tropicales. La taumatina es 3.000 veces ms dulce que el azcar.

49

Otras mejoras a la calidad de los alimentos

Futuros desarrollos La enzima comnmente nombrada como pectinasa no es una substancia nica, sino un cctel complejo de enzimas capaces de atacar una variedad de enlaces en las molculas de pectina correspondientes. Las enzimas pectolticas utilizadas en la actualidad han sido preparaciones crudas; sin embargo, un mayor conocimiento de las substancias sobre las que acta, ha estimulado la demanda de preparaciones de enzimas puras con actividades especficas, bien definidas. A pesar de que las mejoras en los procesos de purificacin de enzimas son importantes, el punto central se ha cambiado a la tecnologa de los genes para proporcionar, por ejemplo, pectinasas con una mejor estabilidad en la temperatura y un pH ptimo ms bajo. La disponibilidad de una variedad de enzimas especficas provenientes de organismos aptos para el consumo humano, modificados genticamente, tambin llevar a nuevas aplicaciones de dichas enzimas. Por ejemplo, una pectato liasa de la bacteria que provoca la descomposicin blanda en las zanahorias y papas (Erwinia carotovora) ha sido recientemente clonada en la Escherichia coli. Esta enzima podra ser utilizada en la extraccin de hojas de t en la fabricacin de t instantneo.
50

Otras mejoras a la calidad de los alimentos

Produccin de edulcorantes
Azcares provenientes del almidn Durante las guerras napolenicas, Europa estuvo aislada de sus principales fuentes de caa de azcar de los trpicos. En 1811, qumicos germanos tuvieron xito al producir azcar por medio de la descomposicin del almidn con cido; este proceso fue adoptado en varios pases hasta la introduccin de la remolacha en las granjas europeas. En la Segunda Guerra Mundial, se desarroll un mtodo enzimtico ms refinado de conversin del almidn en azcares, que tena la ventaja de producir azcar que careca de los compuestos amargos, caractersticos del tratamiento con cido. En la actualidad, los mtodos enzimticos son una va importante para producir edulcorantes, incluidos los jarabes derivados de la sacarosa o almidn, que contienen mezclas de glucosa, maltosa, fructosa y otros azcares. En este momento, los jarabes de alta fructosa (HFS: high fructose syrup) provenientes del almidn de maz estn eclipsando a la sacarosa, como el edulcorante ms importante utilizado en la industria alimentaria.
51

Otras mejoras a la calidad de los alimentos Jarabe de alta fructosa

El jarabe de alta fructosa es hecho de almidn, una materia prima de bajo costo. El almidn es convertido en jarabe por medio de varias enzimas que son utilizadas en tres etapas distintas: Licuefaccin. El almidn se obtiene como un subproducto despus de que se han extrado del maz, aceite y protena de gran valor. La solucin de almidn se hierve y es tratada con -amilasa, enzima del Bacillus. Este tratamiento gelatiniza y disuelve el almidn y comienza a descomponerlo. Las molculas de almidn parcialmente degradadas son conocidas como dextrinas. Sacarificacin. Dependiendo de la composicin de carbohidratos necesaria en el producto final, luego, se agrega un cctel de varias enzimas de hongos a las dextrinas. Para los jarabes con un alto contenido de glucosa, se utiliza una mezcla de amilasa o pululanas con amiloglucosidasa. Estas enzimas demoran entre 1 y 3 das en descomponer progresivamente las dextrinas en glucosa. La evaporacin del agua produce un jarabe de glucosa viscoso. Isomerizacin. La glucosa comparte con la fructosa su composicin qumica; sin embargo, la primera tiene una estructura molecular diferente. Esto hace que la glucosa sea la mitad de dulce que la fructosa. La enzima glucosa isomerasa convierte la glucosa en fructosa, con lo que aumenta el dulzor del 52 jarabe.

14. Posible Impacto en la Agricultura

Existen en la actualidad un gran nmero de cultivos modificados genticamente con diferentes caractersticas, los cuales estn siendo sembrados masivamente en los Estados Unidos. La lista es innumerable, pero resaltan los cultivos resistentes a insectos y los cultivos tolerantes a ciertos herbicidas. Por la reduccin en costos de produccin y por la oportunidad que ofrecen para desarrollar una Agricultura mas sustentable, al reducir dramticamente el nmero de aplicaciones de insecticidas para el control de las plagas, los cultivos resistentes a insectos son los que podran tener un mayor impacto en la Agricultura de Honduras y otros pases de condiciones econmicas y sociales similares a las de nuestro pas. La idea de utilizar productos derivados de la bacteria Bacillus thuringiensis para el control de insectos no es nueva. Desde 1961, se han utilizado diferentes formulaciones a base de Bt , sin embargo, a travs del tiempo los cientficos observaron que los productos preparados a base de Bt aplicados al follaje presentaban algunas desventajas: a) es caro producirlos y aplicarlos, b) se necesita hacer varias aplicaciones para lograr un control eficiente, c) la actividad insecticida de la Endotoxina se puede perder si se expone por mucho tiempo a los rayos del sol, y d) puede ser lavado por las lluvias. Estas desventajas han sido resueltas en su gran mayora introduciendo genes que codifiquen las Endotoxinas Bt con propiedades insecticidas directamente en las plantas. Los genes introducidos han sido modificados de tal manera que expresan la cantidad de Endotoxina necesaria para matar algunas especies de insectos lepidopteros. 53

15. Efectos sociales y econmicos

La biotecnologa podra brindar considerables beneficios al mundo de la agricultura; sin embargo, podra haber desventajas que la acompaasen. El poco espacio con el que contamos slo nos permite una indicacin de algunos de los principales problemas. Muchas de las consecuencias de la biotecnologa moderna podran ser similares a aquellas producidas por las tendencias existentes, como cambio a granjas ms grandes y sistemas de agricultura con uso intensivo de capital. Esto tiende a favorecer a los agricultores ricos, quienes invierten en nuevas tecnologas, en vez de a los empobrecidos agricultores del resto del mundo. La biotecnologa puede reducir la dependencia de los pases desarrollados de los productos importados desde los pases en vas de desarrollo, con efectos adversos para los pases productores. Es improbable que las preocupaciones existentes en occidente acerca de la sobre produccin sean compartidas por pases cuyo crecimiento de poblacin sobrepasa con creces la capacidad de los agricultores de proveer suficiente alimento. Sin embargo, si la tecnologa trae una mayor productividad agrcola a naciones en desarrollo, podra haber grandes cambios en los patrones de empleo, lo que tendra efectos positivos en la estabilidad de los pases.

54

16. Conclusiones y Recomendaciones

El mejoramiento gentico de las plantas ha logrado incrementar la produccin agrcola y mejorar caracteres importantes a travs de tcnicas tradicionales. Sin embargo, estas tcnicas requieren de tiempo para seleccionar y establecer una caracterstica deseada en un material gentico de inters. La Biotecnologa emerge como una herramienta adicional para ayudar a solventar ciertos problemas agrcolas de una manera ms directa y eficiente. Sin embargo, la Biotecnologa y otras innovaciones tecnolgicas debe ser integrada con las prcticas agronmicas actuales para poder incrementar la productividad y evitar al mximo la liberacin de productos txicos al medio ambiente. Mediante la utilizacin de todas las herramientas agrcolas disponibles se lograr desarrollar una Agricultura ms sustentable y ms amigable con el medio ambiente.
55

Conclusiones y Recomendaciones
Los beneficios de las plantas modificadas genticamente empiezan a ser una realidad. Sin embargo, es necesario hacer un anlisis muy profundo que demuestre que los beneficios de un producto son mayores que el impacto negativo que pudieran ocasionar en un ecosistema determinado. Sin embargo, esto no indica que debemos de cerrar las puertas a la utilizacin de tecnologas ms avanzadas a la par de otros pases, siempre y cuando sea de una manera ordenada y racional. Sera un error no aprovechar los beneficios de los productos derivados de la Biotecnologa, quizs el descubrimiento ms grande del siglo XX. Es importante sealar que la ingeniera gentica hace uso de algunos genes que no son de origen vegetal y que generalmente provienen de microorganismos procariotes y eucariotes, lo cual hace necesario que se incluyan para su correcta expresin secuencias reguladoras.
56

Conclusiones y Recomendaciones
La ingeniera gentica no reemplaza al mejoramiento gentico tradicional, sino que proporciona una herramienta bsica que facilita la transferencia de genes de inters agronmico. La manipulacin e insercin de genes forneos en el genoma de una planta permite generar combinaciones genticas nuevas, con la finalidad de mejorar un carcter ya presente en la planta o introducir un carcter deseable para desarrollar un genotipo deseado. Actualmente a travs de la ingeniera gentica adems de manipular caracteres de inters agronmico, se esta trabajando en la mejora de la calidad de productos vegetales, contribuyendo a lograr en un futuro a una mejor nutricin.

57

58

17. Bibliografa
Barton, K.A. A.N. Binns., A.J.M. Matzke and M.D. Chilton. 1983. Regeneration of intact tobacco plants containing full length copies of genetically engineered T-ADN and transmission of T-AND to R1 progeny. Cell 32:1033-1043. Budziszewski, G.J., K.P.C. Croft and D.F. Hildebrand. 1996. Uses of biotechnology in modifying plant lipids. Lipids 31:557-569. Cayne, H. 1999. The transgenic technique. Australian Biotechnology Association. Available at http://www.zoo.toronto.edu/zooweb/s199s04/transg.html (verified April 6, 1999). Chalfie, M., Y.Tu, G. Euskirchen, W.W. Ward and D.C. Prasher. 1994. Green fluorescent protein as a marker for gene expression. Science 263:802-805. Day, P.R. 1996. Genetic modification of proteins in food. Critical Reviews in Food Science and Nutrition: S49-67. Estruch, J.J., N.B. Carozzi, N. Desai, N.B. Duck, G.W. Warren and M.G. Koziel. 1997. Transgenic plants: an emerging approach to pest control. Nature Biotechnology 15:137141.
59

Bibliografa
Heiser, W. 1994. Optimization of biolistic transformation using the helium-driven PDS1000/He system (on line). Available at http://www.bio-rad.com/45811.html.

Horsch, R., R. Fraley, S. Rogers, J. Fry, H. Klee, D. Shah, S. McCormick, J. Niedermeyer y N. Hoffmann. 1987. Agrobacterium-mediated transformation of plants. Plant tissue and cell culture. 317-329.
James C. and A.F. Krattiger. 1996. Global review of the field testing and commercialization of transgenic plants, 1986-1995: the first decade of crop biotechnology. ISAAA Briefs No. 1. ISAAA: Ithaca, NY. James, C. 1997. Global status of transgenic crops in 1997. ISAAA Briefs No. 5. ISAAA: Ithaca, NY. pp. 31. Jenkins, G.H. 1991. Photocontrol of plant gene expression. In: Control of gene expression during plant development. Ed. D. Grierson. Blackie, Glasgow, Scotland.

60

Bibliografa
Karcher, S.J. 1994. Getting DNA into a cell: A survey of transformation methods. The american biology teacher. 56(1):14-20. Llewellyn, D.J., M. Brown, Y. Cousins, L. Hartweck, D. Last, F. Murray, and J. Thisleton. 1992.The science behind transgenic cotton plants. Proccedings of the 6th Australian cotton conference broadbeach Qld. Agosto 1992. Available at http://www.mv.pi.csiro.au/OzCotRt/ Publicat/Pest/transgen.htm#anchor244727 (posted 10 Sept. 1997). Mason, H.S. and C.J. Arntzen. 1995. Transgenic plants as vaccine production systems. Trends in Biotechnology 13: 388-392. Metcalfe, D.D., J.D. Astwood, R. Townsend, H.A. Sampson, S.L. Taylor and R.L. Fuchs. 1996. Assessment of the allergenic potential of foods derived from genetically engineered crop plants. Critical Reviews in Food Science and Nutrition: S165-186. Murphy, D.J. 1996. Engineering oil production in rapeseed and other oil crops. Trends in Biotechnology 14:206-213.

61

Bibliografa
Sandford,J.C., T.M. Klein, E.D. Wolf, and N. Allen. 1987. Delivery of substances into cells and tissues using a particle bombardment process. Part. Sci. Technol. 5. p. 27-37.
Shah, D.M., C.M.T. Rommens and R.N. Beachy. 1995. Resistance to diseases and insects in transgenic plants: progress and applications to agriculture. Trends in Biotechnology 13:362-368. Voet, D. and J.D. Voet. 1990. Biochemistry. John Wiley & Sons, New York.

62