UNIME SALVADOR CURSO DE FARMCIA FARMACOGNOSIA III

OBTENO DE MOLCULAS COM ATIVIDADE FARMACOLGICA A PARTIR DE MATERIAL VEGETAL E SUA TRANSFORMAO EM MEDICAMENTO

Salvador, BA 2011

Elisama Andrade, Joelma Aquino, Pedro Henrique, Tamires Ribeiro.

INTRODUO
A humanidade sempre recorreu as plantas para o tratamento de doenas; Sec. XVIII - isolamento dos constituintes; Dificuldade para descobrir novos constituintes de interesse

farmacolgico devido ao enorme investimento;

Os estudos nem sempre so orientados para a obteno de um novo medicamento.

ESCOLHA E IDENTIFICAO BOTNICA DA PLANTA A ESTUDAR

Baseia-se: Informaes populares e bibliogrficas sobre o seu uso; Confirmao taxonmica Depsito da planta em herbrio; Antes de iniciar outros estudos, realizar pesquisas

bibliogrficas sobre os aspectos qumicos e farmacolgicos

(quando for o caso).

PROSPECO QUMICA PRELIMINAR

Importncia
Multiplicidade de constituintes qumicos Metabolismo secundrio

Molculas com atividade farmacolgica

OBTENO DE EXTRATOS
gua acidulada com 2% de cido actico; Soluo de etanol 70%.

OMS

ter etlico 1 Planta em p 2

lcool ou metanol 70/80%

gua

3
Planta em p Planta em p

Prof. Ioan Ciulei (1984)

COMPOSIO DOS EXTRATOS

Extrato etreo: compostos lipossolveis
leos essenciais; Matrias gordas; cidos gordos;

Esteris;
Triterpenos; Caratenides; Alcalides (forma bsica);

Geninas de compostos antraquinnicos;

Geninas de flavonides; Cumarinas; Pigmentos cloroflicos.

COMPOSIO DOS EXTRATOS

Extrato hidroalcolico: compostos de polaridade mdia:
Polifenis; Glcidos redutores; Alcalides (forma de sais); Heterosdeos polifenlicos

Antraquinnicos

Cumarinas
Flavonides Antocianosdeos Leucocianinas

COMPOSIO DOS EXTRATOS

Extrato aquoso: Substncias hidrossolveis
Holsidos;

Mucilagens; Gomas e pectinas; Heterosdeos; Sais de alcalides.

ESQUEMAS DE PROSPECO MAIS RECENTES

Testes cromatogrficos acompanhados de testes farmacolgicos.

EXTRAO ORIENTADA: ALCALIDES

Material vegetal em p:
Agitar por 3x com metanol/gua (4:1), filtrar

Resduo:
Extrair 3x com acetato de etilo, filtrar.

Filtrado:
Concentrar a 1/10, acidificar com H2SO4 2M, extrair 3x com tricloreto de metileno.

Resduo:
Poli-holosdeos

Filtrado:
Lipdeos

Fase orgnica:
Terpenides e compostos fenlicos.

Fase aquosa:
Juntar sol. De NaOH At pH 10.Extrair com clorofrmio/metanol 3:1, 2x e 1x com clorofrmio 1x.

Fase clorofrmio/metanol:
Alcalides

Fase aquosa:
Alcalides quaternrios

Esquema de fracionamento, para plantas contendo alcalides, segundo Harbone (1984).

Testes usados na caracterizao de grupos qumicos

Alcalides: as reaes gerais baseiam-se na formao de

complexos insolveis. Estas reaes empregam reagentes de

Dragendorff, Mayer ...; Compostos antraquinnicos sob forma livre: Usa-se

reao de Bortraeger. Aps oxidar formas reduzidas por

reao de H2O2; Cumarinas:A caracterizao pode ser feita sob luz

ultravioleta ( pois possui fluorescncia azul brilhante ou

verde). Em soluo alcalina desenvolvem colorao amarela.

Testes usados na caracterizao de grupos qumicos

Esteris e Triterpenos: reao de LiebermannBurchard. Os esteris desenvolvem colorao

mutvel, enquanto os triterpenos estveis;

Flavonides: o teste mais usado o de Shinoda, atravs deste caracterizam-se compostos -

benzopirona que origina a colorao laranja a vermelha;

Testes usados na caracterizao de grupos qumicos

Saponinas: emprega-se o testa da formao de espuma persistente aps agitao, de preferncia em meio cido; Taninos: as reaes tpicas, precipitao com gelatina, metais pesados,etc. Para diferenciar os hidrolisveis dos condensados emprega-se a

reao de Stiasny, que precipita os condensados

ISOLAMENTO DE COMPOSTOS COM ATIVIDADE FARMACOLGICA

Extratos

Testes farmacolgicos

Teste de toxicidade

ISOLAMENTO DE COMPOSTOS COM ATIVIDADE FARMACOLGICA

Bioensaios

Enzimas e sistemas enzimticos;

Atividade anti-inflamatria;
Atividade antifngica e antibacteriana
Bioautografia

ISOLAMENTO DE COMPOSTOS COM ATIVIDADE FARMACOLGICA

Tcnicas cromatogrficas

ISOLAMENTO DE COMPOSTOS COM ATIVIDADE FARMACOLGICA

Isolamento de molculas hidrossolveis

Cromatografia de Excluso em Gel

Variao no tamanho das molculas; Matrizes diversas:

Poliestirenodivinilbenzeno Copolmeros de hidroxietilmetilacrilato/dimetilacrilato.

ISOLAMENTO DE COMPOSTOS COM ATIVIDADE FARMACOLGICA

Importncia de tcnicas clssicas

Cristalizao; Sublimao; Destilao fracionada.

DETERMINAO DA ESTRUTURA DO COMPOSTO ISOLADO

Atividade farmacolgica
Determinao de estrutura; Novo composto.

DETERMINAO DA ESTRUTURA DO COMPOSTO ISOLADO

Elucidao estrutural Isolamento de constituintes; Elementos nas molculas orgnicas;

Peso molecular.

DETERMINAO DA ESTRUTURA DO COMPOSTO ISOLADO

Tcnicas para isolamento Espectro de absoro no UV
Grupos funcionais no esqueleto da molcula.

Espectro no infravermelho
Existncia de insaturaes, de sistemas aromticos e grupos funcionais especficos

Espectro de massa
Massa molecular

DETERMINAO DA ESTRUTURA DO COMPOSTO ISOLADO

Tcnicas para isolamento
Espectrometria de ressonncia magntica nuclear de prton e carbono-13
Determinao do esqueleto da molcula

Espectro de Raman
Vibraes moleculares verificadas na molcula

Cristalografia por raio X

Estereoquimicas de molculas

DETERMINAO DA ESTRUTURA DO COMPOSTO ISOLADO

Se a estrutura do composto isolado for conhecido, possvel encontrar informaes em bibliografia especializada. Se o composto for isolado pela primeira vez, a sua estrutura dever ser confirmadas com obteno dessa molcula por sntese qumica.

OBTENO DE MEDICAMENTOS A PARTIR DA MOLCULA ISOLADA

Preparao
Fase farmacutica

das

formas

farmacuticas levando em conta

o efeito farmacolgico;

Visa a obteno de dados a

Fase de ensaios biolgicos pr-clnicos

estudos

farmacodinmicos,

toxicolgicos e farmacocinticos pr-clnicos.

FASE DE ENSAIOS BIOLGICOS PRCLNICOS

Estudos farmacodinmicos pr-clnicos Executados in vivo, sobre rgos ou tecidos isolados. Estabelece a relao Dose-Efeito.

Estudos toxicolgicos pr-clnicos

Revela a confiana que deve ser dada ao medicamento ao ser administrado aos seres humanos. Toxicidade aguda e crnica*

Estudos farmacocinticos pr-clnicos

Avalia o modo de absoro,distribuio metabolizao... Estabelecendo assim a segurana ao homem.

OBTENO DE MEDICAMENTOS A PARTIR DA MOLCULA ISOLADA

Corresponde ao conjunto de ensaios na espcie humana que comprovaro
Fase clnica

o ndice teraputicos dos medicamentos (obteno

de dados para eficcia e

segurana).

FASE CLNICA
Fase I Ensaios executados em Hospitais, com a colaborao de equipes.

Fase II

Ensaios sobre um reduzido n de doentes, em tratamentos curtos para observar a eficcia e a toxicidade. Esta usa um maior n de doentes e tratamentos mais prolongados, estabelecendo a menor dose eficaz. Estudo feito com maior n de doentes, para comprovao das indicaes teraputicas e das doses definitivas.

Fase III

Fase VI

REFERNCIAS
Simes, Cludia. et al. Farmacognosia: da planta ao medicamento. Porto Alegre,UFRG. 6 ed. 2010. Cunha, A. Proena. Farmacognosia e Fitoqumica.

Portugal, Fundao Colouste Gulbenkian. 2006.