NOMBRE: FATIMA DEL CARMEN MARTINEZ NAVARRO JOS ANTONIO VZQUEZ MORALES.

KARINA ELIZABETH MIJANGOS ALFARO ALEJANDRO URAI MENDEZ MORALES GILBERT ALEJANDRO NAEZ GALLEGOS

SEMESTRE: CUARTO

GRUPO: B

PROFESOR (A): IBQ. DIANA ERIKA VAZQUEZ MOLINA

TUXTLA GUTIRREZ, CHIAPAS A 29 DE MARZO DE 2011.

PSEUDOMONA AERUGINOSA (CASO CLINICO)

Clasificacin cientfica Reino: Bacteria Filo: Proteobacteria Clase: Gammaproteobacteria Orden: Pseudomonadales Familia: Pseudomonadaceae Gnero: Pseudomonas

Se solicita que determine si el antisptico que utilizaron puede ser el reservorio o fuente de la Pseudomona aeruginosa que provoc los casos de infeccin.

Nota: El antisptico contiene Amonio cuaternario Pistas: Crece en la piel de personas con quemaduras por combustible gasolina (piel quemada), es decir, se encuentra en la superficie por motivo de que es una bacteria aerobia estricta ya que requiere grandes cantidades de oxgeno. Se encuentra en lugares hmedos (regiones con agua). Es una gran consumidora de cloro. (ms pistas en la introduccin y anexo).

QU TIPO DE MEDIO ES EL MEDIO DE CULTIVO AGAR CETRIMIDE?

El agar cetrimide es un medio selectivo para el aislamiento de Pseudomonas aeruginosa. Composicin: Digerido pancretico de gelatina20gr Cloruro de magnesio1.4gr Sulfato de potasio.10 gr Agar-agar13.6 gr Bromuro de N-cetil N,N,N-Trimetilamonio0.3 gr Glicerina..10 ml Agua destilada1.000ml Petroleo al 1%( hidrocarburo)= fuente de energa y carbono0.1 ml pH final 7.2 +/- 0.2 Procedimiento: suspender los ingredientes en el agua destilada, aadir 10 ml de glicerina y calentar agitando suavemente, dejar hervir completamente, esterilizar a 121 C, 15 lb de presin en 15 minutos. Enfriar entre 45C y 50 C y colocar 20 ml en cada caja petri. Colonias tpicas de Pseudomona aeruginosa: son pequeas color verdoso, con fluorescencia verdosa a la luz ultravioleta. El medio cambia de color claro a un azul verdoso. La diferencia que hay entre P. aeruginosa y las demas especies de este mismo genero es el pignmento piocianina (solo lo producen la P. aeruginosa).

LAS BACTERIAS QUE CRECEN EN EL (AGAR CETRIMIDE) REQUIEREN FACTORES DE CRECIMIENTO?

Al ser un medio selectivo contiene los componentes (nutrientes) necesarios para el crecimiento de una determinada bacteria. En la pregunta nmero uno podemos observar la composicin de dicho medio de cultivo. La Pseudomona aeruginosa es aerobia estricta, por lo tanto un nutriente de crecimiento es la glicerina ya que esta es una fuente de humedad (su funcin es humectar), tiene una propiedad hidroscpica (absorbe agua de aire por as decirlo). Otro nutriente fundamental para el crecimiento de dicha bacteria es el cloruro de magnesio es una sal por el cual una fuente de humedad (agua).Y por ltimo el nutriente Bromuro de N-cetil N,N,N-Trimetilamonio. Consumidoras de cloro.

A CUL SECCIN DEL MANUAL DE BERGEYS PERTENECE DICHA BACTERIA?

Categora: Eubacterias gramnegativas que tienen pareces celulares Eubacteria: bacteria comn, es decir, la mayora de las personas est familiarizada con la Pseudomona aeruginosa. Gram negativa: no se tien de azul oscuro o violeta por la tincin de Gram, y lo hacen de un color rosado: de ah el nombre de "Gram-negativas" o tambin "gramnegativas". Esta caracterstica est ntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular, por lo que refleja un tipo natural de organizacin bacteriana (presentan dos membranas lipdicas entre las que se localiza una fina pared celular de peptidoglicano (componente de la pared)..su pared es delgada, el color rosa se debe a la safranina).

Eubacteria gramnegativa que tiene pared celular: es un grupo heterogno que tiene una envoltura celular compleja (tipo gramnegativa) constituido por una membrana externa, una capa delgada e interna de peptidoglicano (que contiene cido murmico). La forma celular puede ser esfrica, oval, como bacilos rectos o curvos, helicoidal o filmentosa; algunas de estas formas pueden estar envueltas en vainas o encapsuladas. Reproduccin: fisin binaria, pero algunos grupos se reproducen por gemacin. La movilidad es por flagelos o por deslizamiento. Los miembros de esta categora pueden ser fototrficas (requieren Luz) o no fototrficas e incluyen especies aerbicas, anaerobias facultativas y microaerfilas, algunos miembros son parsitos intracelulares obligados.

Grupo 4: aerobios gramnegativos/bacilos y cocos microaerofilos Aerobio: requieren oxgeno. Bacilos: forma de barra o vara. Cocos: forma esfrica. Microaerfilos: microorganismo que para desarrollarse necesita atmsfera con baja tensin de oxgeno.

COMO HARAS PARA CONFIRMARME QUE SE TRATA DE UNA BACTERIA AEROBIA ESTRICTA?

Para confirmar si la bacteria es aerobia estricta se hara un anlisis de pruebas bioqumicas. Con el medio de cultivo OF (hugh-Leifson) sellndolo con aceite mineral: al ser suplementado con hidratos de carbono, se usa para determinar el metabolismo oxidativo-fermentativo de las bacterias Gramnegativas. Esta prueba es til para diferenciar especies bacterianas. Tambin, permite determinar movilidad y produccin de gas.

LIA: Utiliza lisina (todo morado)

TSI: No fermenta glucosa ni lactosa

OF: Aerobia estricta

MIO: (0.5 ml. reactivo de kovacs) ORNITINA: NEGATIVA INDOL: NEGATIVO NO HAY MOVILIDAD

Citrato de simmons: Utiliza el citrato

RM-Vogues Proskauer+reactivo 0.1 ml alfa de naftol,0.3 ml KOH al 40% (pH): positiva

Catalasa: positivo Tiene la Enzima catalasa Coagulasa: positivo

OXIDASA: POSITIVA

REQUIEREN GRANDES CONCENTRACIONES DE NACL?

El desinfectante si requiere concentraciones de NaCl para su elaboracin, aqu se llega a la conclusin que el desinfectante es un jabn. Contiene cloro y es un factor por el cual la bacteria es resistente. La funcin de NaCl es parar la separacin del jabn y quede flotando sobre la solucin acuosa. Algunos compuestos de Amonio cuaternario son inactivos en presencia de Jabn o de residuos de jabn, por lo dicho la seleccin de este producto es importante. Su actividad anti- bacteriana se reduce con la presencia de material orgnico.

ES EL ANTISPTICO ANALIZADO UN POSIBLE

RESERVORIO DE LA CEPA QUE CAUS LAS

INFECCIONES EN LOS PACIENTES?

La Pseudomona aeruginosa es resistente a los compuestos de amonio cuaternario, por lo tanto es un reservorio el desinfectante.

El amonio cuaternario: Las sales de amonio cuaternario, sobre todo aquellas que van como cloruro o bromuros.

Mecanismo de accin: La porcin hidrfoba penetra en las membranas, mientras el grupo polar catinico se asocia con los fosfatos de los fosfolpidos provocando alteraciones en dichas membranas, reflejadas en la perdida de su semipermeabilidad, con salida de metabolitos N y P desde su citosol. Es entonces cuando el detergente puede entrar al interior de la clula con un efecto secundario de desnaturalizacin de protenas (en el material a tratar no debe de existir materia orgnica), tiene carga positiva, se interacciona con m.o.s. de carga negativa, desorganizando la envuelta celular. La Pseudomona aeruginosa se caracteriza por presentar mltiples mecanismos de resistencia, presenta una resistencia absoluta (sucede un incremento sbito en la MIC de un cultivo durante o despus de la terapia).

Contiene unos canales inespecficos que excluyen al antibitico por tamao molecular llamadas porinas, es decir son canales de difusin simple presentes en la membrana externa de la bacteria. De la modificacin por mutacin de estas protenas se genera una disminucin al paso del antibitico y/o desinfectante (Pseudomona aeruginosa contra aminoglusidos y carbapenem).
Dentro de los mecanismos de resistencia de Pseudomona aeruginosa es la modificacin de la permeabilidad de la pared y que les gusta el cloro (consumidora de cloro).

CONCLUSIN:

Pseudomona aeruginosa se caracteriza por presentar mltiples mecanismos de resistencia a los antimicrobianos. Con respecto a los antibiticos beta-lactmicos la resistencia se basa principalmente en la combinacin de impermeabilidad de la membrana externa (por alteracin de diversas porinas) con la produccin de cefolosporinasa cromosmica inducible; en menor medida contribuyen las betalactamasas de origen plasmdico. Adems de las enzimas inactivantes y la disminucin en la acumulacin de las drogas por alteracin de la permeabilidad de las membranas (impermeabilidad y eflujo), puede presentar modificaciones del sitio blanco del antimicrobiano.21

FABRICACIN DE JABN
El proceso de fabricacin de jabn es, a grandes rasgos, el siguiente: 1. se coloca el aceite o grasa en un recipiente de acero inoxidable, llamado paila, que puede ser calentado mediante un serpentn perforado por el que se hace circular vapor. 2. Cuando la grasa se ha fundido 8O, o el aceite se ha calentado, se agrega lentamente y con agitacin una solucin acuosa de sosa. La agitacin se contina hasta obtener la saponificacin total. 3. Se agrega una solucin de sal comn (NaCl) para que el jabn se separe y quede flotando sobre la solucin acuosa. 4. Se recoge el jabn y se le agregan colorantes, perfumes, medicinas u otros ingredientes, dependiendo del uso que se le quiera dar. 5. El jabn se enfra y se corta en porciones, las que enseguida se secan y prensan, dejando un material con un contenido de agua superior al 25%.

BIO- POLIMEROS Macromolculas sintetizadas por un proceso biolgico. Funcin: textura Naturales: exudados de plantas, extractos de algas, las semillas, cereales, los extractos de plantas, de origen animal y de origen microbiano

Semi- sintticos: Celulosas modificadas, almidones modificados, pectinas modificadas, alginato de propilenglicol
Sintticos: PVP (nica aprobada para su empleo en alimentos)

POLISACARIDO ORGANISMO

DEXTRANOS

PULULANOS

BACTERIAS: Leuconostoc mesenteroides, L. dextranicum, Acetobacter sp HONGOS: Aureobasidium pullulans BACTERIAS. Pseudomonas aeruginosa, Azotobacter vinelandii BACTERIA: Xanthomonas campestris

TIPO DE POLIMERO Ramificado Cadenas cortas Lineal

MONOMERO D-glucopiranosa

UNIONES 1-6 (cadena principal) y 1-3, 1-2 o 1-4 en las ramificaciones 1-4 (mayoria) y pocas 1-6 1-4 y 1-4

D-glucopiranosa

ALGINATOS

Lineal

d- manuronico d- glucuronico (4:1 a 20:1)

XANTANOS

Lineal con ramificaciones de trimeros acidicos (pentasacarido) Tetrasacarido

GELANOS

Pseudomonas

d-glucosa 1-4 (principal) , 6 1-3 Oacetil-manosa, 1-2 glucuronico, manosa y piruvato 2 (D-glucosa) + Lramnosa+ Dglucuronico

HTTP://WWW.MED.UNNE.EDU.AR/REVISTA/REVI STA121/PSEUDOMONAS.HTM

Mecanismo de resistencia: Pseudomona aeruginosa se caracteriza por presentar mltiples mecanismos de resistencia a los antimicrobianos. Con respecto a los antibiticos beta-lactmicos la resistencia se basa principalmente en la combinacin de impermeabilidad de la membrana externa (por alteracin de diversas porinas) con la produccin de cefolosporinasa cromosmica inducible; en menor medida contribuyen las betalactamasas de origen plasmdico. Adems de las enzimas inactivantes y la disminucin en la acumulacin de las drogas por alteracin de la permeabilidad de las membranas (impermeabilidad y eflujo), puede presentar modificaciones del sitio blanco del antimicrobiano.

PARTICIPACIN DEL GLUTAMATO EN LA ADAPTACIN OSMTICA DE PSEUDOMONAS

AERUGINOSA

La accin del glutamato como osmoprotector exgeno en cultivos de Pseudomonas aeruginosa crecidos en condiciones hiperosmolares. La adicin de glutamato exgeno, a partir de una concentracin 0,1mM, confiere osmoproteccin cuando esta bacteria crece en presencia de NaCl, con glucosa y amonio como fuentes de carbono y nitrgeno, respectivamente. El efecto se pone de manifiesto por la disminucin del tiempo de latencia, sin variaciones en el tiempo de generacin. En ausencia como en presencia de glutamato, a medida que se incrementa la concentracin de NaCl en el medio de cultivo, aumenta el tiempo de latencia y el tiempo de generacin con respecto a cultivos que no contienen NaCl.