EL MICROSCOPIO

tema1

HISTORIA: EL INVENTO

Se invent, hacia 1610, por Galileo, segn los italianos, o por Jansen, en opinin de los holandeses

EL NOMBRE
La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por los componentes de la "Accademia dei Lincei Micro=pequeo Scopein=ver

GALILEO GALILEI
La Accademia dei Linceii era una sociedad cientfica a la que perteneca Galileo y publicaron un trabajo sobre la observacin microscpica del aspecto de una abeja

MALPIGHI
Las primeras publicaciones importantes aparecen en 1660 y 1665 cuando Malpighi observa los capilares sanguneos y Hooke publica su obra Micrographia

ANTONY VAN LEENWENHOEK

En el siglo XVII un comerciante holands, utilizando microscopios simples de fabricacin propia describi por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glbulos rojos

MICROSCOPIO DE LEEUWENHOEK

CARACTERSTICAS DEL MICROSCOPIO DE LEEUWENHOEK

El primitivo microscopio de Leeuwenhoek tena dos lupas combinadas con las que lleg a alcanzar 260 aumentos, lo cual le permiti visualizar algunos protozoos e infusorios

MICROSCOPIOS DEL SIGLO XVIII

ERNST ABBE
Las mejoras mas importantes de la ptica surgieron en 1877 cuando Abbe publica su teora del microscopio

CALR ZEISS
Mejora la microscopa de inmersin sustituyendo el agua por aceite de cedro lo que permite obtener 2000 aumentos

MICROSCOPIOS

EVOLUCIN DEL MICROSCOPIO

Microscopio

Instrumento que sirve para hacer visible los detalles finos de objetos pequeos, no captados a simple vista.
Actinomyces teidos con Gram

MICROSCOPIO
Para observar elementos tan pequeos es necesario disponer de lentes de aumento Estas lentes se conocen desde 721-705 AC, pero la ptica como disciplina se comenz a desarrollar en el siglo XIII con el monje franciscano Roger Bacn

Galileo 1607 invent microscopio despus del telescopio

Zacaras Janssen
Siglo XVI (16089

Construye un microscopio con dos lentes convergentes.

Primer microscopio compuesto Consta de 3 tubos superpuestos de bronce Mide 1.5 m largo y 5 cm de dimetro Lentes en los extremos y diafragmas intermedios Se enfoca moviendo el tubo (alejndolo y acercndolo) Aumentos producidos: 3X10X

Anthony van Leeuwenhoek

(holands)
Siglo XVII

Consta de dos placas metlica remachadas y una lente biconvexa de alta calidad Mide entre dos y una pulgada El objeto se pone en el alfiler detrs de la lente, un tornillo ajusta la distancia entre la muestra y la lente y otro la altura de la muestra Aumentos producidos: 70X 250X

Robert Hooke
Britnico Siglo XVII

Ocular Lmpara de aceite Recipiente con agua

tubo

Tornillo de enfoque objetivo Muestra

John Yarwell
Ingles Siglo XVII

Formado por un juego de cilindros Sostenido por un tripie fuerte Tiene lente ocular y una lente objetiva intercambiable La muestra se coloca en el agujero de la base

Nicols Bonanni
Italiano Siglo XVII

Primer microscopio horizontal Enfoque fino Presenta condensador, cercano a una lmpara Exista un eje ptico

John Dollond
Britnico Siglo XVIII

Consta de ocular y objetivos (de 3 a 6 aumentos) En la base tiene un espejo cncavo que sirve como condensador Se enfocado resbalando el cuerpo interno de arriba abajo dentro del tubo exterior

Edmund Culpeper
Britnico Siglo XVIII

Consta ocular y objetivos de diferentes aumentos En la base tiene un espejo cncavo que sirve como condensador Aumentos producidos: 30X 250X

Nuremberg
Alemania
Siglo XVIII

Consta ocular y objetivos de diferentes aumentos Tiene una base para la muestra con diferentes anillos (platina) Posee un espejo que orienta la luz

William and Samuel Jones

Londres Siglo XVIII

Usa una lente como condensador Base ms estable Por su construccin permite el ajuste de cada parte Posee lentes acromticas Permite ver toda la muestra por su movimiento (carro)

Benjamn Martn
Britnico 1780

Ocular formado por sistema de lentes Tiene Condensador Lentes objetivas de diferentes aumentos

J. J. Lister
Britnico 1826

Movimiento controlado por perchas y engranes Tiene lentes acromticas Soporte para el condensador y el reflector.

Camille Sbastien Nachet

1833

Primer microscopio de polarizacin Tiene dos prismas de Nicoll (ocular y debajo platina) Platina redonda Pinzas para la muestra Objetivos y oculares intercambiables

J. L. Riddell
Louisiana 1853.

Microscopio binocular Base en forma de herradura Platina fija con pinzas para la muestra Condensador y espejo doble Se enfoca bajando el cuerpo del microscopio

Geneva Optical Company

1861

Microscopio con 5 oculares Prisma que orienta la luz a cada ocular Platina redonda rotable con pinzas para la muestra Se enfoca bajando el cuerpo del microscopio

Andrew Ross
Londres 1882

Microscopio inclinable y rotable Base gira a 360 grados Brazo con gran movimiento Platina graduable Los objetivos y oculares de alta calidad

Ernst Leitz
Alemania 1899

Enfoque subiendo y bajando la cabeza del Microscopio Disco con una serie de diafragmas Iluminacin con espejo bicncavo

Fotomicroscopio Leitz alemn

1910

Posicin horizontal o vertical Lampara de gas Iluminacin se orienta con el espejo

Siglo XX
Renacimiento en tecnologa del microscopio Introduccin de la pelcula y tecnologa de la cmara Introduccin de tcnicas microscpicas como son: Contraste de fase Campo oscuro Fluorescencia Microscopia electrnica

MICROSCOPIA
Ciencia de los usos y aplicaciones interpretativas de los microscopios La utilidad de cualquier tipo de microscopio, no slo depende de su capacidad de aumento sino, ms importante, de su capacidad para resolver detalles

M.E. DE TRANSMISION

M.E. DE BARRIDO

CAMPO CLARO

CAMPO OSCURO

CONTRASTE DE FASE

FLUORESCENCIA

CLASIFICACION DE LOS MICROSCOPIOS

Simples: forman imagen virtual MICROSCOPIO

Compuestos: forman imagen real y virtual

FUNDAMENTO DE LA MICROSCOPA
Cuando el observador se acerca el objeto se agranda Pero a menos de 25 cm no se ve con claridad Si se aumenta el ngulo visual se ve con claridad

ESQUEMA DEL MICROSCOPIO

Un tubo cilndrico aloja el sistema ptico ocular/objetivo. Una platina de original diseo permite observar las preparaciones, que son iluminadas por un espejo cncavo que concentra la luz sobre el objeto a estudiar.

PARMETROS PTICOS
Aumento Poder de resolucin N de campo Profundidad de foco Contraste

AUMENTO Se calcula multiplicando el aumento del objetivo por el aumento del ocular

PODER DE RESOLUCIN
Distancia si dos puntos se distinguen Mayor, cuando menor es la longitud de onda Mayor, cuanto mas grande es la apertura numrica Mayor, con aceite de cedro

Nmero de campo Es el dimetro de la imagen observada a travs del ocular, expresado en milmetros

PROFUNDIDAD DE CAMPO

CONTRASTE
Diferencia de absorcin de luz entre el objeto y el medio Puede aumentarse con las tinciones

BUENOS PARMETROS

MICROSCOPIO PTICO COMPUESTO

PARTE MECNICA QUE SE PUEDE DESMONTAR

Estativo

Cabezal

Tornillos de la platina

Oculares Objetivos Condensador

SISTEMA DE SOPORTE O ESTATIVO

Tubo Platina

Brazo

Pe

SISTEMA DE AJUSTE (1)

Anillo de ajuste de los oculares Tornillo que permite mover el cabezal Tornillos del condensador

Palanca de cierre del diafragma

Tornillos reguladores de la platina

SISTEMA DE ENFOQUE
Freno

Tornillo macromtrico

Tornillo micromtric o

PLATINA

Pinza

Escala

PARTE PTICA
Sistema de iluminacin: fuente de luz, condensador y diafragma Lentes: objetivos y oculares

SISTEMA DE ILUMINACIN: FUENTE DE LUZ

Suele ser una lmpara halgena de intensidad graduable Se enciende y apaga con un interruptor En el exterior puede tener un filtro
Interruptor y graduacin de la luz

Filtro

Lmpara

CONDENSADOR Y DIAFRAGMA
Condensador: concentra la luz de la lmpara en un punto de la preparacin Diafragma o iris (est dentro del condensador):si se cierra mejora el contraste, pero empeora la resolucin

LENTES: OBJETIVOS
Estn colocados en el revolver Tienen un sistema de amortiguacin Un anillo coloreado indica los aumentos Son de 4, 10, 40 y 100 (inmersin) aumentos

OBJETIVOS

Rojo 4x

Amarillo 10x

Blanco 100x

Azul 40x

Amortiguacin

LENTES: OCULARES

Ajuste de la distancia interpupilar

Oculares

OCULARES: 10x; 15x; 20x

TETRAOCULARES

MATERIAL NECESARIO: PORTAS Y CUBRES

ACEITE DE INMERSIN
Hoy no son de madera de cedro, sino sintticos Los hay de baja, media y alta viscosidad Su empleo es imprescindible con el objetivo de inmersin (100x)

MANEJO DEL MICROSCOPIO

No poner la preparacin al revs Regular la luz a intensidad media Ajustar condensador y diafragma al medio Empezar por poco aumento Mirando por fuera subir la platina Enfocar y ajustar Pasar al siguiente aumento y enfocar Al acabar retirar la preparacin Apagar la luz

CONSERVACIN DEL MICROSCOPIO

Ponerle su funda al guardarlo Limpieza de lentes con papel de gafas El exceso de xilol al limpiar las lentes desgasta el cemento Usar pincel y pera de aire

TIPOS DE MICROSCOPIOS
Microscopio ptico Simple Microscopio ptico Microscopio ptico Compuesto

Lupa
M.O. Normal Campo oscuro Contraste de fases Fluorescencia

Tipos de microscopio s Microscopio electrnico

Transmisin Barrido Digital Efecto tnel o cuntico

PODER DE OBSERVACIN DEL MICROSCOPIO

MICROSCOPA DE CAMPO OSCURO

Treponema pallidum

MICROSCOPA DE CONTRASTE DE FASES

Clulas epiteliales 20 x

MICROSCOPIA DE FLUORESCENCIA

Clulas epiteliales 200 x

ERNST RUSKA
El microscopio electrnico de transmisin (T.E.M.) consigui aumentos de 100.000 X. Fue desarrollado por Max Knoll y Ernst Ruska en Alemania en 1931

PRIMER MICROSCOPIO ELECTRONICO

Utiliz un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la muestra. Posteriormente, en 1942 se desarrolla el microscopio electrnico de barrido (SEM).

PRIMER M.E. EN ESPAA (1949)

MICROSCOPIO ELECTRNICO

MICROSCOPIO ELECTRNICO DE BARRIDO

M.E. DE TRASMISIN

Bacilos en divisin

M.E DE BARRIDO

Glbulo rojo

M.E. DE BARRIDO

Glbulo blanco

FIN