LIGAMIENTO

Prof. Mauricio Moraga V.

   
Agosto 2006
 Lo fundamental del trabajo de
G. Mendel fue demostrar que
los “determinantes hereditarios”
(genes) segregan (1ra Ley) y que
se transmiten de padres a hijos
como unidades separadas
(2da Ley).

   
 Lo fundamental del trabajo de
G. Mendel fue demostrar que
los “determinantes hereditarios”
(genes) segregan (1ra Ley) y que
se transmiten de padres a hijos
como unidades separadas
(2da Ley).

Por lo tanto:
-Segregan en gametos distintos.
-Se asocian independientemente.
   
 Primera ley de Mendel

Los determinantes (alelos) de un 
carácter dado segregan equitativamente 
durante la formación de gametos.

Aa

A a

   
 Segunda ley de Mendel

Cuando los determinantes para dos 
caracteres segregan simultáneamente, 
se asocian de manera independiente.

A a; B b

AB Ab aB ab

   
 Theodor Boveri Walter S. Sutton
(1862-1915) (1877-1916)

ostularon la existencia de una relación entre el comporta-

miento de los cromosomas durante la meiosis y la segregació
distribución
 
independiente de  la herencia.
 Segunda ley de Mendel

Meiosis
Cuando dos genes segregan 
simultáneamente, se asocian 
de manera independiente.

   
 Segunda ley de Mendel

Meiosis

   
  ¿se cumple siempre la segunda ley de Mendel?

 Herencia del color de la flor y de la 
forma del polen en chícharo dulce

púrpura púrpura rojo rojo

largo redondo largo redondo

Observado 1 390 393 1338 6952

Esperado 3 1303 1303 435 6952

9 3 3 1

   
  ¿se cumple siempre la segunda ley de Mendel?

 ¿Cómo tendrían que estar los genes para 
que se cumpla lo  que esperábamos?

   
  ¿se cumple siempre la segunda ley de Mendel?

 ¿que es lo que pasaría en caso de estar ambos genes 
completamente juntos en el mismo cromosoma?

   
  ¿se cumple siempre la segunda ley de Mendel?

 ¿que es lo que muestran los resultados?

   
  ¿se cumple siempre la segunda ley de Mendel?

Datos de Morgan para Drosophila (1909): 2839 moscas
Color de ojos  A: rojo a: púrpura
Largo de alas    B: normal b: vestigial

AABB           x           aabb

AaBb         x           aabb

AaBb         Aabb    aaBb       aabb
Esp.          710            710       710         710
  Obs.        1339           151       154        1195
 
  ¿se cumple siempre la segunda ley de Mendel?

¿Cómo explicó Morgan este fenómeno?

A A a a
×
B B b b

A a a a
F1: ×
B b b b

A a a a A a a a
F2: b
B b b b b b B
   
  Mapa genético del genoma de Drosóphila

   
  Mapa genético del genoma de Drosóphila

   
  Recombinación por asociación independiente

Si NO están ligados

   
  Recombinación por asociación independiente

Si NO están ligados

   
  Si están completamente ligados

   
  Si están completamente ligados

 No hay recombinación por asociación independiente

   
  Si están parcialmente ligados

   
  Si están parcialmente ligados

   
  Recombinación por entrecruzamiento

   
 Meiosis: profase I
Los homólogos se repelen
y quedan unidos por los
quiasmas. Los quiasmas
se ubican en los lugares
donde hubo
entrecruzamiento en el
paquiteno.
diploteno

paquiteno
diacinesis
Se completa la
Aumenta la
sinapsis
condensación
Se produce la
cromosómica.
recombinación
(entrecruzamiento o
crossing over)
   
 Entrecruzamiento visto mediante
microscopía electrónica

   
 Evidencia citológica de entrecruzamiento
Quiasmas Formación de quiasmas
durante el apareamiento
meiótico

A B C A B C
A b C
Cromosomas
homólogos
duplicados a B c
a b c a b c
   
 Entrecruzamiento

   
  Recapitulemos

Genes NO ligados
Genes en el mismo
grupo de ligamiento
Genes en el mismo
grupo de ligamiento
Cinco grupos de ligamiento

   
De un cruce de prueba con un dihíbrido se podrá
esperar que:
 No exista ligamiento : 4 fenotipos distintos AB, Ab,
aB y ab en la proporción 1:1:1:1

 Exista ligamiento completo : 2 fenotipos

AB
➘ Si AaBb AB y ab (1:1)Genes en posición cis
ab o ACOPLAMIENTO
Ab Genes en posición trans
➘ Si AaBb Ab y aB (1:1)
a o Fase de REPULSIÓN
B
 Exista ligamiento : 4 fenotipos distintos AB, Ab, aB y
ab
en
  proporciones distintas.  
 Nomenclatura

AaBb   La notación habitual no contiene información 
respecto a si los genes están o no ligados. 

AB/ab  o Ab/aB  Esta notación indica que los genes 
están ligados y nos muestra ademas la fase.

AB/ab     =   A  B A  B

=  
a   b   a   b  

A A a a
B B b b
   
 Nomenclatura:  Fases de un dihíbrido

Fases de acoplamiento Fases de repulsión
o Fase CIS o Fase TRANS

A A a a A A a a

B B b b b b B B

AB/ab Ab/aB

   
 Frecuencia de recombinación

AABB           x           aabb

AaBb         x           aabb

AaBb         Aabb    aaBb       aabb
Esp.          710            710       710         710
Obs.        1339           151       154        1195

Parental Recombinantes Parental

   
 Frecuencia de recombinación

Número de recombinantes
RF =   x 100  
Número total de descendientes

Parental Recombinantes Parental

AaBb         Aabb    aaBb       aabb
  Obs.      1339           151       154        1195

151  +  154
RF =   x 100  
1339  +  151  +  154  +  1195

RF = 10,7% 
   
 Distancia entre genes y mapas de ligamiento

A. Sturtevant (1913).

Cuanto más cerca estén dos genes, menor será la probabilidad 
que ocurra un evento de entrecruzamiento y por tanto menor la 
frecuencia de recombinación.

   
 Distancia entre genes y mapas de ligamiento

Las  frecuencias  de  recombinación  (RF)  son 

proporcionales  a  las  distancias  entre  los  genes, 
luego la RF puede ser utilizada como una medida 
de distancia entre genes.

1  unidad  mapa  (u.m.)  corresponde  a  la  distancia 

entre  dos  loci  para  la  cual  una  de  cada  100  meiosis 
produce un recombinante.

A. Sturtevant (1913). La unidad mapa se llama también cM (centimorgan).

1 u.m.  =   1 cM   =    FR de 0,01   =   1% recombinación

   
Distancia entre genes y mapas de ligamiento

10,7 cM

151  +  154
RF =  
1339  +  151  +  154  +  1195

  RF = 10,7%   
 Mapa a partir de cruzamientos de prueba de
dos puntos (dos loci en el mismo cromosoma)

Se determina la distancia de 2 en 2 entre loci

y éstas se suman para estimar la distancia
genética total de un cromosoma.

A B

   
 Orden de los genes

Se han estudio tres pares de genes y estas son las

distancias entre ellos:

distancia A-B = 12
distancia B-C = 7
distancia A-C = 5

¿Cuál es el orden de los genes? Las distancias

deben ser aditivas y consistentes entre sí

Supongamos las tres ordenaciones posibles

   
 Orden de los genes
Ordenaciones posibles
Caso 1: Marcador A está en el medio:
B A A C
12 5
B C
7
Caso 2: Marcador B está en el medio:
A B B C
12 7
A C
5
Caso 3: Marcador C está en el medio:
A B
12
A C Aditivo
5 7
  C   B
 Orden de los genes

• Los mapas genéticos observados mediante análisis de

ligamiento, no coinciden con los mapas físicos o reales,
ya que la frecuencia de recombinación en un segmento
no es la misma que en otro.

• Así, aunque el orden de los genes coincide, la distancia

relativa entre ellos no.

• Los resultados obtenidos a partir de estos cálculos no

son confiables para todos los genes, ya que puede
haber entrecruzamientos dobles que desvirtúen los
mismos.

   
 Estudio de entrecruzamientos

R T R Q
T
r t r q t

R T R q
T

r t r Q
t
Si se consideran sólo 2 genes, no se puede detectar
el entrecruzamiento, mientras que si se consideran
tres genes, se detecta si se ha producido un
  entrecruzamiento doble.  
   
• En la práctica, el método de las frecuencias de
recombinación sólo se emplea para genes que estén
próximos, a menos de unas 10 unidades de distancia
(10 centimorgan). Para algunos segmentos puede
ampliarse hasta 15 o 20 unidades.

• Se ha observado que en distancias tan cortas,

difícilmente se producen entrecruzamientos dobles.

• Los entrecruzamientos dobles pueden detectarse

genéticamente si se consideran 3 genes ligados en vez
de 2.

   
Un método común utilizado para medir las distancias de mapa consiste e
eterminar las frecuencias de recombinación entre tres pares de genes.
ste método se denomina “cruzamiento de tres puntos”

Ojos color rojo = +

Ojos color scarlet = st + + + st b e
P: x
Cerdas largas = + + + + st b e
Cerdas cortas = b
+ + +
Cuerpo café claro = + F1 :
Cuerpo café oscuro = e st b e
  (ebony)  
 Cruzamiento + + + st b e
x
de prueba : st b e st b e

F2 + b e
: 104
st b e
st + +
98
st b e
+ + +
370 + + e
st b e 731 28
= 73,1% st b e
1000 269
st b e No = 26,9%
361 st b + 1000
recombinantes recombinantes
st b e 31
st b e
+ b +
5
st b e
st + e
    3
st b e
 Fenotip Número de Recombinación entre :
o individuos st - b b-e st - e
(F2)
+ + + 370 - - -
st b e 361 - - -
+ b e 104 104 - 104
st + + 98 98 - 98
+ + e 28 - 28 28
st b + 31 - 31 31
+ b + 5 5 5 -
st + e 3 3 3 -
210 67 261
% de recombinación 21% 6,7% 26,1%

26,1

st b e

  21%   6,7%
 Mapa de ligamiento del tomate

   
 Mapa de ligamiento del tomate construido en 1952

   
 y… ¿qué pasa con los humanos?

Genes identificados 26.000

Pares de cromosomas 23

   
 y… ¿qué pasa con los humanos?

   
 Evaluando el ligamiento en una genealogía

   
 Para la aplicación del análisis de ligamiento en humanos
es necesario contar con una familia con un progenitor
doble heterocigoto y otro doble recesivo (condición más
informativa).
Ab ab
aB ab

Ab Ab aB Ab
ab ab ab ab

Con ello hay que calcular la probabilidad de que ocurra

ligamiento en una familia en relación con la probabilidad de
que no exista ligamiento en esta familia. Este método es
llamado: Odds Score.
   
 Ab ab
aB ab

Ab aB
ab ab

PL (probabilidad de ocurrencia de dicha familia en el caso de haber ligamiento completo

Odds Score entre los genes analizados)

= P no L (probabilidad de ocurrencia de dicha familia en el caso de no haber ligamiento

entre los genes analizados)

1/2 x 1/2 = 0
Odds Score 1/4 = ,25 =4
= 1/4 x 1/4 = 0,062
1/16 5
“La probabilidad de ocurrencia de esta familia es 4 veces más
si los genes Ab están ligados”
   
 Ab ab
aB ab

AB aB
ab ab

PL (probabilidad de ocurrencia de dicha familia en el caso de haber ligamiento completo

Odds Score entre los genes analizados)

= P no L (probabilidad de ocurrencia de dicha familia en el caso de no haber ligamiento

entre los genes analizados)

0 x 1/2 = 0 0
Odds Score = =0
= 1/4 x 1/4 = 0,062
1/16 5
“La probabilidad de ocurrencia de esta familia es 0 si los genes
Ab están completamente ligados”
   
 Ab ab
aB ab

AB aB
ab ab

PL (probabilidad de ocurrencia de dicha familia en el caso de haber ligamiento completo

Odds Score entre los genes analizados)

= P no L (probabilidad de ocurrencia de dicha familia en el caso de no haber ligamiento

entre los genes analizados)

1/2(0,1) x 1/2(0,9) = 0,022

Odds Score 0,0225 = 5 =
= 1/4 x 1/4 = 0,062 0,36
1/16 5
“La probabilidad de ocurrencia de esta familia es 0,36 si los
genes Ab están parcialmente ligados, con una distancia de 10
 
cM”  
 Ab ab
aB ab

AB aB
ab ab

PL (probabilidad de ocurrencia de dicha familia en el caso de haber ligamiento completo

Odds Score entre los genes analizados)

= P no L (probabilidad de ocurrencia de dicha familia en el caso de no haber ligamiento

entre los genes analizados)

1/2(0,4) x 1/2(0,6) = 0,06 0,06

Odds Score = =
= 1/4 x 1/4 = 0,062 0,96
1/16 5
“La probabilidad de ocurrencia de esta familia es 0,96 si los
genes Ab están parcialmente ligados, con una distancia de 40
 
cM”  
 • Conjugación
Mapas
genéticos • Transducción
en Bacterias : • Transformació
n

   
 Conjugación Bacteriana

Experimento de
Lederberg y Tatum con 2
cepas auxotrófica de E.
coli y la producción de
cepas prototróficas.
   
   
 Conjugación

   
 Conjugación

   
 Algunos de los sitios de integración
  del factor F en el  cromosoma de E.
coli.
 Ciclo de vida de los
virus

   
 Transducción en bacterias

   
Modelo de transducción generalizada de virus
 Transducción

   
 Transformación

   
Transformación Bacteriana

   
 Transformación Bacteriana

Curva de crecimiento bacteriano

   
Mecanismo de transformación bacterian

   
 Mapas genéticos en humanos

Mapas genéticos (de Mapas físicos

recombinación)

• Herencia ligada al • Métodos especiales de

cromosoma X cultivo celular: hibridación
• Marcadores polimórficos de células somáticas
asignados a colecciones • Hibridación in situ de
de familias (CEPH). sondas de DNA en
•alozimas cromosomas metafásicos
•DNA (RFLPs, • Secuenciación del DNA
microsatélites,
RAPDs,...)
• La caza de genes
asociados a
  enfermedades  
 Mapas genéticos en humanos

•Estudios familias
•Herencia ligada al cromosoma X
marcadores clásicos
•Autosómicos marcadores clásicos

•Cartografía marcador-enfermedad
•La caza de genes asociados a
enfermedades

•Cartografía marcador-marcador
•Estudios marcadores polimórficos
asignados a colecciones de familias (CEPH).
•DNA (Microsatélites, RFLPs, RAPDs,...)
   
 Mapa
genético de
alta
resolución del
Cromosoma 1
Homo
sapiens
The Cooperative
Human Linkage
Center

http://lpg.nci.nih.gov/CHLC/
   
Mapa genético a través de la herencia ligada al cromosoma X
(359 loci se han asignado al X)

Xg Proteína grupo sanguíneo

Ictiosis (un efermedad de la piel)

Albinismo ocular

Angioqueratoma (crecto celular)

Centrómero
Fosfoglicerato-quinasa
Alfa-galactosidasa
Xm

Deutan (ceguera color rojo-verde)

G6PD
Protano (ceguera color rojo-verde)
Hemofília A