EL MILAGRO DE LA INGENIERA GENTICA

Introduccin a la Biotecnologa Jos Hiplito Isaza Martnez

DNA: La doble helice porta el material hereditario

DNA: DeoxyriboNucleic Acid 1953 artculo de la revista cientifica "Nature"

Historia del ADN

1856-1865 Mendel publica las leyes de la herencia En 1900 las leyes de Mendel fueron "redescublertas" por C.E. Correns, E. von Tscher mal y H. de Vries.

Historia del ADN

1869 Johann Friedrich Miescher (18441895), de Basilea, aisl la "nuclena"del pus de un vendaje. Esta sustancia no pudo degradarse por las proteasas. Tenia propiedades Acidas, y por ello se denomin ms tarde cidos nucleicos

50 aos mas tarde Bloques de construccin del ADN

1938: Rudolf Signer

Purific el DNA
1950: 15 gamos!!!!!
segn Cambridge el "man de Berna"

1928: Frederick Griffith

Neumococo: Streptococcus pneumoniae
Cepa R: rugosa (Sin cpsula) Inofensiva Cepa S: Lisa (Con cpsula) Mortal Transformacin: Intercambio de genes entre bacterias La cepa S posee un gen que la protege del sistema inmunolgico del huesped.

1944: 75 aos despus de Griffith

Theodor Avery McLeod y McCarty La informacin gentica es portada en los cidos nucleicos y no en las protenas Repiti el experimento de Griffith, pero con extractos y fracciones de las clulas virulentas muertas.

La tercera parte de la historla del DNA

la escribieron Erwin Chargaff, Maurice Wilkins, Francis C. Crick yJames D. Watson.

El principio de Chargaff 1950

Cromatografa lquida A/T = 1 G/C = 1

Nuclesidos purnicos

Nuclesidos Pirimidnicos

Nucletidos purnicos

Nucletidos pirimnidnicos

El ARN: cido Ribonucleico

La historia del ADN contina

Demostr la estructura en hlice de Compartieron el premio nobel con Watson y Crick.

La polimerizacin

ATP: Adenosin Trifosfato

La DNA Polimerasa requiere: Una doble hlice como punto de partida, un iniciador

PRIMER Con un grupo 3-OH libre

Acoplamiento de las bases

El acoplamiento de las bases

La tcnica decisiva de la ingeniera gentica

PCR
Polymerase Chain Reaction

Se utilizan las DNA polimerasas estables al calor de la bacteria:

Thermus aquaticus

Taq-polimerasas

VIH y SIDA
El virus de inmunodeficiencia humana (VIH) es la causa del sndrome de inmunodeficiencia adquirida.

Human immunodeficiency virus (HIV)

acquired immunodeficiency syndrome (AIDS)

2007: In 2007, an estimated 33.2 million personas Infectadas con SIDA (HUPFELD J.,EFFERTH T. In Vivo. 23(1): 1-6, 2009

Transcurso de la enfermedad

No todos los genes constan de DNA VIH

VIH HIV lentivirus
Retroviridae family
CCR5 CXCR4 CCR5 chemokine co-receptor (R5 virus) CXCR4 chemokine receptor (X4 virus)

VIH HIV Infecta linfocitos CD4+ (Cluster of Differentation)

Qu medicamentos se usan para la infeccin por VIH?

IN raltegravir NRTI Abacavir, Didanosine Lamivudine, Stavudine, Tenofovir, AZT(Zidovudine) NNRTI Delavirdine Efavirenz Etravirine Nevirapine

PI Amprenavir Atazanavir Darunavir Indinavir Fosamprenavir Lopinavir Nelvinavir Ritonavir* Saquinavir Tipranavir

Nef inhibition Guanidin Alkaloids

IF Enfuvirtide Maraviroc

Etapas en la infeccin con VIH-1 en la clula blanco . LE ROUZIC E.,BENICHOU S. Retrovirology. 2 11, 2005.

Organizacin genmica del VIH-1

Gag Precursor GagPol Precursor

Precursor polyprotein

Nef? Maduracin

SU: Surfase TM: Transmembrane

MA: Matriz CA: Cpside NC: Nucleocpside

RT: Reverse Transcriptase IN: Integrasa PR: Proteasa

Etapa inicial de infeccin de la clula husped (Linfocito CD-4) (Fusin y entrada)

enfuvirtide
Guanidine alkaloids

maraviroc

sPLA2s Venenos de serpiente e insectos

RNA Polimerasa

La aclaracin del cdigo gentico

En los anos 1940, George W. Beadle, Edward L. Tatum y Joshua Lederberg "Un gen conduce a la produccin de una enzima".

A, T, G, C

20 aminocidos

Las combinaciones
42 = 4 x 4 = 16 43 = 4 x 4 x 4 = 64 16 < 20 64 > 20

El cdigo est degenerado

La transcripcin