CURSO DE

BIOLOGIA MOLECULAR

EXPRESIÓN Y REGULACIÓN GÉNICA

EN PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS

Blgo. Mg. Cs. CARLOS SCOTTO ESPINOZA

 ¿QUE ES UN GEN?

Es una secuencia de nucleótidos a lo largo

de una molécula de ADN que representa
una unidad estructural y funcional de
herencia.

Los genes pueden dividirse en los que

codifican para PROTEINAS, y los que
transcriben a ARN.

Un gen también es la base bioquímica de

 PARTES DE UN GEN

- Poseen 3 partes:

- A. REGION PROMOTORA

- B. REGION CODIFICADORA

- C. REGION TERMINADORA
 REGION PROMOTORA
- Es la encargada de controlar la transcripción de la región
codificadora.

- Esta dividida en dos Regiones:

- 1. REGION PROMOTORA: Posee secuencias altamente

repetitivas en tandems que son reconocidas por la RNA
polimerasa para iniciar la transcripción.

- 2. REGION REGULADORA U OPERADOR: Posee

secuencias repetitivas (TATATA) que son reconocidas por
la Proteína Reguladora que bloquea la transcripción
(Negativa) o la promueve (Positiva). Esta proteina es
sintetizada por otro gen.
 REGION CODIFICADORA

Es la región que posee la secuencia que codifica

para una molécula funcional, sea proteína o
RNA.

En Procariotas esta secuencia es continua.

Mientras que en Eucariotas es discontinua, pues
presenta SECUENCIAS CODIFICANTES
denominadas EXONES y secuencias no
codificadoras llamadas INTRONES.
 REGION CODIFICADORA

En eucariotas y procariotas la secuencia inicial

para una proteína esta codificada por el
Triplete AUG. Pero codifica el aminoácido
Formilmetionina para procariotas y el
aminoácido Metionina para eucariotas.

También para ambos, el codón del último

aminoácido se encuentra antes de los tripletes
UAG, UAA o UGA.
 REGION CODIFICADORA

En eucariotas existe una secuencia

anterior al codón incial que determina la
METILACION DE UNA GUANINA, llamada
7-Metilguanosina o CAP (Capuchón).

Su función es darle al RNAm estabilidad y

facilitar su ensamblaje con el ribosoma.
 REGION CODIFICADORA

En eucariotas, en el extremo del codón de

terminación encontramos una secuencia de
consenso que permite la POLIADENILACION
del RNAm.

Esta “cola de Adeninas” puede tener de 50 a 150

Adeninas. Cuya función es determinar el tiempo
de vida media del RNAm.
 REGION TERMINADORA

Esta región esta compuesta por secuencias terminadoras.

La RNA polimerasa lee éstas secuencias y el RNAm
transcrito se pliega (HORQUILLA o Loop), haciendo
que la RNA polimerasa frene la adición de nucleótidos y
disociando al RNAm de la cadena de DNA molde.

La horquilla se forma porque posee SECUENCIAS

PALINDROMICAS (7 a 20 nucleótidos) flanqueadas por
Secuencias de Uracilo.

También se utiliza la RNA polimerasa posee el FACTOR

RHO.
REGULACION GENICA EN
PROCARIOTAS
Existe 2 mecanismos para la regulación de
la expresión de un gen en procariotas
(Transcripción):

 Regulación negativa intergénica a nivel

del DNA.

2. Regulación positiva intergénica nivel del

DNA.
 1. REGULACION NEGATIVA

Este gen presenta una región operadora que

tiene mucha afinidad con una proteína represora,
que es codificada por una región reguladora (otro
gen).

Al unirse el represor a la región operadora evita

que la RNA polimerasa transcriba la región
codificadora.

Ejemplo: Operón Lac (Degradación de Lactosa).

 2. REGULACION POSITIVA

Este gen presenta una región operadora que NO

tiene afinidad con una proteína represora
codificada por la región reguladora (otro gen).

Al NO unirse el represor a la región operadora la

RNA polimerasa transcribe la región codificadora.

Ejemplo: Operón Triptofano (Síntesis de

Triptofano).
REGULACION GENICA EN
EUCARIOTAS
Existe 4 mecanismos para la regulación de
la expresión de un gen en Eucariotas:

1. Regulación por metilación.

2. Regulacíón por condensación.

3. Regulación a nivel de la transcripción.

4. Regulación Homeótica.
 1. REGULACION POR METILACION

Es el mayor control ejercido sobre la transcripción

de un gen durante el desarrollo.

La metilación es llevada a cabo por las METILASAS sobre

la CITOSINA (5-Metilcitosina). La metilación afecta la
interacción (cargas) entre las proteínas y el DNA.

La metilación se HEREDA de una generación a la otra.

La metilación Inactiva genes.

 2. REGULACION POR CONDENSACION

Es una forma de control de la replicación y

transcripción de un gen.

Con el bandeo se puede observar como

bandas coloreadas.
 3. REGULACIÓN A NIVEL DE LA TRANSCRIPCIÓN

Existen distintas secuencias en el DNA

eucariota: Regiones TATA, promotores,
secuencias de unión de activadores y
represores, enhancers, que permiten la unión al
DNA de proteínas activadoras, represoras y
factores de transcripción.

Actúan en conjunto por cargas con el DNA.

Estas secuencias de DNA estan situadas a miles
de nucleótidos de un gen. Y son reconocidos por
diversas proteínas que, en conjunto, favorecen el
acceso de la RNA polimerasa al promotor del
gen.

Pueden ser específicos de un tejido y responder

a señales externas.
4. REGULACIÓN HOMEÓTICA
SE CONOCE TODO EL DESARROLLO EMBRIONARIO DE
ALGUNOS ANIMALES ...
SE CONOCE TODO EL DESARROLLO EMBRIONARIO DE
ALGUNOS ANIMALES ...
SE CONOCE MALFORMACIONES ANATOMICAS...
SE CONOCE MALFORMACIONES ANATOMICAS...
EXPERIMENTALMENTE SE HA LOGRADO ...
1. Existe un patrón dentro de cada embrión. En la
cual a partir de varias partes ordenadas se forma un
organismo  AUTOENSAMBLAJE

2. Esta gobernado por genes llamados GENES

HOMEOTICOS.

3. Se produce una cascada génica en un lugar (Espacio)

y momento (Tiempo) específico para cada célula. En
la que un gen activa o inactiva otros genes y éstos a
otros genes  JERARQUIA
 ¿DÓNDE SE DESCUBRIÓ LOS GENES HOMEOTICOS?

Se encontró en la mosca Drosophila 8 genes homeóticos

ubicados en el mismo cromosoma llamados GENES
HOX.

Lo interesante fue que cada uno determinaba una parte

del cuerpo de la mosca y además estaban en el mismo
orden de la parte que determinaban.

BOCA-CARA-CABEZA-CUELLO-TORAX-
ABDOMEN ANTERIOR-ABDOMEN POSTERIOR-
OTROS
 ¿QUÉ SON LOS GENES HOMEOTICOS?

1. Son genes que se encuentran situados uno al

lado del otro a lo largo del DNA.

2. Estan agrupados formando Complejos de

Identidad.

3. Cada complejo de identidad determina una

parte del cuerpo de un organismo como la
cabeza, el tórax o el abdomen.
4. Las mutaciones en los genes homeóticos
producen alteraciones en la identidad de un
segmento o porción corporal.

5. Los genes homeóticos sintetizan Factores de

Transcripción u Homeoproteínas que actuan
sobre los elementos reguladores u Homeobox
de otros genes homeóticos. Los cuales a su
vez producen otras Homeoproteínas formando
un gradiente molecular que determina el
patrón corporal del embrión y el fenotipo final
del organismo.
 SECUENCIA DEL HOMEODOMINIO

Arg Lys Arg Gly Arg Gln Thr Tyr Thr Arg Tyr Gln Thr Leu Glu
Leu Glu Lys Glu Phe His Phe Asn Arg Tyr Leu Thr Arg Arg Arg Arg
Ile Glu Ile Ala His Ala Leu Cys Leu Thr Glu Arg Gln Ile Lys Ile Trp
Phe Gln Asn Arg Arg Met Lys Trp Lys Lys Glu Asn
ACCION DE LA HOMEOPROTEINA SOBRE EL DNA
 ¿QUÉ ES UN HOMEOBOX?

En 1983 fueron descubiertos los HOMEOBOX o CAJA

HOMEOTICA. Que es una secuencia de 180 nucleótidos de
longitud y se encuentra en todos los genes homeóticos.

Todos los homeobox producen una secuencia de

60 aminoácidos de longitud llamado Homeodominio que
es parte de una Homeoproteína (Factor de Transcripción)
que va actuar sobre otro homeobox para activar o
desactivar otro gen homeótico.
Poseen una distribución filogenética amplia y muy
conservada evolutivamente. Encontrándose en la
levadura de pan, plantas y todo el Phyla animal
examinado hasta ahora.

 ANCESTRO COMUN (Hace 530 millones de años).

En los organismos invertebrados los genes homeóticos

se presentan en números pequeños y formando un solo
grupo. Mientras que en los vertebrados se presentan
en varias copias y en varios grupos (de hasta 4).

* En humano se encuentran en el cromosoma 12.

 ALTERACIONES EN EL HOMEOBOX
Una mutación en un Homeobox puede tener un efecto
grande en el fenotipo de un individuo  ACUMULATIVO

Los cambios producen embriones:

1. Con segmentos duplicados:

Con dos cabezas, doble espina dorsal, pezones
supernumerarios, bitórax, presencia de cola.

2. Pérdida de segmentos:
Ausencia de una extremidad donde debería
haberla.

3. Transformación de segmentos: Piernas donde

deberían haber antenas.
 ¿QUÉ SUCEDE EN EL EMBRION DE LA MOSCA DEL
VINAGRE DE LA FRUTA?

Después de la fecundación, el RNA de origen

materno de la mosca comienza a producir la
homeoproteína llamada BICOIDE en el embrión.

Esta proteína difunde a través del

huevo formando un Gradiente
Molecular que estable los ejes
anteroposterior y dorsoventral
del embrión.
SECUENCIA DEL DESARROLLO EMBRIONARIO
 RESUMEN

1. El citoplasma del cigote no es Homogeneo. Contiene

gradientes de mRNAs y proteínas que son los
productos de genes maternos.

2. El clivaje del cigote en miles de células contiene una

particular mezcla de mRNAs y proteínas.

3. Esta mezcla actúa sobre los genes homeóticos de los

núcleos de las miles de células embrionarias. Los
cuales producen Factores de Transcripción u
Homeoproteínas que actúan sobre otras células.
4. Así, el patrón de expresión génica de una célula es
única (Tiempo y Espacio)

5. En conclusión, la construcción de un organismo

con miles de tipos células diferenciadas requiere de
la localización correcta y el momento preciso
para llevar a cabo su función correctamente.
 ¿QUÉ SUCEDE EN EL EMBRION HUMANO?

En los vertebrados existe 39 genes homeóticos

llamados HOX. Que estan organizados en cuatro
grupos cromosómicos: Hox A, Hox B, Hox C y
Hox D.

Estan encargados de regular la morfogénesis y de

conferir la identidad axial para el desarrollo del
embrión.
Hox 1 = Atlas
Hox 2,3,4 = Vertebras Cervicales
 Inactivación = Pérdida de vértebras
 Sobrestimulación = Presencia de cola, espina
bífida

Hox 9 = Cintura escapular

Hox 10 = Húmero
Hox 11 = Cúbito y radio
Hox 12 = Carpianos
Hox 13 = Metacarpianos y falanges
 Inactivación = Pérdida de extremidades
 Sobrestimulación = Polidactilia, pezones
supernumerarios
Hoxa y Hoxd = Determinan las variaciones de los
patrones combinatorios de expresión de las
extremidades
Hox b, c y d = Rombencéfalo
Hoxd-13 = Produce sindactilia
Lim-1 = Cerebro anterior y medio
MFH-1 = Aorta
NSC-2.1 = Hipotálamo
Pax-1 = Formación de vértebras
Shh = Regula el eje anteroposterior del embrión
Nkx2-5 = Tabica el corazón
Wnt = Desarrollo de músculos