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Clarisse dos Santos Augusto Lvia Terra Pvoas Renata dos Santos Oliveira Tamillis Oliveira
Maca
2009
aspargo.
renais, e pelas suas caractersticas de elucidao e por ter se acumulado na bexiga urinria, foi denominado xido cstico e, somente muitos anos depois foi caracterizado como cistena.
1820 - a glicina foi isolada por Braconnot a partir da gelatina,
sendo o primeiro aminocido a ser obtido por hidrlise cida de uma protena; devido ao seu carter adocicado foi denominado de sucre de glatine e, posteriormente, glicina.
O que so peptdeos
Substncias formadas a partir da juno de dois ou
mais aminocidos por meio de uma ligao amido substituda, chamada de ligao peptdica.
Essa ligao formada pela desidratao de um
resduos de aminocidos.
biolgico.
Peptdeos menores tambm tem grande importncia.
Podem atuar como hormnios , fatores liberadores de hormnios, adoantes, antibiticos naturais, etc.
Regula a digesto
Estimula a ovulao
Necessidade de sntese
Com a descoberta da variedade de funes
abundantes e para obter uma quantidade satisfatria para o estudo destas substncias, passaram a desenvolver mtodos para isollos, purific-los, analis-los, caracteriz-los.
Tipos de sntese
soluo
Sntese qumica
fase slida
Sntese enzimtica
Sntese Qumica
assim denominada porque utiliza um reagente qumico para ativar o cido carboxlico de um Nacil-aminocido ou N-acil-fragmento peptdico o qual sofre o ataque nucleoflico do grupo - amino de outro aminocido ou fragmento peptdico Cbloqueados resultando na formao da ligao peptdica entre eles. grupos funcionais reativos que no esto diretamente envolvidos na formao da ligao peptdica devem ser previamente protegidos ou bloqueados. Assim, a sntese torna-se mais controlada em relao possvel formao de subprodutos.
os
ligao peptdica, implica a condensao do aminogrupo de um aminocido com a -carbonila de outro, com eliminao de uma molcula de gua. direta de dois aminocidos um processo difcil, no s pela natureza dipolar dos aminocidos, como pela variao de energia da reao envolvida no processo. Por isso, e pelas dificuldades de sntese que se podem depreender do que j foi descrito, as seguintes etapas devem ser seguidas para acoplamento de aminocidos com formao da ligao peptdica:
a)Proteo do -aminogrupo b)Proteo da -carbonila c)Proteo dos grupos funcionais das cadeias laterais dos aminocidos d)Acoplamento e)Crescimento da cadeia peptdica f)Remoo dos grupos protetores. Em sntese de peptdeos, a formao de ligao amida entre dois aminocidos ou fragmentos peptdicos chamada de acoplamento.
Proteo do -aminogrupo
A
introduo do grupo benziloxicarbonila ou tambm denominado carbobenzoxila por Bergmann e Zervas, representando o grupo das uretanas, e comumente simbolizado pela letra Z em homenagem ao segundo autor considerado um marco fundamental na histria da sntese de peptdeos. remoo do grupo Z feita preferencialmente por hidrogenao cataltica, sob paldio, presso atmosfrica, dando o peptdeo desejado, CO2 e tolueno; os dois ltimos so de fcil remoo, tornando a desprotonao bastante limpa. HBr em cido actico glacial e sdio em amnia lquida so outros processos de remoo do grupo Z, no entanto, o cido trifluoractico, menos agressivo, leva vrio dias para completar a reao, necessitando de aquecimento.
Proteo da -carbonila
A proteo do grupo carboxila tem como objetivo aumentar a
solubilidade dos reagentes, evitar a reao do carboxilato com os reagentes acoplantes ou acilantes e facilitar os processos de isolamento do produto final, aumentando,portanto, a eficincia das reaes de acoplamento.
As hidrazidas de acilaminocidos ou peptdeos so intermedirios clssicos na sntese de peptdeos via azidas, e a carboxila pode ser regenerada por reaes oxidativas. Os aminogrupos nas hidrazidas no so extremamente reativos, permitindo o aumento da cadeia peptdica pelo mtodo dos steres ativos. A prtica mais geral usar hidrazidas protegidas pelos grupos Z, t-Boc e tricoloroetoxicarbonila(Troc).
intimamente ligado ao emprego de grupos protetores dos grupos funcionais dos aminocidos, de tal modo que suportem as condies de sntese, e possam ser removidas sem causar dano aos aminocidos e s ligaes peptdicas formadas. Entre os 20 aminocidos naturais, 7 tem cadeias laterais que no necessitam de qualquer proteo (Gly, Ala, Val, Leu, Ile,Phe,Pro), 9 tem cadeias laterais cuja proteo facultativa (Arg, Tyr, Ser, Thr, His,Gln, Asn, Met, Trp), 2 aminocidos tem cadeias laterais que em algumas situaes dispensam proteo (Asp, Glu) e, finalmente, em 2 aminocidos a proteo obrigatria (Lys, Cys).
Triptofano
A
sua introduo no tem mostrado dificuldades, mas a facilidade com que se oxida e a suscetibilidade alquilao em meio cido recomendam o uso de atmosfera inerte, cidos muito puros e substncias receptoras de radicais livres. A proteo mais usada para o aminogrupo indlico a formila, mas a sua remoo tambm pode levar a reaes colaterais.
A ocitocina um nonapeptdeo bastante usado durante o parto e na secreo do leite e foi um dos peptdeos que foram sntetizados com este tipo de tcnica.
at 1963 quando Marrifield publicou seu trabalho clssico sobre sntese de peptdeos em fase slida, que utilizava uma matriz (resina) insolvel qual se liga o aminocido C-terminal adicionando-se sucessivamente os outros aminocidos, sendo que apenas no final da sntese o peptdeo desejado retirado da resina.
Sntese enzimtica
Baseado
na reversibilidade de reaes
catalticas.
A primeira sntese utilizando este mtodo foi
obtida por Bergmann e Fraenkel-Conrat formando anilidas a partir do cido hiprico com anilina na presena de papana.
H necessidade de introduo e posterior
combina a biologia dos plasmdios bacterianos bioqumica das enzimas de processamento de DNA.
Utiliza todos os mtodos modernos de clonagem e expresso gnica via microorganismos modificados podendo produzir um peptdeo recombinante ou vrios deles simultaneamente.
Purificao de peptdeos
Antes que as propriedades e as atividades de
que so escolhidos levando em conta as propriedades dos peptdeos como tamanho, carga e propriedades de ligao.
Explora as diferenas de sinal e de grandeza das cargas eltricas lquidas dos peptdeos em um certo pH. A matriz da coluna um polmero sinttico contendo grupos carreados ligados. A afinidade de cada peptdeo afetada pelo pH ( determina o estado de ionizao da molcula) e a concentrao dos ons salinos livres que competem na soluo circulante.
Cromatografia de excluso
Separa os aminocidos de acordo com o
tamanho. Nesse mtodo, peptdeos grandes emergem da coluna mais cedo que os pequenos. A fase slida consiste de esferas construdas com poros ou cavidades de um tamanho particular . Os peptdeos maiores no conseguem entrar nas cavidades e realizam um trajeto curto. Peptdeos pequenos entram nas cavidades e migram pela coluna mais lentamente
HPLC
Sistemas de CLAE-FR consistem de uma fase estacionria de menor polaridade e uma fase mvel de maior polaridade, enquanto a fase normal tem as polaridades invertidas. Estas fases apresentam vrias vantagens, tais como: uso de fases mveis menos txicas e de menor custo, como metanol e gua; fases estacionrias estveis de muitos tipos diferentes; rpido equilbrio da coluna aps a mudana da fase mvel; facilidade de empregar eluio por gradiente; maior rapidez em anlises e boa reprodutibilidade dos tempos de reteno. Alm disso, so muito aplicadas separao de solutos de diferentes polaridades, massas molares e funcionalidades qumicas. Esta tcnica permite que as protenas sejam separadas mais rapidamente do que pelos mtodos convencionais e separar molculas com estruturas e tamanhos muito semelhantes, por isso uma das tcnicas mais utilizadas para purificao de protenas.
Desvantagens
Alta especificidade
Alta seletividade
Menos acumulao nos tecidos Baixa toxicidade bastante potente Possui grande diversidade biolgica e qumica
formulao de snteses de substncias peptdeosmemticas, que so molculas capazes de mostrar as mesmas atividades biolgicas e relaes estrutura-atividade como o peptdeo natural.
Imagine uma conversa entre uma molcula pequena e um peptdeo. A molcula pequena pode falar suas virtudes do tamanho pequeno, preo baixo, disponibilidade de ser utilizada de forma oral, capacidade de atravessar membranas e pode ser sintetizada diretamente. O peptdeo responderia: verdade, eu posso ser maior, mais caro para ser sintetizado e menos estvel q voc. Eu saio mias rpido do corpo e geralmente preciso ser injetado ao invs de ser engolido como uma plula, mas posso ser mais potente, tenho maior especificidade e poucos problemas de toxicologia. Eu tambm no fico acumulado nos rgos como voc faz.
C&EN, 2005;Volume 83, Number 11 pp. 17-24
relacionados com hormnios e ,portanto, eram utilizados para tratar distrbios endcrinos. Hoje, peptdeos esto sendo utilizados no desenvolvimento de medicamentos de diversas categorias , incluindo os antiinflamatrios, gastrointestinal e antiobesidade.
Concluso
Neste trabalho foram abordados os pontos de maior relevncia no desenvolvimento da sntese de peptdeos. Embora o assunto tenha j quase um sculo de evoluo, os diferentes processos de sntese ainda recebem intensa ateno nos seus aspectos qumicos, bioqumicos, farmacuticos, de biologia molecular e de automao. Este interesse est relacionado ao grande envolvimento dos peptdeos em importantes processos biolgicos, com aplicaes no diagnstico, tratamento e preveno de molstias tanto em medicina humana como veterinria.
Os mtodos de sntese de peptdeos em soluo, fase slida, por enzimas ou DNA recombinante no so mutuamente exclusivos, mas so processos que se completam e a escolha do mtodo depende do tamanho, composio e mesmo da estrutura terciria do peptdeo, alm da escala de sntese e da avaliao do custo financeiro de sua produo.
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Prncipios
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