Dra. Luz Mara Martnez. M.s.c.

Otros factores de seleccin de un mtodo analtico: Velocidad Facilidad y comodidad Habilidad del operador Costo y disponibilidad de equipo Costo por muestra CURVAS DE CALIBRACIN
Es lnea determinada por la informacin de respuesta de calibracin de un instrumento. Funcin matemtica producida por la regresin de las respuestas del detector registradas durante la calibracin de un instrumento. La funcin describe las respuestas del detector a lo largo de un rango de concentraciones y es utilizada para predecir la concentracin de una muestra desconocida, basndose en la respuesta del detector.

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Mtodo de las adiciones estndar: Curva de calibracin Se requieren varios estndares de concentraciones conocidas del analito de inters. Se requiere un blanco que contenga los componentes de la muestra original excepto el analito Se representa una grfica de respuesta del instrumento vs concentracin del analito.

Como preparar una curva de calibracin Se requieren varios estndares de concentraciones conocidas del analito de inters. Se requiere un blanco que contenga los componentes de la muestra original excepto el analito Se representa una grfica de respuesta del instrumento vs concentracin del analito. (Mtodo de mnimos cuadrados)
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Ejemplo: De lecturas de observancia de un elemento

ESTANDARES 0 3 6 9 12

ABSORVANCIA 0 0,031 0,062 0,095 0,125

CALCULOS 0 3/0,031=96,74 6/0,062=96,74 9/0,095=94,74 12/0,125=96 384,22/4=96,06*0,02=1,92ppm

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FRMULA PARA LA DETERMINACIN DEL FSFORO X= Concentracin de la muestra desconocida: M = 0.02 A = -2x10-4 B = 0.01046 r = 0.99999 Cantidad de fsforo Para representar el fosforo en % se lo realiza de la siguiente manera: F.D = = 50 %P= % P = 0.009

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Fotometra
Aspectos tericos La fotometra o "medida de la luz" es un mtodo ptico de anlisis dentro del cual se

encuentran la colorimetra y la espectrofotometra, que miden la cantidad de luz

absorbida por sustancias coloreadas o incoloras respectivamente. Longitud de onda: Es la distancia entre dos picos sucesivos de una onda. La luz que

percibe el ojo humano es la luz visible y comprende desde 400 a 700 nm. La que
contiene longitudes de onda superiores a 700 nm no es visible para el ojo y se llama infrarroja. Por debajo de 400 nm tenemos la radiacin ultravioleta (100-400 nm).

Las medidas de absorcin de luz se basan en dos leyes, la ley de Lambert y la ley de
Beer.
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COLORIMETRA

La colorimetra es la ciencia que estudia la medida de los colores y que desarrolla mtodos para la cuantificacin del color, o sea para la obtencin de valores numricos.

La colorimetra es una tcnica instrumental que tiene por objeto determinar la absorcin de luz visible por una muestra,

que puede ser una sustancia pura o bien una mezcla

Para ello se utiliza un instrumento constituido por los siguientes elementos:

Fuente de radiacin (luz blanca) Sistema dispersivo (rendijas de entrada y salida, y red de difraccin) Detector (fototubo que transforma la seal luminosa en una seal elctrica) Sistema de medida de la absorcin, una vez amplificada (convertidor analgico o digital).

Funcin de la colorimetra

Cmo un colormetro?

Los colormetros miden valores triestmulos ms directamente

espectrofotmetros y funcionan basndose en filtros de color. Por eso, los colormetros no proporcionar datos de reflectancia espectral. Sin embargo, muchas veces son preferibles a los espectrofotmetros debido a que son comparativamente ms baratos de fabricar y fciles de transportar.

Qu es CI? Las siglas CI responden al francs Commission Internationale de l'Eclairage,

es decir: Comisin Internacional de la Luz.

Qu es el observador estndar CI?

El observador estndar CI es el resultado de experimentos en los que se

pidi a los sujetos del mismo que establecieran una igualdad entre longitudes de onda monocromticas con mezclas de los tres primarios aditivos. De hecho, el observador estndar es una tabla en la que se indica cunto de cada primario necesita un observador promedio para igualar cada longitud de onda.

Ley de Beer-Lambert

La cantidad de luz que incide sobre la muestra y

pasa sobre ella es proporcional a la cantidad de tomos en el sistema.

Un colormetro.- es cualquier herramienta que identifica el color y el matiz para una medida ms objetiva del color. El colormetro tambin es un instrumento que permite la absorbancia de una solucin en una especfica frecuencia de luz a ser determinada. Es por eso, que hacen posible descubrir la concentracin de un soluto conocido que sea proporcional a la absorbancia. Diferentes sustancias qumicas absorben diferentes frecuencias de luz. Los colormetros se basan en el principio de que la absorbancia de una sustancia es proporcional a su concentracin, y es por eso que las sustancias ms

concentradas muestran una lectura ms elevada de absorbancia. Se usa un

filtro en el colormetro para elegir el color de luz que ms absorber el soluto, para maximizar la precisin de la lectura.

Note que el color de luz absorbida es lo opuesto del color del espcimen, por lo tanto un filtro azul sera apropiado para una sustancia naranja. Los sensores miden la cantidad de luz que atraves la solucin, comparando la cantidad entrante y la lectura de la cantidad absorbida. Se realiza una serie

de soluciones de concentraciones conocidas de la sustancia qumica en

estudio y se mide la absorbancia para cada concentracin, as se obtiene una grfica de absorbancia respecto a concentracin. Por extrapolacin de la absorbancia en la grfica se puede encontrar el valor de la concentracin desconocida de la muestra

El objeto de la colorimetra

Es expresar los colores y sus atributos perceptuales mediante nmeros. Para conseguirlo, es necesario establecer una correlacin entre los distintos atributos perceptuales del color y las magnitudes de la

radiacin visible.
Diagrama de la absorcin de un haz de luz atravesando una cubeta de

tamao l.

Esto se puede expresar de distintas maneras: La absorbancia (A) es un concepto ms relacionado con la muestra puesto que nos indica la cantidad de luz absorbida por la misma. (o absorbencia) La transmitancia (T) de una sustancia en solucin es la relacin entre la cantidad de luz transmitida que llega al detector una vez que ha atravesado la muestra, It, y la cantidad de luz que incidi sobre ella. I0 es la intensidad de la luz incidente

I1 es la intensidad de la luz una vez ha atravesado el medio

l es la distancia que la luz atraviesa por el cuerpo c es la concentracin de sustancia absorbente en el medio es la longitud de onda del haz de luz

Mxima absorbancia de un elemento

Para hallar la mxima absorvancia de un elemento se debe ubicar la celda y determinar la longitud de onda donde el elemento presente la mxima lectura de absorvancaia

Curvas de calibracin
Aplicando la ecuacin a+bx Mtodo de laboratorio

Forma de operar el colormetro

Encender esperar 20 minutos para que se caliente la lmpara. Ubicar la longitud de onda del elemento que se va a determinar Calibrar en 0 absorbancia y 100 de transmitancia o viceversa Leer el estndar 0 y luego los que se han preparado para la curva

Tomar los datos anteriores y determinar los valores de ab. y r los que nos
servirn para calcular la concentracin de la muestra desconocida Aplicar el mtodo de laboratorio Comparar

Equipos de colorimetra.

SPECTRONIC 21D

VISTA SUPERIOR DEL COLORMETRO

REGULADOR DE LA LONGITUD DE ONDA

CELDA DONDE SE COLOCA LA MUESTRA

PANTALLA PARA LEER ABSORBANCIA Y TRANSMITANCIA

Aplicacin de la colorimetra
Colorimetra se utiliza en qumica y en otros tipos de lugares como en sectores como la impresin en color, produccin textil, la fabricacin de pintura y en la industria alimentaria. Bajo la accin de agentes qumicos, muestras de desarrollar un determinado color que muestra la concentracin de la sustancia ensayada. Colorimetra es slo uno de los tipos de tcnicas de anlisis fotomtrico es

decir, es una manera de medir la luz.

Instrumentos. Representamos de forma esquemtica los componentes bsicos de fotmetros y espectrofotmetros. Componentes bsicos de fotmetros y espectrofotmetros de UV-VIS e IR.

Esquema de espectrofotmetro.

Fuente luminosa
Hemos usado una lmpara halgena de 50 W a 12 V, alimentada por el correspondiente transformador. Estos elementos se pueden encontrar en cualquier ferretera o tienda de electricidad. La lmpara con su soporte cuesta unos 2 y el transformador, que es la pieza ms cara,

cuesta unos 15 . Quiz tengas alguno en tu casa que te sobre.

Rendija
La lmpara va montada sobre media lata. El soporte de la lmpara se pega a la lata mediante un pegamento que es una pasta que se puede moldear y que endurece al cabo de una hora. Una vez pegado, resiste altas temperaturas. La rendija tambin se fabrica con un poco de hoja de lata.

La anchura es un compromiso, pues conviene un haz estrecho, pero no

tanto que deje pasar poca luz. Un par de milmetros o menos est bien.

Monocromador

El monocromador sirve para seleccionar un color. En efecto, la luz blanca

contiene todos los colores del arco iris, y un dispositivo capaz de descomponerla se denomina monocromador. En los colormetros el monocromador es simplemente un filtro, por lo que hay que cambiar de filtro segn lo que se quiera analizar. En los espectrofotmetros el monocromador permite seleccionar cualquier longitud de onda, y, de hecho, se puede obtener el espectro de absorcin de una disolucin

Muestra, Rejilla y Detector La muestra se coloca en una cubeta. Justo delante hay una rendija hecha

en una cartulina negra. Esta rendija conviene que sea lo ms estrecha

posible (menos de 1 mm) para que la luz que penetre sea lo ms monocromtica posible. La luz atraviesa la disolucin y parte de su energa es absorbida. El resto de la luz llega a un detector que se encuentra justamente detrs de la cubeta. Como detector hemos usado un a fotorresistencia (que cuesta algo ms de 1 en las tiendas de electrnica).

Una fotorresistencia es una resistencia cuyo valor depende de la luz incidente. Cuanta ms luz le llegue, ms resistencia opone al paso de la corriente. La fotorresistencia est conectada a un polmetro que mide directamente el valor de la resistencia. Este valor de la resistencia depende del color de la disolucin, que a su vez depende de su concentracin. La concentracin de una disolucin se puede determinar haciendo previamente un calibrado con disoluciones cuya concentracin se conoce.

Dra. Luz Mara Martnez. M.s.c.

GRACIAS

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