Citometra de flujo.

Citometra de flujo.

Citometra de flujo.

MHC.

MHC.

Microcitotoxicidad.

Interpretacin del ensayo.

Nmero de alelos del MHC (HLA).

Asociacin de HLA con enfermedades.

Toxicodinamia.
Una vez que el xenobitico encuentra su rgano blanco, se pueden presentar los efectos txicos (toxicodinamia). Lesin celular. Muerte celular. Apoptosis. Necrosis.

Apoptosis.
Es un proceso de muerte celular programada, que ocurre en organismos multicelulares. Se inducen eventos bioqumicos que conducen a cambios morfolgicos celulares y llevan a la clula a la muerte.

Necrosis
Es una forma de muerte celular traumtica, no programada, que resulta de un dao celular agudo.

Apoptosis vs necrosis.

Cambios morfolgicos en apoptosis.

Cambios en la membrana celular: Prdida de la asimetra de la membrana, la clula se ve arrugada, Blebbing (ampollas o bolitas). Fragmentacin nuclear, condensacin de cromatina (picnosis), y fragmentacin de DNA (cariorrexis), la actividad de endonucleasas rompe en fragmentos el DNA. (patrn de laddering) que

Linfocito con cuerpos apoptoticos (D).

Cuerpos apoptticos.

Apoptosis.
A diferencia de la muerte celular por necrosis causada por traumatismo, donde se observan rompimiento de membranas, en la apoptosis ocurre un arrugamiento y fragmentacin de la clula y esto permite que la clulas sean fagocitadas y sus componentes reusados sin liberar sustancias peligrosas como enzimas hidrolticas en los tejidos adyacentes.

Patrn morfolgico de apoptosis.

Apoptosis.

Clasificacin de caspasas.

Tincin de DNA.

Apoptosis.

Proceso de apoptosis.
Inductores extrinsecos: txicos, hormonas, factores de crecimiento, oxido ntrico y citocinas. La seal puede ser positiva o negativa. (IL-6 es positiva y la IL-10 es negativa). Inductores intrinsecos. En respuesta a un estresante como: la unin de glucocorticoides a los receptores del ncleo, calor, radiacin, limitacin de nutrientes, infeccin viral, hipoxia y aumento intracelular del calcio.

Homeostasis.
Despus de la activacin de la apoptosis va TNF-R1 y FAS en clulas de mamiferos ocurre un balance entre las protenas proapoptticas y las anti-apoptticas. Pro-apoptticas. BAX, BID, BAK, o BAD Protena P53. Anti-apoptticas. BCL-X1 y BCl-2.

Protena P53.
La protena P53 supresora de tumor, se produce cuando el DNA se daa. Los interferones y inducen la transcripcin del gen de protena P53 lo que da como resultado un aumento en los niveles de la P53 y se facilita la apoptosis de las clulas tumorales. P53 detiene el ciclo celular a nivel de G1 (interfase), dando tiempo a que el DNA se

Apoptosis por HIV.

Las enzimas de HIV inactivan la protena BCL-2 anti apopttica y esas enzimas activan a las protenas proapoptticas pro-caspasa 8 que al activarse lleva a la mitocondria a el proceso de apoptosis. Algunos virus lisognicos inhiben la apoptosis generan homologos de BCL-2 que inhiben las protenas proapoptoticas BAX y BAK. V.gr. El virus Epstein-Barr.

Apoptosis.
La mitocondria es esencial para que la clula viva, sin la respiracin aerbica la clula muere. Muchas protenas apoptticas tienen de blanco a la mitocondria causando hinchazn en sta, debido a la formacin de poros en la membrana (perforinas) o aumentando la permeabilidad de la membrana. V.gr. El oxido ntrico disipa el potencial de membrana de la mitocondria y la hace mas permeable.

Apoptosis.
Protenas de la mitocondria conocidas como SMAC (second mitochondria-derived activator of caspases), la liberacin al citosol se une a IAPs ( inhibitor of apoptosis proteins) y la apoptosis se presenta. IAPs suprime la actividad de cistein proteasas (caspasas) las cuales llevan a cabo la degradacin de las clulas.

Apoptosis.
El citocromo C se libera de la mitocondria debido a la formacin de canales MAC. Una vez que se libera el citocromo c se une a Apaf-1 y al ATP los cuales se unen a la procaspasa 9 a ste complejo se le llama apoptosoma se forma la caspasa 9 y esta activa al efector de la caspasa-3.

Va intrnseca mitocondrial.

Apoptosis directa.
Dos mecanismos de la apoptosis directa. La induccin del modelo TNF. Citocina producida principalmente por los macrfagos y linfocitos Th1. Fas (Apo-1, CD95) que se une al ligando de fas, linfocitos T citotxicos CD8, NK, LAK.

Apoptosis directa inducida por TNF.

Clulas T citotxicas.

Vas de apoptosis.

Homeostasis.
En un adulto el nmero de clulas se mantiene constante entre clulas muertas y la proliferacin (homeostasis). La homeostasis se puede romper cuando: Las clulas se dividen mas rpido que las que se mueren y originan tumores. Las clulas se dividen mas lento que

Homeostasis.
En un adulto mueren al da entre 5070 billones de clulas, mientras que en los nios de entre 8-14 aos aproximadamente son 20-30 billones de clulas muertas al da.

Importancia de apoptosis.
Durante la vida de un organismo en la etapa embrionaria, interviene de manera muy importante en la topobiologa del embrin. Por ejemplo, ayuda a separar los dedos de los pies que en el ratn se terminan de formar hasta los 27 das.

Participacin de la apoptosis en la topobiologa.

Pata de embrin de ratn de 15.5 das.

Pie de un adulto, donde no se present la apoptosis.

Importancia de apoptosis.
Una excesiva apoptosis causa hipotrofia, como ocurre en el dao isqumico. Mientras que una apoptosis insuficiente nos trae como resultado una proliferacin incontrolada de clulas como ocurre en el cncer.

Importancia de apoptosis.
La apoptosis puede ocurrir cuando: la clula es infectada por un virus, bajo estrs severo como la inanicin, dao al DNA mediante txicos o radiaciones, va la accin de genes supresores de tumor v.gr. protena P53. La decisin de apoptosis puede venir de la misma clula, del tejido que la rodea o por accin de clulas del sistema inmune.

Importancia de apoptosis.
La apoptosis previene el cncer . Si una clula es incapaz de someterse a la apoptosis debido a una mutacin o inhibicin bioqumica, sta continua en divisin y se desarrolla un tumor. Un ejemplo la infeccin de los papillomavirus donde un producto de un gen viral interfiere con la protena P53, un importante miembro de la va de apoptosis, sta interferencia juega un papel muy importante en el desarrollo de cncer

Carcingenos.

Caractersticas de las clulas tumorales.

Incapacidad de reaccionar a seales regulatorias. Crecimiento autnomo, no requieren factores de crecimiento celular. No presentan inhibicin por contacto. La misma idiferenciacin les permite la invasin a otros tejidos y la produccin de metastasis.

Caractersticas de las clulas tumorales.

Poliploidias. Origen monoclonal. Ausencia de apoptosis. Diferencia en apariencia y presentan despliegue antignico en membranas, en relacin a tejidos sanos.

Etiologa tumoral.
Agentes qumicos. Agentes fsicos. Oncovirus.

Cancergenos qumicos.

Cancergenos qumicos.

Etiologa tumoral. Agentes qumicos.

Percival Pott deshollinadores de chimeneas. Actividad asociada a carcinoma de escroto y nasal. Antracenos y metilcolantreno. Trabajadores de las fabricas productoras de colorantes de anilina. Aminas aromticas, asociadas a cncer de vejiga. Plaguicidas. Aumentan la actividad microsomal en hgado. Los precarcingenos se convierten en carcingenos.

Etiologa tumoral. Agentes fsicos.

Radilogos y cncer de piel. Bombas atmicas en Japn, los sobrevivientes mostraron un incremento en la incidencia de diversos tipo de cncer, an 20 aos despus. La radiacin ionizante, ocasiona mutaciones del DNA. Existen mecanismos reparadores, que estn ausentes en individuos con

 Virus del papiloma humano. Asociado a carcinomas cervico-uterino, ano-genital, farngeo, esofgico y de piel. Serotipos asociados. 16, 18,31,33,35,39. Herpes virus. Epstein Barr, asociado a linfoma de Burkitt, enfermedad de Hodking y carcinoma nasofarngeo. Herpes tipo 8 asociado con sarcoma de Kaposi. Adenovirus. No se han asociado a tumores en humanos; pero si en animales como hamsters.

Etiologa tumoral. Oncognia viral. Virus DNA.

Interaccin entre virus tumoral DNA y clulas.

 HTLV I y II. Endmico en algunas reas del sur de Japn. Virus de la leucemia felina. La transmisin se da de modo horizontal, de individuo infectado a sano. En la transmisin, con el HTLV I y II ocurre lo mismo. Virus de la coriomeningitis linfoctica en roedores. Virus de la leucemia aviar.

Etiologa tumoral. Oncognia viral Virus RNA (retrovirus).

Interaccin de retrovirus con clulas.

Antgenos asociados a tumor

Alfa feto protena. Es producida en la etapa fetal en saco vitelino e hgado. Se eleva en hepatomas primarios, en cncer de clulas germinales. Se usa como marcador del estado de la enfermedad. Antgeno carcinoembrionario (CEA), glucoprotena que se produce en intestino fetal. Se eleva en cncer de colon, en colitis y pancreatitis.

Antgenos asociados a tumor

Antgeno comn de leucemia linfoctica (CALLA) CD10. Presente en clulas de la leucemia humana, y en clulas renales y leucocitos.

Antgenos especficos de tumor.

ras y P53, en cncer de colon y mama. bcr-abl, en leucemia mielognica crnica. P161NK4 y CDK4, en melanoma. Her-2/Neu en los cnceres ovrico y mamario.

Carcingenos.
Inhalados: asbestos, dioxinas y fumado de tabaco (benzopireno, nitrosonornicotina). Benceno, Kepone (clorinado ciclico), asbestos, formaldehdo, cloruro de vinilo PVC, gas mostaza. Carcingenos naturales: Aflatoxina B1, producida por Aspergillus flavus. Virus hepatitis B, virus de papiloma

Carcingenos.
Co-carcingenos. Son qumicos que no necesariamente causan cncer per se sino que promueven la actividad de otros carcingenos. Una vez que entran al cuerpo se biotransforman. Benzopireno se convierte en epxido por las enzimas y se une al DNA en forma permanente. El mismo mecanismo se da en aflatoxinas, gas mostaza y hidrocarbonos aromticos.

Carcingenos.
Productos de pirolisis. Metil colantreno, antracenos, anilinas que generan grupos epxidos los cuales se unen al DNA. El humo de tabaco contienen mas de 4000 compuestos qumicos, muchos de ellos carcingenos y otros txicos.

Carcingenos.
Ruptura del ciclo circadiano. Se ha documentado el incremento en cncer en personal que trabaja en la noche, debido a la baja de sntesis de melatonina.

MECANISMOS DE CARCINOGNESIS.
Carcingenos pueden ser: Genotxicos. Dao gentico o mutaciones al unirse al DNA. Qumicos v.gr. N nitroso-N metil urea. O fsicos como las radiaciones, ciertos virus. No-genotxicos. No afectan directamente al DNA; pero promueven crecimiento. V.gr. Hormonas y otros compuestos

Agencia internacional de investigacin en cncer (IARC), los agrupa en 4 categoras. 1.Carcinognico en humano 2A. Probablemente carcingeno en humano. 2B. Posible carcingeno en humano. 3.No est clasificado como carcingeno en humano. 4.Probablemente no es carcingeno al humano.

Clasificacin de los carcingenos vara de acuerdo al sistema usado.

Conferencia Americana Gubernamental de Higiene Industrial (ACGIH). 1. Confirmado es carcingeno en humano 2. sospechoso de producir cncer en humanos. 3. carcingeno en animales, se desconoce en humanos. 4. No clasificado como carcingeno en humano 5. No se sospecha que sea carcingeno

Clasificacin de los carcingenos vara de acuerdo al sistema usado.

Unin Europea. 1. se conoce que es carcingeno en humanos. 2. Sustancia que pudiera ser carcingeno en humano. 3. Sustancia que no se ha probado que sea carcingeno en humano.

Clasificacin de los carcingenos vara de acuerdo al sistema usado.

Procarcingenos.
Nitritos. Tomados en la dieta, los cuales se convierten en nitrosaminas dentro del cuerpo, las cuales tienen actividad carcinognicas.

Causas de cncer en humanos.

Carcingenos ocupacionales.

Carcingenos ocupacionales.

Carcingenos ocupacionales.

Carcingenos ocupacionales.

Carcingenos ocupacionales.
Others Gasoline (contains aromatics). Lead and its compounds. Alkylating antineoplastic agents (chemotherapy) Other alkylating agents (e.g. dimethyl sulfate) Ultraviolet radiation from the sun and UV lamps. Other ionizing radiation (X-rays, gamma

Etiologa tumoral. Induccin de tumores con agentes qumicos. G. Klein

Etiologa tumoral. Induccin de tumores con virus. Sjgren.

Teratognesis.
Teratologa. Teratos monstruo o maravilla y logos. Malformaciones congnitas. Malformaciones en el recin nacido pueden ocurrir en 3-5% de todos los recin nacidos. Puede ser la causa de mortalidad infantil en mas de un 20% en todos los infantes. Aproximadamente el 65% no se conoce la causa.

Principios de teratologa de Jim Wilson.

1. Susceptibilidad a teratognesis. Depende de como el genotipo interacta con los factores ambientales adversos. 2. Susceptibilidad vara con el estado de desarrollo. 3. El agente teratognico acta de manera especfica sobre el desarrollo de clulas y tejidos iniciando la secuencia de anormalidades.

Principios de teratologa de Jim Wilson.

4. El acceso de la influencia adversa depender de la ruta y grado de exposicin materna, paso por placenta y absorcin sistmica. 5. Son 4 las manifestaciones de la desviacin del desarrollo (muerte, malformacin, retardo en el crecimiento y defectos funcionales). 6. Las manifestaciones depender de la frecuencia y grado de dosis. El espectro va desde efecto no observables hasta el 100% de letalidad LD100%.

Teratogenesis.
Despus del desastre de la talidomida en los 1960, se observ en humanos su alta actividad teratognica, no se observa actividad teratognica en ratas; sin embargo en ratas la aspirina es teratognica y en humanos no se ha encontrado ese efecto.

Agentes teratognicos.

Drugs and environmental chemicals: drinking alcohol (ethanol), 13-cis-retinoic acid, isotretinoin (Accutane), temazepam (Restoril; Normisson), nitrazepam (Mogadon), nimetazepam (Ermin), aminopterin, androgenic hormones, busulfan, captopril, enalapril, chlorobiphenyls (PCBs), Dioxin, coumarin, cyclophosphamide, diethylstilbestrol, diphenylhydantoin (Phenytoin, Dilantin, Epanutin , ethidium bromide, etretinate ,hexachlorobenzene hexachlorophene, lithium, methimazole, organic mercury, penicillamine, tetracyclines, thalidomide, trimethadione, uranium, methoxyethyl ethers, Flusilazole, valproic acid, and many

Agentes teratognicos.
Ionizing radiation: atomic weapons, radioiodine, radiation therapy Infections: cytomegalovirus, herpes virus, parvovirus B-19, rubella virus (German measles), syphilis, toxoplasmosis, Venezuelan equine encephalitis virus .

Agentes teratognicos.
Metabolic imbalance: alcoholism, endemic cretinism, diabetes, folic acid deficiency, iodine deficiency, hyperthermia, phenylketonuria, rheumatic disease and congenital heart block, virilizing tumors Tobacco, Alcohol, and Caffeine: Smoking, Alcohol use, and consumption of caffeine.

Agentes teratognicos.
Teratogenic outcomes Exposure to teratogens can result in a wide range of structural abnormalities such as cleft lip, cleft palate, dysmelia, anencephaly, ventricular septal defect. Exposure to a single agent can produce various abnormalities depending on the stage of development it occurs. Specific birth defects are not