Тематический выпуск «Российский научный форум на Урале» 717

ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ДИПЕПТИДА

ГЛУТАМИЛ-ТРИПТОФАНА ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ
АТРОФИЧЕСКОМ ГАСТРИТЕ

Савельев С. А., Петленко С. В., Дурнова А. О.1, Малинин В. В.

ЗАО «МБНПК Цитомед»; 1ФГБУ «НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта»

СЗО РАМН, Санкт-Петербург, Россия

Изучены гастропротекторные свойства дипептида глутамил-триптофана и его потен-

циальная эффективность при заболеваниях желудка, связанных с атрофическими измене-
ниями и метаплазией слизистой оболочки. Показана стимулирующая роль дипептида в от-
ношении сигнальных молекул, участвующих в регуляции секреции желудочно-кишечного
тракта, а также в дифференцировке и пролиферации клеток эпителия желудка. С другой
стороны, выработка молекул, ответственных за малигнизацию желудка, ингибировалась
глутамил-триптофаном. Показано также, что дипептид способен нормализовывать рН
желудка при гипоацидных состояних, возможно, за счет усиления экспрессии гастрина.
Полученные данные позволяют рассматривать глутамил-триптофан в качестве перспек-
тивного средства для лечения хронического атрофического гастрита.
Ключевые слова: хронический атрофический гастрит, глутамил-триптофан, дипептид,
гастропротекторная активность

В ряду различных патологических изме-
нений слизистой оболочки желудка (СОЖ)
атрофический гастрит (АГ) занимает особое
место, поскольку не только значительно ухуд-
шает качество жизни больного, но и является
серьезным фактором риска развития карцино-
мы желудка. Предраковый статус АГ обуслов-
лен прогрессирующим воспалительным про-
цессом в СОЖ, сопровождающимся кишечной
метаплазией, дисплазией и гиперпролифера-
цией эпителия слизистой желудка [3] с одно-
временным уменьшением числа железистых
клеток и замещением их фиброзной тканью.
При этом в результате гипосекреции соляной
кислоты и пепсиногена нарушается процесс
пищеварения и возникает целый спектр дис-
пептических симптомов, ведущих к инвали-
дизации (от чувства дискомфорта после при-
ема пищи, отрыжки воздухом и метеоризма
до регулярных запоров сменяющихся диареей,
ухудшения общего состояния, потери массы
тела, болевого синдрома и анемии вследствие
нарушения всасывания витамина В12).
Хроническим АГ страдают до трети всего
взрослого населения, причем риск развития
данного заболевания возрастает экпоненци-
ально в зависимости от возраста и выявляет-
ся в 70% случаев у пациентов старше 50 лет.
РОССИЙСКИЙ ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, 2014, том 8 (17), №3
Из них 80–90% составляют случаи АГ, ассоци-
ированного с инфекцией Helicobacter pylori.
Существующие методы лечения хрониче-
ского АГ ограничиваются эрадикацией и дие-
тотерапией, а также стимулирующей и замести-
тельной терапией, которая назначается с целью
компенсации секреторной недостаточности.
По причине сложной нозологии и отсутствия
адекватных методов лечения, актуальной
и приоритетной задачей современной фарма-
котерапии является разработка новых препа-
ратов для лечения хронического АГ и пред-
упреждения развития рака желудка. Одним
из перспективных направлений является ис-
пользование препаратов пептидной природы,
регулирующих структурно-функциональную
организацию эпителия желудка. Таким препа-
ратом, в частности, может служить синтети-
ческий дипептид глутамил-триптофан. Ранее,
на моделях индометацин-индуцированной
язвы желудка и водного иммерсионного
стресса у крыс было показано гастропротек-
торное действие этого пептида, как при про-
филактической, так и при лечебной схеме при-
ема препарата [2]. В основе терапевтической
эффективности глутамил-триптофана лежит
его цитопротекторное, противовоспалитель-
ное, антиоксидантное и иммуномодулирую-
718
щее действие на СОЖ [1, 2]. В частности, про-
филактический прием глутамил-триптофана
per os снижал уровень конечного продукта
перекисного окисления липидов малоново-
го диальдегида в сыворотке крови на 140%
и повышал активность фермента эндоген-
ной антиоксидантной системы супероксид-
дисмутазы в 1,6 раза [2]. Однако оставалось
не выясненным эффективен ли препарат при
заболеваниях желудка, характеризующихся
гипоацидными состояниями и если да, то ка-
кие механизмы могли бы лежать в основе его
действия. С этой целью был проведен ряд экс-
периментов по изучению влияния глутамил-
триптофана на функциональную активность
СОЖ, а также на экспрессию ряда сигнальных
молекул, продуцируемых клетками ЖКТ.
Для выявления воздействия глутамил-
триптофана на секрецию соляной кислоты
клетками СОЖ был проведен in vivo экспери-
мент на модели острого рефлюксного гастри-
та у крыс. С этой целью животным в течение
14 дней внутрижелудочно вводили консерви-
рованную желчь крупного рогатого скота в дозе
10 мл/кг. Затем в течение следующих 14 дней
осуществляли пероральное введение глутамил-
триптофана в дозе 10 и 100 мкг/кг по лечебной
схеме. На 29 сутки от начала моделирования
гастрита животных подвергали эвтаназии, же-
лудок извлекали и измеряли рН СОЖ.
Для подтверждения гастропротектор-
ных свойств глутамил-триптофана при хро-
ническом АГ разной степени тяжести был
проведен in vitro эксперимент на клеточных
культурах, полученных из биоптатов СОЖ
здорового человека и пациентов с АГ с на-
личием или отсутствием метаплазии. Клет-
ки культивировались в культуральной среде,
содержащей 87,5% DMEM, 10% эмбриональ-
ной бычьей сыворотки, 1,5% НЕРЕS, 1% PES,
L-глутамин и 4500 мг/л D-глюкозы. Пассиро-
вание производилось через 3 дня, когда куль-
тура достигала состояние монослоя. Куль-
тивирование проводилось до 7 пассажа. При
этом на 3 и 7 пассаже клетки были рассеяны
на планшет, и было произведено имуноцито-
химическое окрашивание в сочетании с кон-
фокальной микроскопией. Исследовали влия-
ние глутамил-триптофана (0,2; 2 и 20 мкг/мл)
на уровень экспрессии гастрина (стимулятор
секреции соляной кислоты), серотонина (ре-
гулятор моторики и секреции в ЖКТ), кис-
спептина (ингибитор пролиферации клеток
РОССИЙСКИЙ ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, 2014, том 8 (17), №3
Иммунофармакология
при малигнизации желудка), хромогранина
А (маркер опухолей нейроэндокринного про-
исхождения), транскрипционного фактора
CXCL12 (участвует в процессах клеточной
дифференцировки и пролиферации) и гомео-
боксного белка CDX2 (маркер кишечной мета-
плазии желудка).
Результаты проведенных исследований сви-
детельствуют о гастропротекторном действии
глутамил-триптофана. В частности, значение
рН СОЖ крыс после моделирования у них
острого рефлюксного гастрита, поднявшееся
с 2,13±0,12 (норма) до 3,74±0,25, было скоррек-
тировано терапией глутамил-триптофаном
в дозе 100 мкг/кг до уровня 2,83±0,25 (р≤0,05).
Этот эффект имеет большое клиническое значе-
ние при лечении АГ, поскольку одним из глав-
ных симптомов при данном заболевании явля-
ется гипосекреция соляной кислоты.
Эксперименты in vitro на культурах био-
птатов СОЖ выявили регуляторные эффек-
ты глутамил-триптофана, стабилизирующие
функциональную активность клеток, пре-
пятствуя развитию атрофических изменений
и метаплазии СОЖ. Наибольшую эффектив-
ность при этом имел дипептид в дозе 20 мкг/ мл
на 3 пассаже, что проявлялось в стимуляции
секреции гастрина в 2 и 1,5 раза в группе АГ
и АГ + метаплазия соответственно, увеличение
экспрессии хромогранина А в 1,6 раз в группе
АГ, кисспептина в 2 и 2,8 раз в группе АГ и АГ +
метаплазия соответственно, а также CXCL12
в 2 раза в группе АГ по сравнению со здоровым
эпителием. При этом площадь экспрессии CDX2
уменьшалась в 1,8 раз относительно контроля
в группе АГ + метаплазия, что свидетельствует
об антиметапластическом действии глутамил-
триптофана. Возможно также, что найден-
ный нами положительный эффект дипептида
в отношении рН желудка в модели острого
рефлюксного гастрита объясняется стиму-
лирующим действием глутамил-триптофана
на секрецию гастрина, ответственного за вы-
работку соляной кислоты. Интересно, что ди-
пептид проявляет свои эффекты только на сли-
зистой желудка с атрофией и/или метаплазией,
не воздействуя на здоровые клетки в культуре
нормальной СОЖ. Это свидетельствует об из-
бирательном биорегуляторном характере дей-
ствия препарата.
Важной особенностью данного экспери-
мента были выявленные эффекты глутамил-
триптофана в дозе 20 мкг/мл на 7 пассаже
Тематический выпуск «Российский научный форум на Урале» 719

в группе АГ + метаплазия: увеличение экс- ротонин, а также стимуляции экспрессии

прессии гастрина и CXCL12 и уменьшение
экспрессии CDX2, а также в группе нормаль-
ного эпителия: увеличение экспрессии серо-
тонина, хромогранина А и кисспептина. Этот
эффект имеет большое биологическое и при-
кладное значение, поскольку стареющие
культуры менее чувствительны к сигналам,
метаболические процессы в них замедленны
и экспрессии веществ находятся на низком
уровне. Стимуляция синтеза гормонов или
маркеров клеточной дифференцировки го-
ворит о положительном действии дипептида
на клеточное старение.
Таким образом, глутамил-триптофан спо-
собствует уменьшению атрофических, де-
структивных и метапластических изменений
СОЖ, в том числе посредством стимуляции
функциональной активности эндокринных
клеток СОЖ, продуцирующих гастрин и се-
транскрипционного фактора CXCL12, хро-
могранина А, кисспептина и подавлении экс-
прессии CDX2.
Полученные данные по гастропротектор-
ному действию глутамил-триптофана в сово-
купности с доказанным отсутствием токсич-
ности и возможностью перорального приема
позволяют рассматривать данное вещество
в качестве перспективного средства для лече-
ния хронического атрофического гастрита.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Клиническая фармакология тимогена. Под ред.
В. С. Смирнов. СПб: ФАРМиндекс 2004, 172 с.
2. Саватеева-Любимова Т.Н., Сивак К. В., Мали-
нин В. В. Экспериментальная и клиническая
фармакология 2012, 75 (2), 17-21.
3. Sipponen P., Graham D. Y. Scand J Gastroenterol.
2007, 42 (1), 2–10.

PROSPECTS FOR THE USE OF DIPEPTIDE

GLUTAMYL-TRYPTOPHAN IN CHRONIC ATROPHIC GASTRITIS
Savelyev S. A., Petlenko S. V., Durnova A. O.1, Malinin V. V.
Medical-Biological Research-Industrial Complex CYTOMED; 1Research Institute of Obstetrics
and Gynecology behalf DO Ott “RAMS, St. Petersburg, Russia

Gastroprotective activity of dipeptide glutamyl-tryptophan along with its potential efficacy in gastro-
intestinal disorders, associated with atrophic and metaplastic changes in gastric mucosa were investigated.
It was shown that expressions of signal molecules responsible for secretory functions of the gastrointes-
tinal tract, gastric cell proliferation and differentiation were stimulated, whereas expressions of signal
molecules involved in malignization processes were suppressed by glutamyl-tryptophan. It was found that
investigated dipeptide caused nolmalisation of pH in stomach with acid deficiency most likely by means
of stimulation of gastrin expression. The results strongly suggest glutamyl-tryptophan as a promising drug
for the treatment of chronic atrophic gastritis.

Key words: chronic atrophic gastritis, glutamyl-tryptophan, dipeptide, gastroprotective

activity

РОССИЙСКИЙ ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, 2014, том 8 (17), №3