Вы находитесь на странице: 1из 6

ХИМИЯ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ. 2010. №2. С. 153–158.

УДК 541.64:547.97

ИЗВЛЕЧЕНИЕ НАТУРАЛЬНЫХ КРАСИТЕЛЕЙ ГИДРОФИЛЬНЫМИ


ПОЛИМЕРАМИ

© Е.В. Чурилина1, Я.И. Коренман1, П.Т. Суханов1*, В.М. Болотов1, Г.В. Шаталов2
1
Воронежская государственная технологическая академия, пр. Революции, 19,
Воронеж, 394036 (Россия) E-mail: post@vgta.vrn.ru
2
Воронежский государственный университет, Университетская площадь, 1,
Воронеж, 394693 (Россия)

Для извлечения и концентрирования природных антоцианового и каротиноидного красителей впервые применена


экстракция гидрофильными полимерами. Исследовано влияние природы полимера и соли, рН, присутствия алифатиче-
ских спиртов на эффективность извлечения красителей из водно-солевых растворов и растительного сырья.
Ключевые слова: экстракция, натуральные красители, гидрофильные полимеры.
Работа выполнена в рамках Федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры
инновационной России» на 2009-2013 гг.

Введение
Применяемые в современной пищевой, косметической и фармацевтической промышленности синтетиче-
ские красители участвуют в канцерогенезе. Природные антоциановые красители – соединения фенольного
типа с высокой биологической и антиоксидантной активностью. Антоцианы выделяются из растительного
пищевого сырья и вместе с другими веществами повышают ценность окрашиваемого продукта, придают ему
вкус и аромат [1, 2], характеризуются противовоспалительными и противомутагенными свойствами, обеспечи-
вают кардиозащиту, улучшают проницаемость сосудов. Антоциановые красители из выжимок черноплодной
рябины и черной смородины бактерицидны и при добавлении в консервы угнетают микрофлору продуктов [3].
Каротиноиды – природные органические пигменты, фотосинтезируемые бактериями, грибами, водорос-
лями и высшими растениями. Идентифицировано около 600 каротиноидов. Они имеют преимущественно
желтый, оранжевый или красный цвет, по строению это циклические или ациклические изопреноиды [2].
Каротины нерастворимы в воде, но растворяются в органических растворителях, содержатся в листьях
всех растений, а также в корнеплодах моркови, плодах шиповника и др., являются провитамином витами-
на А. Каротины зарегистрированы в качестве пищевой добавки Е160a.
Создание новых и совершенствование известных способов извлечения и концентрирования природных
красящих веществ – актуальная технологическая проблема. Известные способы концентрирования нату-
ральных антоциановых и каротиноидных красителей основаны на многократной экстракции органическими
растворителями [4].
Cистемы на основе водорастворимых поли-N-винилкапролактама (ПВК), поли-N-винилпирролидона
(ПВП), полиэтиленгликолей (ПЭГ) применяются в биотехнологии. Основные преимущества таких полиме-
ров – нетоксичность, высокая гидрофильность, способность к комплексообразованию со многими органиче-
скими и биологическими объектами [5–7]. Новые экстракционные системы на основе ПВК, ПВП и ПЭГ эко-
логически безопасны, не содержат токсичных растворителей. Их применение расширяет возможности экс-
тракционных методов извлечения и концентрирования натуральных красителей. Экстракция антоциановых
и каротиноидных красителей из водных растворов и растительного сырья в системах, содержащих гидро-
фильные полимеры, ранее не изучалась.

*
Автор, с которым следует вести переписку.
154 Е.В. ЧУРИЛИНА, Я.И. КОРЕНМАН, П.Т. СУХАНОВ, В.М. БОЛОТОВ, Г.В. ШАТАЛОВ

Цель работы – установление закономерностей экстракционного извлечения натуральных красителей из


водных сред и растительного сырья с применением гидрофильных полимеров.

Экспериментальная часть
Препараты антоцианового красителя получали экстракцией этанолом при 50–55 °С из ягод черной смо-
родины по известной методике [8].
Препарат каротиноидного красителя извлекали из растительного сырья (корнеплодов моркови красной
посевной Daucus sativus).
Применяли ПВП медицинского назначения с молекулярной массой Мω = 1∙104 и ПЭГ производства фир-
мы «Loba Chemie» с молекулярной массой Мω = 5,0103.
Поли-N-винилкапролактамы получали радикальной полимеризацией по известной методике [9]. Синте-
зировали препараты ПВК с молекулярными массами 1∙104; 6∙104 и 16∙104.
Структурные звенья полимеров представлены в таблице 1.
В качестве высаливателей применяли NaCl,
Таблица 1. Структурные звенья изученных полимеров (NH4)2SO4 и Na2SO4 квалификации х.ч., двух-
CH CH2
фазные водно-органические системы получали в
N
широком диапазоне концентраций полимеров и
Поли-N-винилпирролидон O
соли.
n Для установления экстракционных характе-
ристик в сосуды с пришлифованными пробками
H2C CH
помещали 10 см3 раствора красителя, содержа-
N O
Поли-N-винилкапролактам щего высаливатель, добавляли 1 см3 раствора
полимера с концентрацией 0,001–6% мас. и экс-
n трагировали на вибросмесителе до достижения
межфазного равновесия (3–5 мин).
Полиэтиленгликоль CH2 CH2 O
n При изучении влияния гидротропного эф-
фекта на степень извлечения в водно-солевые растворы красителя вводили по 0,5 см3 растворов алифатиче-
ского спирта и полимера. Применяли спирты квалификации «чистый», чистоту препаратов контролировали
по показателям преломления.
Эффективность экстракционного извлечения красителя оценивали по степени извлечения (R, %):

Ao  A
R=  100 ,
Ao

где Ао и А – оптические плотности водных растворов красителя до и после экстракции (КФК–2МП,


λ = 490 нм, толщина светопоглощающего слоя 1 см).
Содержание красного пигмента в антоциановом красителе устанавливали с применением стандартного
раствора СоSO4∙7Н2О по [4].
Количество каротиноидов в растительном сырье устанавливали по методике [10].

Результаты и их обсуждение
Наличие двух или более несмешивающихся фаз – основное условие жидкостно-жидкостной экстракции.
Введение в водный раствор полимера и антоцианового красителя больших количеств хорошо растворимых
неорганических солей приводит к уменьшению растворимости полимера и красителя (известный эффект
высаливания) [11]. При изучении фазовых равновесий в системах гидрофильный полимер – насыщенный
раствор соли установлено [12], что наиболее стабильные двухфазные системы образуются в присутствии
(NH4)2SO4 и Na2SO4 или NaCl ( экстракция ПВК).
Изучена зависимость степени извлечения антоцианового красителя из водного раствора от концентрации
полимера и природы соли (рис. 1 и 2). Вода в фазе, содержащей сульфат аммония, практически полностью
переходит в сольватные сферы иона аммония, ионы Na+ гидратируются в меньшей степени [13], поэтому
независимо от концентрации полимеров системы с (NH4)2SO4 более эффективны. Так, при однократной экс-
тракции ПВП максимальная степень извлечения красителя достигает 95% (высаливатель – сульфат аммо-
ния) и лишь 79% в системах с сульфатом натрия.
ИЗВЛЕЧЕНИЕ НАТУРАЛЬНЫХ КРАСИТЕЛЕЙ … 155

Рис. 1. Экстракция антоцианового красителя ПВК Рис. 2. Зависимость степени извлечения


(1–3) и ПВП (4, 5) из растворов хлорида натрия (1), антоцианового красителя от содержания ПЭГ в
сульфата натрия (2, 5), сульфата аммония (3, 4) водном растворе, высаливатель – (NH4)2SO4 (1),
Nа2SO4) (2)

В системах с ПВП и ПВК наибольшие степени извлечения красителя установлены при меньших концен-
трациях полимера, чем в системах, содержащих ПЭГ. Экстракционная эффективность изученных полимеров
по отношению к антоциановому красителю изменяется в ряду ПВП > ПВК > ПЭГ. Наличие в молекуле ПВП
(ПВК) карбонильной группы с повышенной электронной плотностью приводит к усилению ион-дипольных
взаимодействий между функциональными группами полимера с ароматическими группами красителя, по-
этому в системе ПВП (ПВК)–высаливатель–краситель достигаются наибольшие степени извлечения. Повы-
шенная комплексообразующая способность ПВП обусловлена содержанием в полимерной цепи звеньев ме-
нее стерически нагруженного и содержащего меньше гидрофобных углеводородных фрагментов N-винил-
пирролидона по сравнению с N-винилкапролактамом.
Системы с ПЭГ являются менее эффективными, что обусловлено прежде всего строением гетероцепного
полимера. Экстракция антоцианового красителя происходит за счет гидрофобных взаимодействий этилено-
вых групп молекулы ПЭГ с функциональными группами красителя, сила взаимодействий которых, по-
видимому, невелика. На УФ-спектрах поглощения систем ПВП–краситель и ПЭГ–краситель обнаружен но-
вый, не специфический для индивидуальных компонентов максимум поглощения при λ = 274 нм, что экспе-
риментально подтверждает образование комплексного соединения.
Изучено влияние рН водного раствора на степень извлечения антоцианового красителя из насыщенного
раствора ПВК и ПЭГ (рис. 3, 4). Независимо от концентрации ПВК и его молекулярной массы с уменьшени-
ем рН степень извлечения красителя существенно снижается. При рН=3,5 степень извлечения красителя
достигает 92–95%, при рН=1 не более 77%. При подкислении происходит протонирование группы >С=О [6],
что приводит к уменьшению взаимодействий между полимером и красителем и, как следствие, к снижению
степени извлечения антоцианового красителя. При экстракции ПЭГ в интервале рН 1–4 степень извлечения
красителя практически не изменяется. Так, при содержании в системе 1,67 мас. % ПЭГ извлекается 97 и 94%
красителя соответственно при рН 1 и 4. Незначительное влияние рН на степень извлечения объясняется
большим вкладом гидрофобных взаимодействий в присутствии ПЭГ. В щелочной среде экстракцию краси-
теля не изучали ввиду его неустойчивости при рН > 7 [14].
156 Е.В. ЧУРИЛИНА, Я.И. КОРЕНМАН, П.Т. СУХАНОВ, В.М. БОЛОТОВ, Г.В. ШАТАЛОВ

Рис. 3. Влияние рН на степень извлечения Рис. 4. Влияние рН на степень извлечения


антоцианового красителя ПВК (Мη = 6∙104 ) в антоцианового красителя ПЭГ в присутствии
присутствии NaCl: рН = 3,5 (1); рН = 1 (2). высаливателя (NH4)2SO4: рН=4 (1), рН=3 (2), рН=1 (3)

В отличие от ПВП и ПЭГ поли-N-винилкапролактамы характеризуются нижней критической температу-


рой растворения (32–37 °С) [6], поэтому извлечение антоцианового красителя возможно без применения
высаливателей. Так, при нагревании водного раствора выше температуры фазового разделения ПВК
(33,5 °С) извлекается до 86% красителя. Изучено влияние молекулярной массы ПВК на эффективность из-
влечения антоцианового красителя (рис. 5). Степень извлечения красителя не зависит от молекулярной мас-
сы полимера в интервале 1∙104 – 6∙104 (рис. 5, линии 2 и 3). Аналогичная закономерность характерна для
комплексообразования ПВК с флуоресцентными красителями [6]. При термоосаждении из водных раство-
ров полимера с Мη > 6∙104 степень извлечения красителя возрастает. При подкислении растворов перед тер-
моосаждением (рН  1) степень извлечения красителя также существенно снижается (рис. 5, линия 4).
Для извлечения антоцианового красителя из растительного сырья применяют различные органические
растворители, в том числе алифатические спирты [2]. Изучено влияние спиртов (этанол, 1-пропанол,
1-бутанол, 3- метил-1-бутанол) на эффективность экстракционного извлечения антоцианового красителя и
образование двухфазной системы (табл. 2).

Рис. 5. Зависимость степени извлечения


антоцианового красителя при термоосаждении
водного раствора ПВК от содержания полимера:
1 – Мη = 16∙104 (рН = 3,5); 2 – Мη = 6∙104 (рН = 3,5);
3 – Мη = 1∙104 (рН = 3,5); 4 – Мη = 1∙104 (рН = 1)
ИЗВЛЕЧЕНИЕ НАТУРАЛЬНЫХ КРАСИТЕЛЕЙ … 157

Таблица 2. Зависимость соотношения равновесных объемов водной (Vo) и органической (Vв) фаз и степени
извлечения антоцианового красителя полиэтиленгликолем из растворов сульфатов аммония от
присутствия алифатических спиртов в водном растворе
Спирт ωПЭГ = 1,67 мас. % ωПЭГ = 0,67 мас. %
Vв:Vо R, % Vв:Vо R, %
В отсутствие спирта 15:0,4 97 15:0,2 91
Этанол 15:0,5 89 15:0,4 84
1-пропанол 15:1,4 86 15:0,9 76
1-бутанол 15:2,0 88 15:1,5 86
3-метил-1-бутанол 15:1,5 73 15:1,5 67

В присутствии соли аммония независимо от содержания ПЭГ степень извлечения красителя максимальна
в отсутствие спиртов. Введение гидрофильного спирта (этанол) понижает степень извлечения красителя с 97
до 89% (сПЭГ = 1,67 мас. %) и с 82 до 57% (сПЭГ = 0,67 мас. %), что объясняется известным гидротропным
эффектом спирта [15]. При этом объем равновесной органической фазы (Vo) изменяется несущественно.
Возрастание Vo в системах полимер–1-пропанол и полимер–1-бутанол обусловлено различной растворимо-
стью спиртов в водно-солевом растворе. В ряду изученных спиртов 3-метил-1-бутанол наиболее гидрофобен
и, следовательно, в большей степени извлекается образующейся фазой полимера. Координационно актив-
ные группы полимера экранируются спиртом, поэтому степень извлечения красителя снижается. Присутст-
вие алифатических спиртов независимо от его гидрофобности и природы полимера нецелесообразно при
экстракции антоцианового красителя из водно-солевых растворов.
Таким образом, для практически полного (97%-ного) извлечения антоцианового красителя из водных
растворов могут применяться системы с содержанием 0,1 мас. % ПВП (ПВК) и 1,67 мас. % ПЭГ-5000 и
40 мас. % сульфата аммония при рН ≈4 или 26,5 мас. % хлорида натрия (в случае ПВК).
Изученные экстракционные системы на основе гидрофильных полимеров применены для извлечения каро-
тиноидов из растительного сырья. Способ извлечения осуществляется следующим образом: к измельченному
каротиноидсодержащему сырью добавляют водный раствор полимера ПВП (или ПВК) и перемешивают. Рас-
твор отфильтровывают и добавляют насыщенный 40% раствор (NH4)2SO4. В присутствии сульфата аммония
полимеры образуют самостоятельную фазу, которая извлекает краситель. Межфазное равновесие достигается
в течение 10 мин. Полимерный комплекс с красителем отделяют фильтрованием [15]. Наличие температуры
фазового разделения у ПВК позволяет получать концентраты каротиноидного красителя, не содержащие орга-
нические реагенты, за счет нагревания водно-полимерных растворов красителя до 32–37 °С.
Полученные концентраты рекомендуются в качестве биологически активных нутриентов при производ-
стве кондитерских изделий, функциональных молочных продуктов, а также для окрашивания некоторых
лекарственных препаратов в виде сиропов, капсул, таблеток.

Выводы
Разработаны новые способы извлечения антоцианового и каротиноидного красителей из водных раство-
ров и природных объектов. При однократной экстракции достигается 98–99%-ное извлечение красителей (в
форме комплекса с гидрофильным полимером) из водных растворов. Разработанные способы исключают
применение органических растворителей и температурную обработку, биологически активные вещества не
подвергаются деструкции.

Список литературы
1. Сарафанова Л.А. Пищевые добавки: энциклопедия. СПб., 2003. 688 с.
2. Болотов В.М., Нечаев А. П. Пищевые красители // Пищевые ингредиенты. Сырье и добавки. 2001. №1. С. 4–11.
3. Танчев С.С. Антоцианы в плодах и овощах. М., 1980. 304 с.
4. Харламова О.А., Кафка Б.В. Натуральные пищевые красители. М., 1979. 192 с.
5. Химическая энциклопедия / ред. И.Л. Кнунянц. М., 1998. Т. 1. 625 с.
6. Кирш Ю.Э. Поли-N-винилпирролидон и другие поли-N-виниламиды. М., 1998. 252 с.
7. Сидельковская Ф.П. Химия N-винилпирролидона и его полимеров. М., 1970. 150 с.
8. Патент 2228344 РФ. Способ получения антоцианового красителя из плодового сырья / А.П. Один,
А.Д. Хайрутдинова, В.М. Болотов // БИ. 2004. №13. С. 53.
158 Е.В. ЧУРИЛИНА, Я.И. КОРЕНМАН, П.Т. СУХАНОВ, В.М. БОЛОТОВ, Г.В. ШАТАЛОВ

9. Чурилина Е.В., Шаталов Г.В., Коренман Я.И., Суханов П.Т., Шаталов Г.В. Свойства водных растворов поли-
меров на основе N-винилкапролактама, содержащих антоциановый краситель // Вестник ВГУ: Сер: Химия.
Биология. Фармация. 2007. №2. С. 56–58.
10. Жеребцов Н.А., Григоров В.С., Корнеева О.С., Спивакова Л.В. Лабораторный практикум по биохимии. Воро-
неж, 2000. 140 с.
11. Соловкин А.С. Высаливание и количественное описание экстракционных равновесий. М., 1969. 124 с.
12. Мокшина Н.Я. Экстракция аминокислот и витаминов. Воронеж, 2007. 246 с.
13. Коренман И.М. Экстракция в анализе органических веществ. М., 1977. 200 с.
14. Нечаев А.П., Болотов В.М., Сарафанова Л.А. Пищевые красители. Классификация, свойства, анализ, примене-
ние. СПб., 2008. 240 с.
15. Патент 2358997 РФ. Способ извлечения каротиноидов из растительного сырья / Е.В. Чурилина, П.Т. Суханов,
Я.И. Коренман, В.М. Болотов, Г.В. Шаталов // БИ. 2009. №17. С. 60.
Поступило в редакцию 23 июня 2009 г.

После переработки 4 марта 2010 г.